Новые инсектицидные белки и способы их применения

Новые инсектицидные белки и способы их применения

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ССЫЛКА НА ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ, ПРЕДСТАВЛЕННЫЙ В ЭЛЕКТРОННОМ ВИДЕ

Перечень последовательностей с названием файла “4244PCT_sequence_listing.txt”, созданный 13 июня 2013 года, и размером 1499 килобайт подается в машиночитаемой форме одновременно с настоящим описанием. Перечень последовательностей является частью настоящего описания и включен в данный документ посредством ссылки во всей своей полноте.

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее раскрытие относится к области молекулярной биологии. Предусматриваются новые гены, которые кодируют пестицидные белки. Эти пестицидные белки и последовательности нуклеиновой кислоты, которые их кодируют, применимы в приготовлении пестицидных составов и в получении трансгенных растений, устойчивых к вредителям.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Биологический контроль насекомых-вредителей, имеющих сельскохозяйственное значение, с применением микробного агента, такого как грибы, бактерии или другие виды насекомых, представляет не оказывающую негативного влияния на окружающую среду и коммерчески привлекательную альтернативу синтетическим химическим пестицидам. В целом можно сказать, что применение биопестицидов приводит к меньшему риску загрязнения и неблагоприятных воздействий на окружающую среду, и биопестициды обеспечивают большую специфичность по отношению к мишени, чем та, которая характерна для традиционных химических инсектицидов широкого спектра действия. Кроме того, зачастую производство биопестицидов стоит дешевле и, вследствие этого, улучшается экономически эффективный выход продукции для широкого спектра сельскохозяйственных культур.

Определенные виды микроорганизмов из рода Bacillus, как известно, обладают пестицидной активностью против ряда насекомых-вредителей, в том числе Lepidoptera, Diptera, Coleoptera, Hemiptera и других. Bacillus thuringiensis (Bt) и Bacillus popilliae входят в число наиболее успешных средств биологического контроля, обнаруженных к настоящему времени. Патогенность в отношении насекомых также приписывалась штаммам B. larvae, B. lentimorbus, B. sphaericus и B. cereus. Микробные инсектициды, в частности полученные от штаммов Bacillus, сыграли важную роль в сельском хозяйстве как альтернатива химическому контролю вредителей.

Были разработаны культурные растения с улучшенной устойчивостью к насекомым при помощи генной инженерии культурных растений для выработки пестицидных белков от Bacillus. Например, с помощью генной инженерии были разработаны растения кукурузы и хлопчатника для выработки пестицидных белков, выделенных из штаммов Bt. Эти сельскохозяйственные культуры, разработанные при помощи генной инженерии, в настоящее время широко применяются в сельском хозяйстве и предоставляют фермеру не оказывающую негативного влияния на окружающую среду альтернативу традиционным способам контроля насекомых. В то время как они были признаны очень коммерчески успешными, эти разработанные при помощи генной инженерии устойчивые к насекомым культурные растения обеспечивают устойчивость только к узкому диапазону экономически важных насекомых-вредителей. В некоторых случаях, насекомые могут развивать устойчивость к различным инсектицидным соединениям, что повышает необходимость в идентификации альтернативных средств биологического контроля для контроля вредителей.

Соответственно, остается необходимость в новых пестицидных белках с различными диапазонами инсектицидной активности против насекомых-вредителей, например, инсектицидных белках, которые активны против ряда насекомых из отряда Lepidoptera и отряда Coleoptera, в том числе, без ограничения, насекомых-вредителей, которые развили устойчивость к существующим инсектицидам.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Предусматриваются композиции и способы обеспечения пестицидной активности у бактерий, растений, растительных клеток, тканей и семян. Композиции включают молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие последовательности пестицидных и инсектицидных полипептидов, векторы, содержащие такие молекулы нуклеиновой кислоты, и клетки-хозяева, содержащие векторы. Композиции также включают последовательности пестицидных полипептидов и антитела к таким полипептидам. Последовательности нуклеиновой кислоты можно применять в ДНК-конструкциях или кассетах экспрессии для трансформации и экспрессии в организмах, в том числе микроорганизмах и растениях. Нуклеотидные или аминокислотные последовательности могут представлять собой синтетические последовательности, которые были разработаны для экспрессии в организме, в том числе, без ограничения, микроорганизме или растении. Композиции также включают трансформированные бактерии, растения, растительные клетки, ткани и семена.

В частности, предусматриваются выделенные или рекомбинантные молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие полипептиды инсектицидный белок-1A Alcaligenes и инсектицидный белок-1B Alcaligenes (AfIP-1A и AfIP-1B), в том числе аминокислотные замены, делеции, вставки, и их фрагменты, и их комбинации. Дополнительно, охватываются аминокислотные последовательности, соответствующие полипептидам AfIP-1A и AfIP-1B. Предусматриваются выделенная или рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты, способная кодировать полипептид AfIP-1A с SEQ ID NO: 2, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, его фрагменты и его комбинации. Также предусматриваются выделенная или рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты, способная кодировать полипептид AfIP-1B с SEQ ID NO: 4, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, его фрагменты и его комбинации. Также охватываются последовательности нуклеиновой кислоты, которые комплементарны последовательности нуклеиновой кислоты согласно вариантам осуществления или которые гибридизуются с последовательностью согласно вариантам осуществления. Также предусматриваются выделенные или рекомбинантные полипептиды AfIP-1A с SEQ ID NO: 2, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, их фрагменты и их комбинации. Также предусматриваются выделенные или рекомбинантные полипептиды AfIP-1B с SEQ ID NO: 4, а также аминокислотные замены, делеции, вставки, их фрагменты и их комбинации.

