Анти-в7-н3-антитело

Анти-в7-н3-антитело

Иллюстрации

Показать все

Реферат

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к антителу, которое связывается с B7-H3 и может использоваться в качестве терапевтического и/или профилактического средства для опухоли, а также относится к способу лечения и/или профилактики опухоли с применением антитела.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

B7-H3 представляет собой белок, имеющий однопроходную трансмембранную структуру (непатентный документ 1). N-концевой внеклеточный домен B7-H3 имеет два варианта. Вариант 1 содержит V-подобный или C-подобный домен Ig в двух сайтах, соответственно, и вариант 2 содержит V-подобный или C-подобный домен Ig в одном сайте, соответственно. C-концевой внутриклеточный домен B7-H3 содержит 45 аминокислот.

Сообщалось о TLT-2, имеющем однопроходную трансмембранную структуру, в качестве рецептора B7-H3 (непатентный документ 2). Однако также имеется сообщение, в котором утверждается, что TLT-2 не является рецептором для B7-H3 (непатентный документ 3). Согласно первому сообщению активация CD8-позитивных T-клеток усиливается, когда рецептор связан с B7-H3.

Были представлены клинические данные о том, что B7-H3 сверхэкспрессируется во многих типах злокачественных новообразований, в частности, в случае немелкоклеточного рака легкого, рака почек, уротелиальной карциномы, рака прямой и ободочной кишки, рака простаты, мультиформной глиобластомы, рака яичника и рака поджелудочной железы (непатентные документы 4-11). Кроме того, сообщалось, что при раке простаты интенсивность экспрессии B7-H3 положительно коррелирует с клинико-патологическими данными о злокачественности, такими как объем опухоли, экстрапростатическая инвазия или индекс Глисона, а также коррелирует с прогрессированием злокачественного новообразования (непатентный документ 8). Подобным образом, при мультиформной глиобластоме экспрессия B7-H3 негативно коррелирует с бессобытийной выживаемостью (непатентный документ 9), а при раке поджелудочной железы экспрессия B7-H3 коррелирует с метастазами в лимфатические узлы и прогрессированием патологии (непатентный документ 11). В случае рака яичника экспрессия B7-H3 коррелирует с метастазами в лимфатические узлы и прогрессированием патологии.

Кроме того, сообщалось, что посредством введения миРНК против гена B7-H3 в линию B7-H3-позитивных злокачественных клеток снижали адгезивность к фибронектину, чтобы уменьшить миграцию клеток и инвазию в матригель (непатентный документ 12). Кроме того, сообщалось, что в случае мультиформной глиобластомы экспрессия B7-H3 позволяла избегать опосредованной NK-клетками клеточной гибели (непатентный документ 13).

С другой стороны, сообщалось, что B7-H3 экспрессируется не только в злокачественных клетках, но также в опухолях или окружающих сосудах (непатентные документы 5 и 14). Сообщалось, что в том случае, когда B7-H3 экспрессируется в кровеносных сосудах злокачественного новообразования яичника, частота выживаемости снижается.

Было высказано предположение, что молекулы семейства В7 связаны с иммунной системой. Сообщалось, что В7-Н3 экспрессируется в моноцитах, дендритных клетках и активированных Т-клетках (непатентный документ 15). Сообщалось, что по мере того, как цитотоксические Т-клетки активируются, В7-Н3 костимулирует пролиферацию CD4-позитивных или CD8-позитивных Т-клеток. Однако также имеется сообщение о том, что В7-Н3 не играет костимулирующей роли (непатентный документ 1).

Сообщалось, что молекулы В7-Н3 связаны с аутоиммунными заболеваниями. Сообщалось, что при ревматизме и других аутоиммунных заболеваниях В7-Н3 играет важную роль во взаимодействии между фибробластоподобными синовиоцитами и активированными Т-клетками (непатентный документ 16), и что В7-Н3 функционирует как костимулирующий фактор, когда цитокины высвобождаются из активированных макрофагов, и поэтому связан с развитием сепсиса (непатентный документ 17). Кроме того, сообщалось, что при введении анти-В7-Н3-антитела в мышиной модели астмы во время фазы индукции улучшается состояние при астме вследствие супрессии опосредованной Th2-клетками продукции цитокинов в регионарных лимфатических узлах в результате введения антитела против В7-Н3 мыши (непатентный документ 18).

