Фармацевтическая композиция для лечения и предотвращения дегенеративных неврологических нарушений, которая содержит, в качестве активного ингредиента, смешанный экстракт коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки или его фракцию

Фармацевтическая композиция для лечения и предотвращения дегенеративных неврологических нарушений, которая содержит, в качестве активного ингредиента, смешанный экстракт коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки или его фракцию

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Область изобретения

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения и предотвращения дегенеративных неврологических нарушений, которая содержит смешанный экстракт двух или больше типов, выбранных из группы, состоящей из коры корня пиона полукустарникового (Moutan Radicis Cortex), корня дудника даурского (Angelicae Dahuricae Radix) и корня володушки (Bupleuri Radix), или его фракцию в качестве активного ингредиента.

2. Описание связанной области

За последние два десятилетия в мире быстро растет число пациентов с дегенеративными неврологическими нарушениями. При лечении дегенеративного неврологического нарушения наиболее важной стадией является предотвращение. Однако причина заболевания до сих пор не полностью понятна, и, таким образом, способ лечения все еще требует изучения. Общий патологический феномен дегенеративного неврологического нарушения представляет собой гибель клеток центральной нервной системы. В отличие от клеток других органов, регенерация клеток центральной нервной системы почти невозможна после гибели клеток, что ведет к постоянной утрате функции. Способы лечения таких заболеваний головного мозга, разработанные до сегодняшнего времени, преимущественно сосредоточены на анализе механизма гибели самих нервных клеток и предотвращении гибели на основании анализа. В соответствии с результатами последних фундаментальных и клинических исследований болезни Альцгеймера и болезни Паркинсона, воспалительная реакция в головном мозге является основной причиной гибели нейронов. В действительности, увеличение медиаторов воспаления и реакционно-способного кислорода подтверждено в цереброспинальной жидкости у пациентов с заболеваниями головного мозга. Также множество активных микроглиальных клеток наблюдают в области повреждения головного мозга, которые указывают, что воспаление головного мозга является основной причиной болезни Паркинсона. Следовательно, ингибирование воспаления головного мозга посредством нейроглиальных клеток стало мишенью при лечении дегенеративного неврологического нарушения. Однако терапевтические средства, разработанные до настоящего момента, эффективны только при регулировании симптомов заболевания, но не эффективны при лечении самого дегенеративного неврологического нарушения. Многие загрязнители окружающей среды, воздействию которых постоянно подвержено современное общество, и мутации в генах, являющиеся результатом загрязнителей, вызывают дегенеративное неврологическое нарушение. Следовательно, необходимо разрабатывать профилактическое и терапевтическое средство для дегенеративного неврологического нарушения на основании идеи, полностью отличающейся от стандартных.

Дегенеративное неврологическое нарушение включает болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, инсульт, хорею Гентингтона и повреждение спинного мозга и т. д. Среди этих заболеваний болезнь Паркинсона представляет собой второе наиболее распространенное дегенеративное неврологическое нарушение, которое поражает 1-2% корейцев в возрасте старше 60 и 4-5% корейцев в возрасте старше 85. В последнее время болезнь Паркинсона быстро распространяется в Корее среди людей среднего возраста в их 40-50. В предшествующем сообщении предполагалось, что болезнь Паркинсона вызвана недостатком дофамина, который является результатом гибели дофаминергических нейронов в черном веществе и полосатом теле в среднем мозге. Причина избирательной гибели дофаминергических нейронов до сих пор не объяснена. Соответственно, эффективное лечебное средство и диагностический реактив до сих пор не разработаны. Болезнь Паркинсона демонстрирует такие симптомы, как безэмоциональное лицо, ригидность, тремор, согнутая поза и брадикинезия.