Предусматриваются способы получения полипептидов и применения данных полипептидов для контроля или уничтожения чешуекрылых, жесткокрылых, нематодных, грибковых, полужесткокрылых и/или двукрылых вредителей. Трансгенные растения согласно вариантам осуществления экспрессируют одну или несколько пестицидных последовательностей, раскрытых в данном документе. В различных вариантах осуществления трансгенное растение дополнительно содержит один или несколько дополнительных генов для устойчивости к насекомым, например, один или несколько дополнительных генов для контроля жесткокрылых, чешуекрылых, полужесткокрылых или нематодных вредителей. Специалисту в данной области техники будет понятно, что трансгенное растение может содержать какой-либо ген, обеспечивающий агрономический признак, представляющий интерес.

Также включены способы выявления нуклеиновых кислот и полипептидов согласно вариантам осуществления в образце. Предусматривается набор для выявления присутствия полипептида AfIP-1A и/или AfIP-1B или выявления присутствия нуклеотидной последовательности, кодирующей полипептид AfIP-1A и/или AfIP-1B, в образце. Набор может предусматриваться вместе со всеми реагентами и контрольными образцами, необходимыми для проведения способа выявления предполагаемого средства, а также с инструкциями для применения.

Композиции и способы согласно вариантам осуществления применимы для получения организмов с улучшенной устойчивостью или переносимостью вредителей. Эти организмы и композиции, содержащие организмы, подходят для сельскохозяйственных целей. Композиции согласно вариантам осуществления также применимы для выработки измененных или улучшенных белков, которые обладают пестицидной активностью, или для выявления присутствия полипептидов AfIP-1A и AfIP-1B или нуклеиновых кислот в продуктах или организмах.

Настоящим раскрытием охватываются следующие варианты осуществления.

1. Рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид AfIP-1A.

2. Рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты согласно варианту осуществления 1, где полипептид AfIP-1A получен от штамма Alcaligenes faecalis.

3. Рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты согласно варианту осуществления 2, где штамм Alcaligenes faecalis представляет собой DDMC P4G7, депонированный под № доступа NRRL B-50625.

4. Рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты согласно варианту осуществления 1, 2 или 3, где полипептид AfIP-1A содержит аминокислотный мотив, представленный положениями 100-107 из SEQ ID NO: 257.

5. Рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты согласно варианту осуществления 4, где полипептид AfIP-1A дополнительно содержит какой-либо один или несколько аминокислотных мотивов, представленных положениями 15-26 из SEQ ID NO: 257, положениями 33-53 из SEQ ID NO: 257 и положениями 71-84 из SEQ ID NO: 257.

6. Рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты согласно варианту осуществления 1, 2, 3, 4 или 5, где полипептид AfIP-1A по меньшей мере на 80% идентичен аминокислотной последовательности c SEQ ID NO: 2.

7. Рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты согласно варианту осуществления 1, 2, 3, 4, 5 или 6, где полипептид AfIP-1A по меньшей мере на 80% идентичен аминокислотной последовательности c SEQ ID NO: 2 и содержит аминокислотный мотив, представленный положениями 100-107 из SEQ ID NO: 257.

8. Рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты согласно варианту осуществления 7, где полипептид AfIP-1A дополнительно содержит какой-либо один или несколько аминокислотных мотивов, представленных положениями 15-26 из SEQ ID NO: 257, положениями 33-53 из SEQ ID NO: 257, положениями 71-84 из SEQ ID NO: 257 и положениями 100-107 из SEQ ID NO: 257.

9. Рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты согласно варианту осуществления 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8, где полипептид AfIP-1A содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 255, где Xaa в положении 6 представляет собой Ile или Thr; Xaa в положении 7 представляет собой Ala или Val; Xaa в положении 9 представляет собой Glu или Gly; Xaa в положении 13 представляет собой Ile или Val; Xaa в положении 19 представляет собой Trp, Glu, Phe, Ile, His, Asn или Tyr; Xaa в положении 20 представляет собой Ile, Val, Ala, Cys, Glu, Phe, Gly, Met, Asn, Gln, Arg, Ser или Thr; Xaa в положении 23 представляет собой Thr или Ala; Xaa в положении 24 представляет собой Ile или Leu; Xaa в положении 30 представляет собой Asn или Ser; Xaa в положении 33 представляет собой Val или Ile; Xaa в положении 35 представляет собой Gly или Asn; Xaa в положении 36 представляет собой Ala, Gly, Asp, Glu, Phe, Gly, Ile, Leu, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 37 представляет собой Tyr, Ala, Cys, Asp, Glu, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Arg, Ser, Thr, Val или Trp; Xaa в положении 38 представляет собой Leu, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Met, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 39 представляет собой Arg, Lys, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 40 представляет собой Trp, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val или Tyr; Xaa в положении 41 представляет собой Gly, Cys или Gln; Xaa в положении 42 представляет собой Lys, Cys, Glu, His, Leu, Met, Asn, Gln, Arg или Thr; Xaa в положении 43 представляет собой Phe, Tyr, Ala, Cys, Glu, Ile, Leu, Met, Gln, Ser, Val или Trp; Xaa в положении 44 представляет собой His, Ala, Asp, Glu, Gly, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Glu, Arg, Ser, Thr, Val, Trp; Xaa в положении 45 представляет собой Val, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr или Trp; Xaa в положении 46 представляет собой Pro, Ala, Cys, Asp, Glu, Gly, His, Lys, Leu, Met, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 47 представляет собой Gly, Leu или Phe; Xaa в положении 48 представляет собой Asp, Asn, Leu или Phe; Xaa в положении 49 представляет собой Lys, Leu или Phe; Xaa в положении 50 представляет собой Asp, Leu или Phe; Xaa в положении 51 представляет собой Lys, Leu или Phe; Xaa в положении 52 представляет собой Glu, Leu или Phe; Xaa в положении 53 представляет собой Ile, Leu или Phe; Xaa в положении 54 представляет собой Ser, Thr, Leu или Phe; Xaa в положении 55 представляет собой Pro, Leu или Phe; Xaa в положении 56 представляет собой Ser или Leu; Xaa в положении 57 представляет собой Gln, Glu, Leu или Phe; Xaa в положении 58 представляет собой Ile, Val, Leu или Phe; Xaa в положении 60 представляет собой Gly, Leu или Phe; Xaa в положении 61 представляет собой Thr, Ile или Phe; Xaa в положении 62 представляет собой Ile, Val, Leu или Phe; Xaa в положении 64 представляет собой Lys, Glu, Leu или Phe; Xaa в положении 65 представляет собой Asp, Leu или Phe; Xaa в положении 67 представляет собой Asp или Glu; Xaa в положении 68 представляет собой Ser или Thr; Xaa в положении 73 представляет собой Ser или Ala; Xaa в положении 74 представляет собой Cys, Ala, Asp, Glu, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr или Tyr; Xaa в положении 76 представляет собой Arg, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 82 представляет собой Gly, Glu, Asn, Trp или Tyr; Xaa в положении 96 представляет собой Val или Ile; Xaa в положении 101 представляет собой Trp, Phe или Tyr; Xaa в положении 104 представляет собой Pro, Ala, Phe, Gly, His, Met, Gln, Arg или Val; Xaa в положении 105 представляет собой Trp, Asp, Phe, Ile, Leu или Tyr; Xaa в положении 111 представляет собой Asp или Asn; Xaa в положении 113 представляет собой Leu или Ser; Xaa в положении 115 представляет собой Val или Ile; Xaa в положении 116 представляет собой Lys или Glu; Xaa в положении 120 представляет собой Asn или Lys; Xaa в положении 121 представляет собой Tyr, Leu или Phe; Xaa в положении 122 представляет собой Thr, Leu или Phe; Xaa в положении 123 представляет собой Val, Leu, Phe или Asn; Xaa в положении 124 представляет собой Ile, Ser, Leu или Phe; Xaa в положении 125 представляет собой Lys, Leu, Phe или Met; Xaa в положении 126 представляет собой Lys, Leu или Phe; Xaa в положении 128 представляет собой Gly, Leu или Phe; Xaa в положении 129 представляет собой Gly, Leu или Phe; Xaa в положении 130 представляет собой Ser, Leu или Phe; Xaa в положении 132 представляет собой Ser, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 133 представляет собой Gly, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val или Trp; Xaa в положении 134 представляет собой Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 135 представляет собой Thr, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 136 представляет собой Gly, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 137 представляет собой Asn, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Glu, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 138 представляет собой Ile, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 139 представляет собой Phe, Ala, Cys, Asp, Glu, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; и Xaa в положении 140 представляет собой Ile, Ala, Cys, Phe, His, Leu, Met, Asn, Gln, Thr, Val или Tyr; и где 1-14 аминокислот, необязательно, удалены с N-конца полипептида.

10. Рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты согласно варианту осуществления 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8, где полипептид AfIP-1A содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 256, где Xaa в положении 6 представляет собой Ile или Thr; Xaa в положении 7 представляет собой Ala, Met или Val; Xaa в положении 8 представляет собой Thr или Asp; Xaa в положении 9 представляет собой Glu, Leu или Gly; Xaa в положении 10 представляет собой Glu или Asn; Xaa в положении 11 представляет собой Ser или Val; Xaa в положении 12 представляет собой Lys или Glu; Xaa в положении 13 представляет собой Ile или Val; Xaa в положении 14 представляет собой Arg или Gln; Xaa в положении 16 представляет собой Tyr или Gln; Xaa в положении 17 представляет собой Ala или Ser; Xaa в положении 19 представляет собой Trp, Glu, Phe, Ile, His, Asn или Tyr; Xaa в положении 20 представляет собой Ile, Val, Ala, Cys, Glu, Phe, Gly, Met, Asn, Gln, Arg, Ser или Thr; Xaa в положении 23 представляет собой Thr, Glu или Ala; Xaa в положении 24 представляет собой Ile или Leu; Xaa в положении 26 представляет собой Val или Ser; Xaa в положении 27 представляет собой Val или Glu; Xaa в положении 29 представляет собой Ser или Met; Xaa в положении 30 представляет собой Asn, Asp или Ser; Xaa в положении 31 представляет собой Phe или Ile; Xaa в положении 32 представляет собой Lys или Glu; Xaa в положении 33 представляет собой Val или Ile; Xaa в положении 34 представляет собой Glu или Lys; Xaa в положении 35 представляет собой Gly или Asn; Xaa в положении 36 представляет собой Ala, Gly, Asp, Glu, Phe, Gly, Ile, Leu, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 37 представляет собой Tyr, Ala, Cys, Asp, Glu, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Arg, Ser, Thr, Val или Trp; Xaa в положении 38 представляет собой Leu, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Met, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 39 представляет собой Arg, Lys, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 40 представляет собой Trp, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val или Tyr; Xaa в положении 41 представляет собой Gly, Cys или Gln; Xaa в положении 42 представляет собой Lys, Cys, Glu, His, Leu, Met, Asn, Gln, Arg или Thr; Xaa в положении 43 представляет собой Phe, Tyr, Ala, Cys, Glu, Ile, Leu, Met, Gln, Ser, Val или Trp; Xaa в положении 44 представляет собой His, Ala, Asp, Glu, Gly, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Glu, Arg, Ser, Thr, Val, Trp; Xaa в положении 45 представляет собой Val, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr или Trp; Xaa в положении 46 представляет собой Pro, Ala, Cys, Asp, Glu, Gly, His, Lys, Leu, Met, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 47 представляет собой Gly, Leu или Phe; Xaa в положении 48 представляет собой Asp, Asn, Leu или Phe; Xaa в положении 49 представляет собой Lys, Leu или Phe; Xaa в положении 50 представляет собой Asp, Ser, Leu или Phe; Xaa в положении 51 представляет собой Lys, Asn, Leu или Phe; Xaa в положении 52 представляет собой Glu, Leu или Phe; Xaa в положении 53 представляет собой Ile, Leu или Phe; Xaa в положении 54 представляет собой Ser, Thr, Leu или Phe; Xaa в положении 55 представляет собой Pro, Ser, Leu или Phe; Xaa в положении 56 представляет собой Ser, Asp или Leu; Xaa в положении 57 представляет собой Gln, Thr, Glu, Leu или Phe; Xaa в положении 58 представляет собой Ile, Val, Leu или Phe; Xaa в положении 60 представляет собой Gly, Lys, Leu или Phe; Xaa в положении 61 представляет собой Thr, Ile или Phe; Xaa в положении 62 представляет собой Ile, Lys, Val, Leu или Phe; Xaa в положении 64 представляет собой Lys, Ser, Glu, Leu или Phe; Xaa в положении 65 представляет собой Asp, Ser, Leu или Phe; Xaa в положении 66 представляет собой Glu или Gly; Xaa в положении 67 представляет собой Asp, Thr или Glu; Xaa в положении 68 представляет собой Ser, Lys или Thr; Xaa в положении 69 представляет собой Tyr или Ser; Xaa в положении 70 представляет собой Thr или Lys; Xaa в положении 73 представляет собой Ser или Ala; Xaa в положении 74 представляет собой Cys, Ala, Asp, Glu, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr или Tyr; Xaa в положении 76 представляет собой Arg, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 77 представляет собой Glu или Ala; Xaa в положении 78 представляет собой Asn или Asp; Xaa в положении 79 представляет собой Ala или Thr; Xaa в положении 82 представляет собой Gly, Glu, Asn, Trp или Tyr; Xaa в положении 86 представляет собой Gly или Lys; Xaa в положении 88 представляет собой Ser или Glu; Xaa в положении 89 представляет собой Leu или Ile; Xaa в положении 91 представляет собой Asp или His; Xaa в положении 92 представляет собой Gly или Asp; Xaa в положении 95 представляет собой Leu или Trp; Xaa в положении 96 представляет собой Val, Leu или Ile; Xaa в положении 97 представляет собой Phe или Ala; Xaa в положении 98 представляет собой Glu или Thr; Xaa в положении 100 представляет собой Tyr или Lys; Xaa в положении 101 представляет собой Trp, Phe или Tyr; Xaa в положении 104 представляет собой Pro, Ala, Phe, Gly, His, Met, Gln, Arg или Val; Xaa в положении 105 представляет собой Trp, Asp, Phe, Ile, Leu или Tyr; Xaa в положении 106 представляет собой Ser или Ala; Xaa в положении 111 представляет собой Asp, His или Asn; Xaa в положении 112 представляет собой Glu или Ser; Xaa в положении 113 представляет собой Leu или Ser; Xaa в положении 114 представляет собой Thr или Ser; Xaa в положении 115 представляет собой Val или Ile; Xaa в положении 116 представляет собой Lys, Thr или Glu; Xaa в положении 117 представляет собой Asp или Glu; Xaa в положении 118 представляет собой Lys или Asp; Xaa в положении 119 представляет собой Glu или Asn; Xaa в положении 120 представляет собой Asn или Lys; Xaa в положении 121 представляет собой Tyr, Leu или Phe; Xaa в положении 122 представляет собой Thr, Lys, Leu или Phe; Xaa в положении 123 представляет собой Val, Ile, Leu, Phe или Asn; Xaa в положении 124 представляет собой Ile, Ser, Asp, Leu или Phe; Xaa в положении 125 представляет собой Lys, Leu, Phe или Met; Xaa в положении 126 представляет собой Lys, Glu, Leu или Phe; Xaa в положении 128 представляет собой Gly, Leu или Phe; Xaa в положении 129 представляет собой Gly, Asn, Leu или Phe; Xaa в положении 130 представляет собой Ser, Ile, Leu или Phe; Xaa в положении 131 представляет собой Pro или Ser; Xaa в положении 132 представляет собой Ser, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 133 представляет собой Gly, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val или Trp; Xaa в положении 134 представляет собой Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 135 представляет собой Thr, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 136 представляет собой Gly, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 137 представляет собой Asn, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Glu, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 138 представляет собой Ile, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 139 представляет собой Phe, Ala, Cys, Asp, Glu, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 140 представляет собой Ile, Ala, Cys, Phe, His, Leu, Met, Asn, Gln, Thr, Val или Tyr; Xaa в положении 142 представляет собой Val или Cys; Xaa в положении 143 представляет собой Val или Ile; Xaa в положении 145 представляет собой Lys или Val; и Xaa в положении 146 представляет собой Ser или Gly; и где 1-14 аминокислот, необязательно, удалены с N-конца полипептида.

11. Рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты согласно варианту осуществления 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8, где полипептид AfIP-1A содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 257, где Xaa в положении 6 представляет собой Ile, Thr, Leu, Met, Val или Ser; Xaa в положении 7 представляет собой Ala, Met, Val, Leu, Ile или Gly; Xaa в положении 8 представляет собой Thr, Asp, Ser или Glu; Xaa в положении 9 представляет собой Glu, Leu, Gly, Asp, Ala, Ile, Val или Met; Xaa в положении 10 представляет собой Glu, Asn, Asp или Gln; Xaa в положении 11 представляет собой Ser, Val, Thr, Ile, Leu или Met; Xaa в положении 12 представляет собой Lys, Glu, Arg или Asp; Xaa в положении 13 представляет собой Ile, Val, Leu или Met; Xaa в положении 14 представляет собой Arg, Gln, Lys или Asn; Xaa в положении 16 представляет собой Tyr, Gln, Trp, Phe или Asn; Xaa в положении 17 представляет собой Ala, Ser, Gly или Thr; Xaa в положении 19 представляет собой Trp, Glu, Phe, Ile, His, Asn или Tyr; Xaa в положении 20 представляет собой Ile, Val, Ala, Cys, Glu, Phe, Gly, Met, Asn, Gln, Arg, Ser или Thr; Xaa в положении 23 представляет собой Thr, Glu, Ala, Ser, Asp или Gly; Xaa в положении 24 представляет собой Ile, Leu, Val или Met; Xaa в положении 26 представляет собой Val, Ser, Ile, Leu, Met или Thr; Xaa в положении 27 представляет собой Val, Glu, Ile, Leu, Met или Asp; Xaa в положении 29 представляет собой Ser, Met, Thr, Ile, Leu или Val; Xaa в положении 30 представляет собой Asn, Asp, Ser, Glu, Gln или Thr; Xaa в положении 31 представляет собой Phe, Ile, Leu, Val или Met; Xaa в положении 32 представляет собой Lys, Glu, Arg или Asp; Xaa в положении 33 представляет собой Val, Ile, Leu или Met; Xaa в положении 34 представляет собой Glu, Lys, Asp или Arg; Xaa в положении 35 представляет собой Gly или Asn; Xaa в положении 36 представляет собой Ala, Gly, Asp, Glu, Phe, Gly, Ile, Leu, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 37 представляет собой Tyr, Ala, Cys, Asp, Glu, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Arg, Ser, Thr, Val или Trp; Xaa в положении 38 представляет собой Leu, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Met, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 39 представляет собой Arg, Lys, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 40 представляет собой Trp, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val или Tyr; Xaa в положении 41 представляет собой Gly, Cys или Gln; Xaa в положении 42 представляет собой Lys, Cys, Glu, His, Leu, Met, Asn, Gln, Arg или Thr; Xaa в положении 43 представляет собой Phe, Tyr, Ala, Cys, Glu, Ile, Leu, Met, Gln, Ser, Val или Trp; Xaa в положении 44 представляет собой His, Ala, Asp, Glu, Gly, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Glu, Arg, Ser, Thr, Val, Trp; Xaa в положении 45 представляет собой Val, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr или Trp; Xaa в положении 46 представляет собой Pro, Ala, Cys, Asp, Glu, Gly, His, Lys, Leu, Met, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 47 представляет собой Gly, Leu или Phe; Xaa в положении 48 представляет собой Asp, Asn, Glu, Gln, Leu или Phe; Xaa в положении 50 представляет собой Asp, Ser, Glu, Thr, Leu или Phe; Xaa в положении 51 представляет собой Lys, Asn, Arg, Gln, Leu или Phe; Xaa в положении 52 представляет собой Glu, Leu или Phe; Xaa в положении 53 представляет собой Ile, Leu или Phe; Xaa в положении 54 представляет собой Ser, Thr, Leu или Phe; Xaa в положении 55 представляет собой Pro, Ser, Thr, Leu или Phe; Xaa в положении 56 представляет собой Ser, Asp, Thr, Glu или Leu; Xaa в положении 57 представляет собой Gln, Thr, Glu, Asn, Ser, Asp, Leu или Phe; Xaa в положении 58 представляет собой Ile, Val, Leu, Met или Phe; Xaa в положении 60 представляет собой Gly, Lys, Ala или Arg; Xaa в положении 61 представляет собой Thr, Ile или Phe; Xaa в положении 62 представляет собой Ile, Lys, Val, Leu, Met, Arg или Phe; Xaa в положении 64 представляет собой Lys, Ser, Glu, Arg, Thr, Asp, Leu или Phe; Xaa в положении 65 представляет собой Asp, Ser, Glu, Thr, Leu или Phe; Xaa в положении 66 представляет собой