В отношении В7-Н3 сообщалось, что антитело против В7-Н3 мыши усиливает инфильтрацию CD8-позитивных Т-клеток внутрь опухоли и подавляет роста опухоли (непатентный документ 14). Кроме того, существует патент, в котором описано, что антитело, которое распознает В7-Н3 варианта 1, оказывает противоопухолевое действие in vivo в случае аденокарциномы (патентный документ 1).

Несмотря на указанные исследования, эпитоп для анти-B7-H3-антитела, которое оказывает противоопухолевое действие in vivo, до сих пор не выяснен, и не было сообщений о конкретной аминокислотной последовательности внеклеточного домена B7-H3, которая может быть применима в качестве эпитопа для моноклонального антитела с целью лечения злокачественного новообразования.

Даже если антитела специфичны по отношению к одному и тому же антигену, свойства антител варьируют в связи с различиями в эпитопах или последовательностях антител. Из-за различий в свойствах антител при клиническом введении человеку антитела приводят к разным реакциям в отношении эффективности лекарственного средства, частоты терапевтического ответа, частоты побочных эффектов или резистентности к лекарственному средству и т.д.

Также в случае антитела против B7-H3 настоятельно требуется создание антитела, обладающего беспрецедентными свойствами.

ДОКУМЕНТЫ ИЗВЕСТНОГО УРОВНЯ ТЕХНИКИ

Патентный документ

Патентный документ 1: WO 2008/066691

Непатентные документы

Непатентный документ 1: The Journal of Immunology, 2004, vol. 172, pp. 2352-2359

Непатентный документ 2: Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2008, vol. 105, pp. 10495-10500

Непатентный документ 3: European Journal of Immunology, 2009, vol. 39, pp. 1754-1764

Непатентный документ 4: Lung Cancer, 2009, vol. 66, pp. 245-249

Непатентный документ 5: Clinical Cancer Research, 2008, vol. 14, pp. 5150-5157

Непатентный документ 6: Clinical Cancer Research, 2008, vol. 14, pp. 4800-4808

Непатентный документ 7: Cancer Immunology, Immunotherapy, 2010, vol. 59, pp. 1163-1171

Непатентный документ 8: Cancer Research, 2007, vol. 64, pp. 7893-7900

Непатентный документ 9: Histopathology, 2008, vol. 53, pp. 73-80

Непатентный документ 10: Modern Pathology, 2010, vol. 23, pp. 1104-1112

Непатентный документ 11: British Journal of Cancer, 2009, vol. 101, pp. 1709-1716

Непатентный документ 12: Current Cancer Drug Targets, 2008, vol. 8, pp. 404-413

Непатентный документ 13: Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2004, vol. 101, pp. 12640-12645

Непатентный документ 14: Modern Pathology, 2010, vol. 23, pp. 1104-1112

Непатентный документ 15: Nature Immunology, 2001, vol. 2, pp. 269-274

Непатентный документ 16: The Journal of Immunology, 2008, vol. 180, pp. 2989-2998

Непатентный документ 17: The Journal of Immunology, 2010, vol. 185, pp. 3677-3684

Непатентный документ 18: The Journal of Immunology, 2008, vol. 181, pp. 4062-4071

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Проблемы, решаемые изобретением

Целью изобретения является получение антитела и функционального фрагмента антитела, используемого в фармацевтическом средстве, оказывающем терапевтическое действие на опухоль, способ лечения опухоли с применением антитела или функционального фрагмента антитела и тому подобное.

Способы решения проблем

Авторы настоящего изобретения провели обширные исследования, чтобы достичь указанной выше цели, и в результате было обнаружено, что антитело, которое специфично связывается с B7-H3, проявляя противоопухолевую активность, и, таким образом, осуществили изобретение. То есть, изобретение включает следующие изобретения.

(1) Антитело, отличающееся тем, что обладает следующими свойствами:

(a) специфично связывается с B7-H3;

(b) обладает активностью в антитело-зависимом клеточном фагоцитозе (ADCP); и

(c) обладает противоопухолевой активностью in vivo,

или функциональный фрагмент антитела.