В последнее время сделано предположение о том, что нарушение функции митохондрий может быть причиной различных нейродегенеративных заболеваний, включая болезнь Паркинсона. В качестве генов, вызывающих наследственную болезнь Паркинсона (наследственная БП), идентифицировали гены, участвующие в образовании реакционно-способных частиц кислорода (ROS) и протеолизе, такие как PARKl/4 (α-синуклеин), PARK2 (паркин), PARK6 (PTEN-индуцируемая предполагаемая киназа 1, PINK1), PARK7 (DJ-1) и PARK8 (киназа 2 с богатыми лейцином повторами, LRRK2), существующие во внешней мембране митохондрий, и PARK13 (HTRA2/0MI), существующая во внутренней мембране митохондрий (Nat. Clin. Pract. Neurol 2, 136-146, 2006). PINKI, паркин и DJ-1 вовлечены в такие действия в митохондриальной динамике, как разделение и слияние для поддержания сетевой структуры митохондрий (PLoS BioI. 6, e1000298, 2010).

Спорадическая болезнь Паркинсона (спорадическая БП), составляющая 95% всей болезни Паркинсона, также отличается нарушением митохондриальной активности. Известно, что инсектициды/гербициды, такие как паракват и ротенон, являются материалами, вызывающими нарушение активности митохондрий посредством супрессии системы электронного транспорта митохондрий. MPTP (1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридин), используемый для создания модели болезни Паркинсона на животных, и его метаболит MPP+ известны в качестве избирательных ингибиторов комплекса 1 системы электронного транспорта митохондрий. Этот пример подсказывает, что избирательная гибель дофаминергических нейронов из-за нарушения митохондриальной функции может являться причиной болезни Паркинсона и одновременно восстановление митохондриальной активности может представлять собой важную мишень для лечения болезни Паркинсона

Внутриклеточную органеллу эндоплазматический ретикулум делят на шероховатый эндоплазматический ретикулум (шероховатый ER, RER) с прикрепленными рибосомами и гладкий эндоплазматический ретикулум (гладкий ER, SER). Основная функция шероховатого эндоплазматического ретикулума состоит в синтезе белка. Синтез приблизительно 1/3 внутриклеточных белков происходит в шероховатом эндоплазматическом ретикулуме. В то же время, синтез различных липидов и стероидных гормонов происходит в гладком эндоплазматическом ретикулуме. Гладкий ER также играет важную роль в регуляции внутриклеточной концентрации кальция. Однако анормальная укладка белков в силу различных причин вызывает функциональное повреждение эндоплазматического ретикулума, которое называют стрессом эндоплазматического ретикулума. При длительном стрессе эндоплазматического ретикулума, через различные механизмы сигнальной трансдукции, возрастает апоптоз и массивное образование реакционно-способных частиц кислорода (ROS), что ведет к повреждению клеток. Также сообщалось о том, что стресс эндоплазматического ретикулума также является причиной дегенеративных неврологических нарушений, таких как болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, инсульт, хорея Гентингтона и повреждение спинного мозга, наряду с метаболическим синдромом, сахарным диабетом, ожирением и дислипидемией, которые опосредованы повреждением митохондрий (Lindholm et al., 2006; Penas et al., 2007; Yoshida, 2007; Zhang et al., 2006).

Кора корня пиона полукустарникового (Moutan Radicis Cortex) представляет собой кору корня Paeonia suffruticosa Andrews, который является лекарственным растением, содержащим пеонол, пеонифлорин, оксипеонифлорин и чесночную кислоту или пеонифлоригенон. В восточной медицине известно, что кора корня пиона полукустарникового эффективна для расслабления, снятия боли, снятия воспаления и, тем самым, лечения воспалительного заболевания. В последнее время стало известно, что кора корня пиона полукустарникового обладает противомикробной, противовоспалительной, антиоксидантной и омолаживающей активностями, а также сообщалось о эффективности лечения ей заболевания головного мозга в качестве компонента различных смесей.

Корень дудника даурского (Angelicae dahuricae Radix) представляет собой сушеный корень Angelica dahurica Bentham et Hooker f. или Angelica dahurica Bentham et Hooker f. var. formosana Shan et Yuan, который представляет собой растение возрастом 2-3 года, которое является эндемиком в Корее, Китае и Японии. Основными биологически активными соединениями корня дудника даурского являются императорин, изоимператорин, оксипеуцеданин, феллоптерин и биакангеликол. В восточной медицине известны различные эффекты корня дудника даурского. В частности, известно, что он эффективен для облегчения потоотделения, успокоения, боли, простуды, головной боли или зубной боли. Однако нет сообщений об участии корня дудника даурского в улучшении митохондриальной функции и снятии стресса эндоплазматического ретикулума с тем, чтобы улучшать эффект лечения нейронального заболевания.