Glu, Gly, Asp или Ala; Xaa в положении 67 представляет собой Asp, Thr, Glu или Ser; Xaa в положении 68 представляет собой Ser, Lys, Thr или Arg; Xaa в положении 69 представляет собой Tyr, Ser, Trp, Phe или Thr; Xaa в положении 70 представляет собой Thr, Lys, Ser или Arg; Xaa в положении 73 представляет собой Ser, Ala, Thr или Gly; Xaa в положении 74 представляет собой Cys, Ala, Asp, Glu, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr или Tyr; Xaa в положении 76 представляет собой Arg, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 77 представляет собой Glu, Ala, Asp или Gly; Xaa в положении 78 представляет собой Asn, Asp, Gln или Glu; Xaa в положении 79 представляет собой Ala, Thr, Gly или Ser; Xaa в положении 82 представляет собой Gly, Glu, Asn, Trp или Tyr; Xaa в положении 86 представляет собой Gly, Lys, Ala или Arg; Xaa в положении 88 представляет собой Ser, Glu, Thr или Asp; Xaa в положении 89 представляет собой Leu, Ile, Val или Met; Xaa в положении 91 представляет собой Asp, His или Glu; Xaa в положении 92 представляет собой Gly, Asp, Ala или Glu; Xaa в положении 95 представляет собой Leu, Trp, Ile, Val, Met, Phe или Tyr; Xaa в положении 96 представляет собой Val, Leu, Ile или Met; Xaa в положении 97 представляет собой Phe, Ala или Gly; Xaa в положении 98 представляет собой Glu, Thr, Asp или Ser; Xaa в положении 100 представляет собой Tyr, Lys, Trp или Arg; Xaa в положении 101 представляет собой Trp, Phe или Tyr; Xaa в положении 104 представляет собой Pro, Ala, Phe, Gly, His, Met, Gln, Arg или Val; Xaa в положении 105 представляет собой Trp, Asp, Phe, Ile, Leu или Tyr; Xaa в положении 106 представляет собой Ser, Ala, Thr или Gly; Xaa в положении 111 представляет собой Asp, His, Asn, Glu или Gln; Xaa в положении 112 представляет собой Glu, Ser, Asp или Thr; Xaa в положении 113 представляет собой Leu, Ser, Ile, Val, Met или Thr; Xaa в положении 114 представляет собой Thr или Ser; Xaa в положении 115 представляет собой Val, Ile, Val или Met; Xaa в положении 116 представляет собой Lys, Thr, Glu, Arg, Ser или Asp; Xaa в положении 117 представляет собой Asp или Glu; Xaa в положении 118 представляет собой Lys, Asp, Arg или Glu; Xaa в положении 119 представляет собой Glu, Asn, Asp или Gln; Xaa в положении 120 представляет собой Asn, Lys, Asp или Arg; Xaa в положении 121 представляет собой Tyr, Leu или Phe; Xaa в положении 122 представляет собой Thr, Lys, Ser, Arg, Leu или Phe; Xaa в положении 123 представляет собой Val, Ile, Leu, Met, Phe или Asn; Xaa в положении 124 представляет собой Ile, Ser, Asp, Leu, Val Met, Thr, Glu или Phe; Xaa в положении 125 представляет собой Lys, Leu, Phe или Met; Xaa в положении 126 представляет собой Lys, Glu, Arg, Asp, Leu или Phe; Xaa в положении 128 представляет собой Gly, Leu или Phe; Xaa в положении 129 представляет собой Gly, Asn, Ala, Gln, Leu или Phe; Xaa в положении 130 представляет собой Ser, Ile, Thr, Leu, Val, Met или Phe; Xaa в положении 131 представляет собой Pro, Ser или Thr; Xaa в положении 132 представляет собой Ser, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 133 представляет собой Gly, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val или Trp; Xaa в положении 134 представляет собой Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 135 представляет собой Thr, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 136 представляет собой Gly, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 137 представляет собой Asn, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Glu, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 138 представляет собой Ile, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 139 представляет собой Phe, Ala, Cys, Asp, Glu, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 140 представляет собой Ile, Ala, Cys, Phe, His, Leu, Met, Asn, Gln, Thr, Val или Tyr; Xaa в положении 142 представляет собой Val, Cys, Ile, Leu или Met; Xaa в положении 143 представляет собой Val, Ile; Leu или Met; Xaa в положении 145 представляет собой Lys, Val, Arg, Ile, Leu или Met; и Xaa в положении 146 представляет собой Ser, Gly, Thr или Ala; и где 1-14 аминокислот, необязательно, удалены с N-конца полипептида.

12. Рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты согласно варианту осуществления 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или 11, где рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 93, его фрагмент или комплементарную ему последовательность.

13. Рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты согласно варианту осуществления 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или 11, где полипептид AfIP-1A содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 94, или ее фрагмент.

14. Рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты согласно варианту осуществления 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или 11, где рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты гибридизуется при жестких условиях с полинуклеотидом с SEQ ID NO: 1.

15. Рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты согласно варианту осуществления 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или 11, где рекомбинантная молекула нуклеиновой кислоты содержит полинуклеотид с SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 93.

16. Трансгенное растение или его потомство, содержащие рекомбинантную молекулу нуклеиновой кислоты согласно варианту осуществления 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15.

17. Трансгенное растение или его потомство, стабильно трансформированные рекомбинантной молекулой нуклеиновой кислоты согласно варианту осуществления 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15.

18. Трансгенное растение согласно варианту осуществления 16 или 17, где трансгенное растение является однодольным.

19. Трансгенное растение согласно варианту осуществления 16 или 17, где трансгенное растение является двудольным.

20. Трансгенное растение согласно варианту осуществления 16, 17, 18 или 19, дополнительно содержащее один или несколько дополнительных трансгенных признаков.

21. Трансгенное растение согласно варианту осуществления 20, где один или несколько дополнительных трансгенных признаков выбраны из устойчивости к насекомым, устойчивости к гербицидам, устойчивости к грибам, устойчивости к вирусам или переносимости стрессов, устойчивости к заболеваниям, мужской стерильности, силы стебля, повышенной урожайности, модифицированных видов крахмала, улучшенного профиля масел, сбалансированного содержания аминокислот, высокого содержания лизина или метионина, повышенной усвояемости, улучшенного качества волокон и переносимости засухи.

22. Кассета экспрессии, содержащая рекомбинантную молекулу нуклеиновой кислоты согласно варианту осуществления 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 или 15 и одну или несколько регуляторных последовательностей, функционально связанных с ней и управляющих экспрессией полипептида AfIP-1A.

23. Трансгенное растение, содержащее кассету экспрессии согласно варианту осуществления 22.

24. Трансгенная растительная клетка, содержащая кассету экспрессии согласно варианту осуществления 22.

25. Семя, зерно или продукт их переработки из трансгенного растения согласно варианту осуществления 23 или его потомства, где семя, зерно или продукт их переработки содержат рекомбинантную молекулу нуклеиновой кислоты.

26. Семя согласно варианту осуществления 25, где на семя было нанесено одно или несколько средств обработки семян.

27. Семя согласно варианту осуществления 26, где одно или несколько средств обработки семян выбраны из гербицида, инсектицида, фунгицида, ингибитора прорастания, усилителя прорастания, регулятора роста растения, бактерицида и нематоцида.

28. Способ экспрессии в растении молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид AfIP-1A, причем способ включает получение растения, способного экспрессировать молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие полипептид AfIP-1A, из трансформированной растительной клетки, содержащей кассету экспрессии согласно пункту 22.

29. Трансгенное растение, полученное по способу согласно варианту осуществления 28.

30. Семя, зерно или продукт их переработки из трансгенного растения согласно варианту осуществления 29.

31. Трансгенное растение согласно варианту осуществления 29, где трансгенное растение дополнительно содержит один или несколько дополнительных трансгенных признаков.

32. Трансгенное растение согласно варианту осуществления 31, где один или несколько дополнительных трансгенных признаков выбраны из устойчивости к насекомым, устойчивости к гербицидам, устойчивости к грибам, устойчивости к вирусам, переносимости стрессов, устойчивости к заболеваниям, мужской стерильности, силы стебля, повышенной урожайности, модифицированных видов крахмала, улучшенного профиля масел, сбалансированного содержания аминокислот, высокого содержания лизина или метионина, повышенной усвояемости, улучшенного качества волокон, цветения, развития колоса и семени, улучшения эффективности использования азота, измененной реактивности в отношении азота, устойчивости к засухе или ее переносимости, устойчивости к холоду или его переносимости, устойчивости к солям или их переносимости и повышенной урожайности при стрессе.