2) Антитело или функциональный фрагмент антитела согласно указанному выше пункту (1), в котором B7-H3 представляет собой молекулу, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6 или 10.

(3) Антитело или функциональный фрагмент антитела согласно указанному выше пункту (1) или (2), которое связывается с IgC1 и/или IgC2, каждый из которых является доменом B7-H3.

(4) Антитело или функциональный фрагмент антитела согласно указанному выше пункту (3), в котором IgC1 представляет собой домен, содержащий аминокислотную последовательность, представленную аминокислотами с номерами 140-244 в последовательности SEQ ID NO: 6, и IgC2 представляет собой домен, содержащий аминокислотную последовательность, представленную аминокислотами с номерами 358-456 в последовательности SEQ ID NO: 6.

(5) Антитело или функциональный фрагмент антитела по любому из указанных выше пунктов (1)-(4), который обладает ингибирующей активностью по отношению к антителу M30, конкурируя с ним за связывание с B7-H3.

(6) Антитело или функциональный фрагмент антитела по любому из указанных выше пунктов (1)-(5), которое обладает активностью антитело-зависимой клеточной цитотоксичности (ADCC) и/или активностью комплемент-зависимой цитотоксичности (CDC).

(7) Антитело или функциональный фрагмент антитела по любому из указанных выше пунктов (1)-(6), в котором опухоль является злокачественным новообразованием.

(8) Антитело или функциональный фрагмент антитела согласно указанному выше пункту (7), при этом злокачественное новообразование представляет собой рак легкого, рак молочной железы, рак простаты, рак поджелудочной железы, рак прямой и ободочной кишки, меланому, рак печени, рак яичника, рак мочевого пузыря, рак желудка, рак пищевода или рак почек.

(9) Антитело или функциональный фрагмент антитела по любому из указанных выше пунктов (1)-(8), которое содержит CDRH1, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 92, CDRH2, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 93, и CDRH3, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 94, в качестве определяющих комплементарность областей тяжелой цепи, и содержит CDRL1, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 95, CDRL2, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 96, и CDRL3, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 97, в качестве определяющих комплементарность областей легкой цепи.

(10) Антитело или функциональный фрагмент антитела по любому из указанных выше пунктов (1)-(9), которое содержит вариабельную область тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-141 в последовательности SEQ ID NO: 51, и вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 23-130 в последовательности SEQ ID NO: 53.

(11) Антитело или функциональный фрагмент антитела по любому из указанных выше пунктов (1)-(10), в котором константная область является константной областью, полученной у человека.

(12) Антитело или функциональный фрагмент антитела согласно указанному выше пункту (11), которое содержит тяжелую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 63, и легкую цепь, состоящую из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 59.

(13) Антитело или функциональный фрагмент антитела по любому из указанных выше пунктов (1)-(12), которое является гуманизированным.

(14) Антитело или функциональный фрагмент антитела согласно указанному выше пункту (13), которое содержит: вариабельную область тяжелой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из (a) аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-141 в последовательности SEQ ID NO: 85, (b) аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-141 в последовательности SEQ ID NO: 87, (c) аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-141 в последовательности SEQ ID NO: 89, (d) аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-141 в последовательности SEQ ID NO: 91, (e) аминокислотной последовательности, обладающей гомологией, составляющей по меньшей мере 95% или больше, с любой из последовательностей (a)-(d), и (f) аминокислотной последовательности, в которой одна или несколько аминокислот делетированы, заменены или добавлены в любой из последовательностей (a)-(d); и вариабельную область легкой цепи, состоящую из аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из (g) аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-128 в последовательности SEQ ID NO: 71, (h) аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-128 в последовательности SEQ ID NO: 73, (i) аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-128 в последовательности SEQ ID NO: 75, (j) аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-128 в последовательности SEQ ID NO: 77, (k) аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-128 в последовательности SEQ ID NO: 79, (l) аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-128 в последовательности SEQ ID NO: 81, (m) аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-128 в последовательности SEQ ID NO: 83, (n) аминокислотной последовательности, имеющей гомологию, составляющую по меньшей мере 95% или больше с любой из последовательностей (g)-(m), и (o) аминокислотной последовательности, в которой одна или несколько аминокислот делетированы, заменены или добавлены в любой из последовательностей (g)-(m).