Корень володушки (Bupleuri Radix) представляет собой лекарственное растение, которое относится к корню Bupleurum falcatum Linne или его вариантам (Umbelliferae).

Основные фармакологические активности корня володушки включают различные фармакологические активности, такие как антипиретическая, болеутоляющая, аналгетическая, антибактериальная, противовирусная и противовоспалительная активности. Главными фармакологическими активностями корня володушки являются антипиретическая, болеутоляющая, аналгетическая, антибактериальная, противовирусная и противовоспалительная активности.

Авторы настоящего изобретения пытались разработать терапевтическое средство для дегенеративного неврологического нарушения из съедобных растений. Как результат, авторы изобретения обнаружили, что экстракт смеси из двух или больше типов, выбранных из группы, состоящей из коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки, обладает активностью для восстановления функционального повреждения митохондрий, чтобы ослаблять стресс эндоплазматического ретикулума и одновременно ингибировать воспалительную реакцию, что значительно выше, чем то, что продемонстрировано у каждого отдельного экстракта. Экстракт приведенной выше смеси значительно повышает двигательную координацию и демонстрирует защитный эффект, оказываемый на дофаминергические нейроны in vivo в модели болезни Паркинсона, так что авторы настоящего изобретения подтвердили, что экстракт смеси коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки или их фракция может быть эффективнее в качестве активного ингредиента фармацевтической композиции для лечения и предотвращения дегенеративных неврологических нарушений, что ведет к созданию изобретения.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Цель настоящего изобретения состоит в том, чтобы предоставить фармацевтическую композицию для лечения или предотвращения дегенеративных неврологических нарушений, которая содержит экстракт смеси из двух или больше, выбранных из группы, состоящей из коры корня пиона полукустарникового (Moutan Radicis Cortex), корня дудника даурского (Angelicae Dahuricae Radix) и корня володушки (Bupleuri Radix), или его фракцию в качестве активного ингредиента, и здоровой функциональной пище для улучшения или предотвращения дегенеративных неврологических нарушений, которая содержит его же.

Для достижения приведенной выше цели настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию для лечения или предотвращения дегенеративных неврологических нарушений, которая содержит экстракт смеси из двух или больше, выбранных из группы, состоящей из коры корня пиона полукустарникового (Moutan Radicis Cortex), корня дудника даурского (Angelicae Dahuricae Radix) и корня володушки (Bupleuri Radix), в качестве активного ингредиента.

Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции для лечения или предотвращения дегенеративных неврологических нарушений, которая содержит фракцию органического растворителя из экстракта приведенной выше смеси в качестве активного ингредиента.

Настоящее изобретение также относится к здоровой функциональной пище для улучшения или предотвращения дегенеративных неврологических нарушений, которая содержит экстракт смеси из двух или больше, выбранных из группы, состоящей из коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки, в качестве активного ингредиента.

Настоящее изобретение также относится к здоровой функциональной пище для улучшения или предотвращения дегенеративных неврологических нарушений, которая содержит фракцию органического растворителя из экстракта приведенной выше смеси в качестве активного ингредиента.

Настоящее изобретение также относится к способу лечения или предотвращения дегенеративных неврологических нарушений, который включает стадию введения фармацевтически эффективной дозы экстракта смеси из двух или больше, выбранных из группы, состоящей из коры корня пиона полукустарникового (Moutan Radicis Cortex), корня дудника даурского (Angelicae Dahuricae Radix) и корня володушки (Bupleuri Radix), субъекту.

Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, которая содержит экстракт смеси из двух или больше, выбранных из группы, состоящей из коры корня пиона полукустарникового (Moutan Radicis Cortex), корня дудника даурского (Angelicae Dahuricae Radix) и корня володушки (Bupleuri Radix), для применения при лечении или предотвращении дегенеративных неврологических нарушений.

Настоящее изобретение также относится к способу лечения или предотвращения дегенеративных неврологических нарушений, который включает стадию введения фармацевтически эффективной дозы фракции органического растворителя из экстракта смеси из двух или больше, выбранных из группы, состоящей из коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки, субъекту.