33. Трансгенное растение согласно варианту осуществления 31 или 32, где трансгенное растение является однодольным.

34. Трансгенное растение согласно варианту осуществления 31 или 32, где трансгенное растение является двудольным.

35. Рекомбинантный полипептид AfIP-1A.

36. Рекомбинантный полипептид AfIP-1A согласно варианту осуществления 35, где полипептид AfIP-1A получен из штамма Alcaligenes faecalis.

37. Рекомбинантный полипептид AfIP-1A согласно варианту осуществления 36, где штамм Alcaligenes faecalis представляет собой DDMC P4G7, депонированный под № доступа NRRL B-50625.

38. Рекомбинантный полипептид AfIP-1A согласно варианту осуществления 35, 36 или 37, где полипептид AfIP-1A содержит аминокислотный мотив, представленный положениями 100-107 из SEQ ID NO: 257.

39. Рекомбинантный полипептид AfIP-1A согласно варианту осуществления 38, дополнительно содержащий какой-либо один или несколько аминокислотных мотивов, представленных положениями 15-26 из SEQ ID NO: 257, положениями 33-53 из SEQ ID NO: 257 и положениями 71-84 из SEQ ID NO: 257.

40. Рекомбинантный полипептид AfIP-1A согласно варианту осуществления 35, 36, 37, 38 или 39, где полипептид по меньшей мере на 80% идентичен аминокислотной последовательности с SEQ ID NO: 2.

41. Рекомбинантный полипептид AfIP-1A согласно варианту осуществления 35, 36, 37, 38 или 39, где полипептид по меньшей мере на 80% идентичен аминокислотной последовательности с SEQ ID NO: 2, и аминокислотный мотив представлен положениями 100-107 из SEQ ID NO: 257.

42. Рекомбинантный полипептид AfIP-1A согласно варианту осуществления 41, где полипептид AfIP-1A дополнительно содержит какой-либо один или несколько аминокислотных мотивов, представленных положениями 15-26 из SEQ ID NO: 257, положениями 33-53 из SEQ ID NO: 257 и положениями 71-84 из SEQ ID NO: 257.

43. Рекомбинантный полипептид AfIP-1A согласно варианту осуществления 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41 или 42, где полипептид AfIP-1A содержит аминокислотную последовательность с SEQ ID NO: 255, где Xaa в положении 6 представляет собой Ile или Thr; Xaa в положении 7 представляет собой Ala или Val; Xaa в положении 9 представляет собой Glu или Gly; Xaa в положении 13 представляет собой Ile или Val; Xaa в положении 19 представляет собой Trp, Glu, Phe, Ile, His, Asn или Tyr, Xaa в положении 20 представляет собой Ile, Val, Ala, Cys, Glu, Phe, Gly, Met, Asn, Gln, Arg, Ser или Thr; Xaa в положении 23 представляет собой Thr или Ala; Xaa в положении 24 представляет собой Ile или Leu; Xaa в положении 30 представляет собой Asn или Ser; Xaa в положении 33 представляет собой Val или Ile; Xaa в положении 35 представляет собой Gly или Asn; Xaa в положении 36 представляет собой Ala, Gly, Asp, Glu, Phe, Gly, Ile, Leu, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 37 представляет собой Tyr, Ala, Cys, Asp, Glu, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Arg, Ser, Thr, Val или Trp; Xaa в положении 38 представляет собой Leu, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Met, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 39 представляет собой Arg, Lys, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 40 представляет собой Trp, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val или Tyr; Xaa в положении 41 представляет собой Gly, Cys или Gln; Xaa в положении 42 представляет собой Lys, Cys, Glu, His, Leu, Met, Asn, Gln, Arg или Thr; Xaa в положении 43 представляет собой Phe, Tyr, Ala, Cys, Glu, Ile, Leu, Met, Gln, Ser, Val или Trp; Xaa в положении 44 представляет собой His, Ala, Asp, Glu, Gly, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Glu, Arg, Ser, Thr, Val, Trp; Xaa в положении 45 представляет собой Val, Ala, Cys, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr или Trp; Xaa в положении 46 представляет собой Pro, Ala, Cys, Asp, Glu, Gly, His, Lys, Leu, Met, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr; Xaa в положении 47 представляет собой Gly, Leu или Phe; Xaa в положении 48 представляет собой Asp, Asn, Leu или Phe; Xaa в положении 49 представляет собой Lys, Leu или Phe; Xaa в положении 50 представляет собой Asp, Leu или Phe; Xaa в положении 51 представляет собой Lys, Leu или Phe; Xaa в положении 52 представляет собой Glu, Leu или Phe; Xaa в положении 53 представляет собой Ile, Leu или Phe; Xaa в положении 54 представляет собой Ser, Thr, Leu или Phe; Xaa в положении 55 представляет собой Pro, Leu или Phe; Xaa в положении 56 представляет собой Ser или Leu; Xaa в положении 57 представляет собой Gln, Glu, Leu или Phe; Xaa в положении 58 представляет собой Ile, Val, Leu или Phe; Xaa в положении 60 представляет собой Gly, Leu of Phe; Xaa в положении 61 представляет собой Thr, Ile или Phe; Xaa в положении