Кроме того, настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, которая содержит фракцию органического растворителя из экстракта смеси из двух или больше, выбранных из группы, состоящей из коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки, для применения при лечении или предотвращении дегенеративных неврологических нарушений.

ПОЛЕЗНЫЙ ЭФФЕКТ

Экстракт смеси из двух или больше типов, выбранных из группы, состоящей из коры корня пиона полукустарникового (Moutan Radicis Cortex), корня дудника даурского (Angelicae Dahuricae Radix) и корня володушки (Bupleuri Radix), может повышать внутриклеточный уровень АТФ, восстанавливать потенциал поврежденных митохондриальных мембран; и подавлять образование ROS в 1,5 раза сильнее, чем отдельный экстракт, когда функциональное повреждение митохондрий, стресс эндоплазматического ретикулума и воспалительный ответ индуцируют одновременно в модели болезни Паркинсона. Также подтверждали, что экстракт смеси по настоящему изобретению значимо эффективен для улучшения двигательной координации и защиты дофаминергических нейронов в модели болезни Паркинсона на животных, с тем, чтобы экстракт смеси по изобретению или его фракцию можно было эффективно использовать в качестве активного ингредиента фармацевтической композиции для предотвращения и лечения дегенеративного неврологического нарушения.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР

В заявке предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения легче всего понять со ссылкой на сопроводительные рисунки, на которых:

На фиг. 1 представлено схематическое изображение, которое иллюстрирует процесс создания модели болезни Паркинсона на животном через введение 1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридина (MPTP). В частности, лиофилизированный экстракт в 90% этаноле из смеси, состоящей из коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки в соотношении 1:1:1, растворяли в 3% HPMC и вводили (перорально, p.o.) тестовой мыши (1, 3 или 10 мг/кг), раз в сутки в течение 14 суток. С 8-х суток эксперимента 1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридин (MPTP) вводили (интраперитонеально, i.p.) мыши в дозе 30 мг/кг через три часа после перорального введения в течение 5 суток, что вело к созданию модели болезни Паркинсона на животном. Полученную мышиную модель использовали для поведенческого теста. Животное умерщвляли и осуществляли анализ клеток и вестерн-блоттинг.

На фиг. 2 представлено схематическое изображение, которое иллюстрирует процесс создания модели болезни Паркинсона на животном через введение 6-OHDA (6-гидроксидофамин). В частности, 16 мкг 6-OHDA (6-гидроксидофамин) разводили в 2 мл 0,1% аскорбиновой кислоты и инъецировали посредством стереотактического хирургического вмешательства тестовому животному один раз, что вело к созданию модели болезни Паркинсона на животном. Через одну неделю после хирургического вмешательства лиофилизированный экстракт в 90% этаноле из смеси, состоящей из коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки в соотношении 1:1:1, растворяли в воде и вводили (перорально, p.o.) мыши в дозе 3 мг/кг раз в сутки в течение 7 суток. Полученную мышиную модель использовали для поведенческого теста. Животное умерщвляли и осуществляли анализ клеток и вестерн-блоттинг.

На фиг. 3 представлено схематическое изображение, которое иллюстрирует процесс создания модели болезни Паркинсона на животном через введение ротенона. В частности, лиофилизированный экстракт в 90% этаноле из смеси, состоящей из коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки в соотношении 1:1:1, растворяли в воде и вводили (перорально, p.o.) крысе в дозе 10 мг/кг раз в сутки в течение 6 недель. Через одну неделю после перорального введения, ротенон инъецировали (интраперитонеально, i.p.) крысе в дозе 2,5 мг/кг раз в сутки в течение 5 недель, что вело к созданию модели болезни Паркинсона на животном. Полученную крысиную модель использовали для поведенческого теста. Животное умерщвляли и осуществляли анализ клеток и вестерн-блоттинг.

На фиг. 4 представлено схематическое изображение, которое иллюстрирует процесс создания модели болезни Паркинсона на животном через введение LPS (липополисахарид). В частности, лиофилизированный экстракт в 90% этаноле из смеси, состоящей из коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки в соотношении 1:1:1, растворяли в воде и вводили (перорально, p.o.) мыши в дозе 10 или 30 мг/кг раз в сутки в течение 3 суток. После последнего введения LPS (липополисахарид) вводили один раз (интраперитонеально, i.p.) мыши в дозе 5 мг/кг, что вело к созданию модели болезни Паркинсона на животном. Полученную мышиную модель использовали для теста на эффективность снятия воспаления головного мозга.

ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫХ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ

Далее в настоящем документе настоящее изобретение описано подробно.

Настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию для лечения или предотвращения дегенеративных неврологических нарушений, которая содержит экстракт смеси из двух или больше, выбранных из группы, состоящей из коры корня пиона полукустарникового (Moutan Radicis Cortex), корня дудника даурского (Angelicae Dahuricae Radix) и корня володушки (Bupleuri Radix), в качестве активного ингредиента.

Настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции для лечения или предотвращения дегенеративных неврологических нарушений, которая содержит фракцию органического растворителя из экстракта смеси из двух или больше, выбранных из группы, состоящей из коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки, в качестве активного ингредиента.

Предпочтительно смешивать кору корня пиона полукустарникового, корень дудника даурского и корень володушки в массовом соотношении 1:0,2-5:0,2-5 (масс.:масс.:масс.). Более предпочтительно, кору корня пиона полукустарникового, корень дудника даурского и корень володушки смешивают в соотношении 1:0,5-2:0,5-2 (масс.:масс.:масс.), и наиболее предпочтительно в соотношении 1:1:1 (масс.:масс.:масс.), но не всегда с таким ограничением.

Два материала, выбранные из группы, состоящей из коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки, предпочтительно смешивают в массовом соотношении 1:0,2-5 (масс.:масс.), более предпочтительно в соотношении 1:0,5-2 (масс.:масс.) и наиболее предпочтительно в соотношении 1:1 (масс.:масс.), но не всегда с таким ограничением.

Экстракт приведенной выше смеси предпочтительно экстрагируют с использованием воды, C₁-C₄ низшего спирта или их смеси в качестве растворителя, и в этот момент низший спирт предпочтительно представляет собой этанол, метанол или бутанол.

Экстракт смеси предпочтительно экстрагируют из смеси, состоящей по меньшей мере из двух материалов, выбранных из группы, состоящей из коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки, но его можно экстрагировать из смеси, состоящей из по меньшей мере двух экстрактов, помимо каждого экстракта коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки.

Экстракт приведенной выше смеси предпочтительно получают способом, который включает следующие стадии, но не всегда с таким ограничением:

1) добавление экстракционного растворителя в смесь, состоящую по меньшей мере из двух из тех материалов, которые выбирают из группы, состоящей из коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки, после чего следует экстрагирование;

2) фильтрование экстракта со стадии 1); и

3) концентрирование фильтрата, получаемого на стадии 2), при пониженном давлении, после чего следует его сушка.

В приведенном выше способе кору корня пиона полукустарникового, корень дудника даурского и корень володушки со стадии 1) приобретают или культивируют.

В приведенном выше способе, способ экстрагирования экстракта представляет собой любой из таких стандартных способов, как фильтрование, экстрагирование горячей водой, анфлераж, экстрагирование с обратным холодильником и ультразвуковое экстрагирование.

В этом способе концентрирование при пониженном давлении на стадии 3) предпочтительно осуществляют с использованием вакуумного концентратора или вакуумного роторного испарителя, но не всегда с таким ограничением. Сушку в настоящем документе предпочтительно осуществляют посредством сушки при пониженном давлении, вакуумной сушки, сушки кипячением, распылительной сушки или лиофилизационной сушки, но не всегда с таким ограничением.

Указанную фракцию предпочтительно получают из экстракта посредством добавления органического растворителя. Органический растворитель в настоящем документе предпочтительно представляет собой один или несколько растворителей, выбранных из группы, состоящей из гексана, хлороформа, этилацетата и бутанола, и более предпочтительно бутанол, но не всегда с таким ограничением.

Указанный экстракт предпочтительно содержит одно или несколько соединений, выбранных из группы, состоящей из пеонола (2ʹ-гидрокси-4ʹ-метоксиацетофенон), представленного формулой 1, пеонифлорина, представленного формулой 2, пеонифлоригенона ([(2s,3as,5s,7ar,8s)-3a-гидрокси-7a-метил-6-оксогексагидро-2,5-метано-1,3-бензодиоксол-8-ил]метилбензоат), представленного формулой 3, императорина (9-[(3-метил-2-бутен-1-ил)окси]-7h-фуро[3,2-g][1]бензопиран-7-он), представленного формулой 4, сайкосапонина A ((3бета,4альфа,16бета)-13,28-эпокси-16,23-дигидроксиолеан-11-ен-3-ил-6-дезокси-3-O-бета-D-глюкопиранозил-бета-D-галактопиранозид), представленного формулой 5, сайкосапонина B2 ((3b,4a,16a)-16,23,28-тригидроксиолеана-11,13(18)-диен-3-ил-6-дезокси-3-O-бета-D-глюкопиранозил-бета-D-галактопиранозид), представленного формулой 6, сайкосапонина B4 ((3β,11α,16α)-16,23,28-тригидрокси-11-метоксиолеан-12-ен-3-ил-6-дезокси-3-O-β-D-глюкопиранозил-β-D-галактопиранозид), представленного формулой 7, и сайкосапонина D ((3b,4a,16a)-13,28-эпокси-16,23-дигидроксиолеан-11-ен-3-ил 6-дезокси-3-O-бета-D-глюкопиранозил бета-D-галактопиранозид), представленного формулой 8, но не всегда с таким ограничением:

[Формула 1]

;

[Формула 2]

;

[Формула 3]

;

[Формула 4]

;

[Формула 5]

[Формула 6]

;

[Формула 7]

; и

[Формула 8]

.

Приведенный выше экстракт предпочтительно ингибирует функциональное повреждение митохондрий, стресс эндоплазматического ретикулума или воспалительную реакцию, но не всегда с таким ограничением.

Дегенеративное неврологическое нарушение в настоящем документе предпочтительно выбирают из группы, состоящей из деменции, хореи Гентингтона, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, инсульта, болезни Лу Герига (амиотрофического бокового склероза) и повреждения спинного мозга, но не всегда с таким ограничением.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения авторы настоящего изобретения исследовали восстановление нервных клеток, в которых индуцировали функциональное повреждение для того, чтобы подтверждать эффект отдельного экстракта коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского или корня володушки.

Как результат, подтверждено, что отдельный экстракт коры корня пиона полукустарникового оказывал восстанавливающий эффект на функциональное повреждение митохондрий (см. таблицы 2-7), тогда как отдельный экстракт корня дудника даурского оказывал восстанавливающий эффект на стресс эндоплазматического ретикулума (см. таблицы 8-13). Также подтверждали, что отдельный экстракт корня володушки оказывал восстанавливающий эффект на воспаление (см. таблицы 14-20).

Экстракт смеси, состоявшей по меньшей мере из двух тех материалов, которые выбирали из группы, состоящей из коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки, в соответствии с настоящим изобретением демонстрировал эффект восстановления уровня АТФ и подавлял образование реакционно-способных частиц кислорода в клеточной модели болезни Паркинсона. В частности, экстракт смеси коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки демонстрировал значимый восстанавливающий эффект, оказываемый на функциональное повреждение митохондрий (см. таблицы 21-24).

Авторы настоящего изобретения также исследовали восстанавливающий эффект экстракта смеси коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки, оказываемый на функцию клеток в клеточной модели болезни Паркинсона в соответствии с соотношением смешивания. Как результат, когда эти растительные материалы смешивали в соотношении 1:1:1 (масс.:масс.:масс.), эффект восстановления функции клеток наиболее выражен (см. таблицы 24-26). Авторы изобретения также исследовали восстанавливающий эффект смешанного этанолового экстракта коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки, оказываемый на функцию клеток в клеточной модели болезни Паркинсона в соответствии с концентрацией этанола. Как результат, когда обрабатывали экстракт смеси, которую экстрагировали с использованием 90% этанола, комбинированный эффект восстановления функции клеток возрастал наиболее значительно (см. таблицы 28-30). Этаноловый экстракт может увеличивать восстанавливающий эффект наиболее значительно, по сравнению с водным экстрактом, метаноловым экстрактом и бутаноловым экстрактом (см. таблицы 31-33).

Для того чтобы подтверждать эффект смешанного экстракта в 90% этаноле, полученного из смеси коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки в соотношении 1:1:1 (масс.:масс.:масс.), восстанавливающий эффект изучали в нейрональной клеточной линии, в которой индуцировали повреждение функции клеток. Как результат, подтверждено, что экстракт смеси оказывал восстанавливающий эффект на функциональное повреждение митохондрий, стресс эндоплазматического ретикулума и воспаление (см. таблицы 34-38).

Кроме того, модели болезни Паркинсона на животных, которые создавали с использованием 1-метил-4-фенил-1,2,3,6-тетрагидропиридина (MPTP), 6-гидроксидофамина (6-OHDA), ротенона и липополисахарида (LPS), использовали для того, чтобы подтверждать терапевтический эффект экстракта смеси коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки, оказываемый болезнь Паркинсона in vivo. Экстракт смеси вводили в модель болезни Паркинсона на мышах, созданную посредством обработки MPTP, после чего следовал поведенческий тест. Как результат, происходило улучшение двигательной координации в модели болезни Паркинсона по сравнению с животной моделью, которую не лечили экстрактом смеси по изобретению. Также подтверждали, что экстракт смеси по изобретению имеет защитный эффект, оказываемый на дофаминергические нейроны, и восстанавливающий эффект, оказываемый на повреждение системы сигнальной трансдукции в полосатом теле (ST), черном веществе (SN) и мозжечке (см. таблицы 39-47). Поведенческий тест также осуществляли для модели болезни Паркинсона на мышах, которую создавали посредством обработки 6-OHDA. Как результат, подтверждали, что экстракт смеси по изобретению оказывает эффект улучшения на двигательную координацию и защитный эффект на дофаминергические нейроны в полосатом теле и черном веществе (см. таблицы 48-52). Поведенческий тест также осуществляли для модели болезни Паркинсона на мышах, которую создавали посредством обработки ротеноном. Как результат, происходило улучшение двигательной функции, подавляемой ротеноном, и снижение накопления олигомера α-синуклеина, основного патогенного фактора болезни Паркинсона, в черном веществе (см. таблицы 53-54). В то же время, в модели нейровоспаления на мышах, которую создавали посредством введения LPS, активацию микроглии и астроцитов, индуцируемую в черном веществе и гиппокампе, ингибировали с помощью экстракта смеси коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки, что указывает на то, что там продемонстрировали эффект снятия воспаления (см. таблицы 55-58).

Экстракт смеси коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки по настоящему изобретению оказывает восстанавливающий эффект на повреждение митохондриальной функции, облегчающий эффект на стресс эндоплазматического ретикулума и также одновременно оказывает ингибирующий эффект на воспалительную реакцию, которые удивительно улучшены по сравнению с тем, что оказывает отдельный экстракт in vitro, и экстракт смеси значимо оказывает эффект улучшения на двигательную координацию и защитный эффект на дофаминергические нейроны в модели болезни Паркинсона на животных, и, таким образом, экстракт смеси по настоящему изобретению или его фракцию можно использовать в качестве активного ингредиента фармацевтической композиции для лечения и предотвращения дегенеративных неврологических нарушений.

Композицию по настоящему изобретению можно вводить перорально или парентерально и использовать в фармацевтическом составе в основных формах. То есть, композицию по настоящему изобретению можно получать для орального или парентерального введения посредством смешивания с обычно используемыми разбавителями или эксципиентами, такими как наполнители, разбавители, связывающие средства, увлажняющие средства, средства для улучшения распадаемости и поверхностно-активные средства.

Твердые составы для перорального введения представляют собой таблетки, пилюли, порошки, гранулы и капсулы. Эти твердые составы получают посредством смешивания указанного бетаина с одним или несколькими подходящими эксципиентами, такими как крахмал, карбонат кальция, сахароза или лактоза, желатин и т. д. Помимо простых эксципиентов, можно использовать смазывающие средства, например, стеарат магния, тальк и т. п. Жидкие составы для перорального введения представляют собой суспензии, растворы, эмульсии и сиропы, и указанные выше составы могут содержать различные эксципиенты, такие как увлажняющие средства, подсластители, ароматические средства и консерванты, в дополнение к обычно используемым простым разбавителям, таким как вода и жидкий парафин.

Составы для парентерального введения представляют собой стерилизованные водные растворы, водонерастворимые эксципиенты, суспензии, эмульсии, лиофилизированные препараты и суппозитории. Водонерастворимые эксципиенты и суспензии могут содержать, в дополнение к активному соединению или соединениям, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительное масло, такое как оливковое масло, инъецируемый сложный эфир, такой как этилолеат, и т. д. Суппозитории могут содержать, в дополнение к активному соединению или соединениям, витепсол, макрогол, Tween 61, масло какао, лауриновое масло, глицерин, желатин и т. д.

Композицию по настоящему изобретению можно вводить перорально или парентерально, и парентеральное введение предпочтительно приведено в качестве примера посредством внешнего нанесения на кожу, интраперитонеальной инъекции, интраректальной инъекции, внутривенной инъекции, внутримышечной инъекции, подкожной инъекции, внутриматочной инъекции и интрацеребровентрикулярной инъекции. Среди них, внешнее нанесение на кожу является более предпочтительным.

Композицию по настоящему изобретению предпочтительно вводят в фармацевтически эффективной дозе. Термин «фармацевтически эффективная доза» в настоящем документе обозначает количество, достаточное для того, чтобы лечить заболевание применимой, обоснованной или рискованной концентрацией. Дозу можно определять, учитывая многие факторы, такие как тип заболевания, тяжесть заболевания, активность лекарственного средства, чувствительность к лекарственному средству, частота и путь введения, экскреция, условия лечения, лекарственное средство для совместного лечения и другие факторы, рассматриваемые как релевантные в области медицины. Композицию по настоящему изобретению можно вводить отдельно или вместе с другими лекарственными средствами. Если необходимо совместное лечение, введение можно осуществлять поэтапно или одновременно. Композицию можно вводить однократно или многократно. Важно учитывать все приведенные выше факторы и вводить количество, при котором можно получать максимальный эффект в минимальном количестве без побочных эффектов, которые может легко определять специалист в данной области.

Эффективную дозу соединения по настоящему изобретению можно определять в соответствии с массой, возрастом, полом, состоянием здоровья, диетой, частотой введения, способом введения, экскрецией и тяжестью заболевания. Доза составляет 0,01-1000 мг/кг в сутки, предпочтительно 30-500 мг/кг в сутки и более предпочтительно 50-300 мг/кг в сутки, а частота введения предпочтительно составляет 1-6 раз в сутки. Однако эффективную дозу можно увеличивать или уменьшать в соответствии с путем введения, тяжестью ожирения, полом, массой тела и возрастом пациента и т. п. с тем, чтобы приведенная выше эффективная доза не могла ограничивать настоящее изобретение в каких-либо аспектах.

Композицию по настоящему изобретению можно вводить отдельно или лечение можно осуществлять вместе с хирургической операцией, гормональной терапией, химиотерапией и биологическими регуляторами.

Настоящее изобретение также относится к здоровой функциональной пище для улучшения или предотвращения дегенеративных неврологических нарушений, которая содержит экстракт смеси из двух или больше, выбранных из группы, состоящей из коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки, в качестве активного ингредиента.

Настоящее изобретение также относится к здоровой функциональной пище для улучшения или предотвращения дегенеративных неврологических нарушений, которая содержит фракцию органического растворителя из экстракта смеси из двух или больше, выбранных из группы, состоящей из коры корня пиона полукустарникового, корня дудника даурского и корня володушки, в качестве активного ингредиента.

Предпочтительно смешивать кору корня пиона полукустарникового, корень дудника даурского и корень володушки в массовом соотношении 1:0,2-5:0,2-5 (масс.:масс.:масс.). Более предпочтительно кору корня пиона полукустарникового, корень дудника даурского и корень володушки смешивают в соотношении 1:0,5-2:0,5-2 (масс.:масс.:масс.) и наиболее предпочтительно в соотношении 1:1:1 (масс.:масс.:масс.), но не всегда с таким ограниче