(15) Антитело или функциональный фрагмент антитела согласно указанному выше пункту (14), которое содержит вариабельную область тяжелой цепи и вариабельную область легкой цепи, выбранные из группы, состоящей из: вариабельной области тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-141 в последовательности SEQ ID NO: 85, и вариабельной области легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-128 в последовательности SEQ ID NO: 71; вариабельной области тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-141 в последовательности SEQ ID NO: 85, и вариабельной области легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-128 в последовательности SEQ ID NO: 73; вариабельной область тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-141 в последовательности SEQ ID NO: 85, и вариабельной области легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-128 в последовательности SEQ ID NO: 75; вариабельной области тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-141 в последовательности SEQ ID NO: 85, и вариабельной области легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-128 в последовательности SEQ ID NO: 77; вариабельной области тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-141 в последовательности SEQ ID NO: 85, и вариабельной области легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-128 в последовательности SEQ ID NO: 79; вариабельной области тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-141 в последовательности SEQ ID NO: 85, и вариабельной области легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-128 в последовательности SEQ ID NO: 81; вариабельной области тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-141 в последовательности SEQ ID NO: 85, и вариабельной области легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-128 в последовательности SEQ ID NO: 83; вариабельной области тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-141 в последовательности SEQ ID NO: 91, и вариабельной области легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-128 в последовательности SEQ ID NO: 71; вариабельной области тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-141 в последовательности SEQ ID NO: 91, и вариабельной области легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-128 в последовательности SEQ ID NO: 73; вариабельной области тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-141 в последовательности SEQ ID NO: 91, и вариабельной области легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-128 в последовательности SEQ ID NO: 75; и вариабельной области тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-141 в последовательности SEQ ID NO: 91, и вариабельной области легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-128 в последовательности SEQ ID NO: 77.

(16) Антитело или функциональный фрагмент антитела согласно указанному выше пункту (14) или (15), которое содержит тяжелую цепь и легкую цепь, выбранные из группы, состоящей из: тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-471 в последовательности SEQ ID NO: 85 и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-233 в последовательности SEQ ID NO: 71; тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-471 в последовательности SEQ ID NO: 85, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-233 в последовательности SEQ ID NO: 73; тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-471 в последовательности SEQ ID NO: 85, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-233 в последовательности SEQ ID NO: 75; тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-471 в последовательности SEQ ID NO: 85, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-233 в последовательности SEQ ID NO: 77; тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-471 в последовательности SEQ ID NO: 85, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-233 в последовательности SEQ ID NO: 79; тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-471 в последовательности SEQ ID NO: 85, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-233 в последовательности SEQ ID NO: 81; тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-471 в последовательности SEQ ID NO: 85, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-233 в последовательности SEQ ID NO: 83; тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-471 в последовательности SEQ ID NO: 91, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-233 в последовательности SEQ ID NO: 71; тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-471 в последовательности SEQ ID NO: 91, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-233 в последовательности SEQ ID NO: 73; тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-471 в последовательности SEQ ID NO: 91, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-233 в последовательности SEQ ID NO: 75; и тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 20-471 в последовательности SEQ ID NO: 91, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности, представленной аминокислотами с номерами 21-233 в последовательности SEQ ID NO: 77.

(17) Антитело или функциональный фрагмент антитела по любому из указанных выше пунктов (14)-(16), которое содержит тяжелую цепь и легкую цепь, выбранные из группы, состоящей из: тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 85, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 71; тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 85, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 73; тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 85, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 75; тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 85, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 77; тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 85, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 79; тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 85, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 81; тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 85, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 83; тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 91, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 71; тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 91, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 73; тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 91, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 75; и тяжелой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 91, и легкой цепи, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 77.

(18) Функциональный фрагмент антитела по любому из указанных выше пунктов (1)-(17), в котором функциональный фрагмент выбран из группы, состоящей из Fab, F(ab)2, Fab' и Fv.

(19) Полинуклеотид, кодирующий антитело или функциональный фрагмент антитела по любому из указанных выше пунктов (1)-(18).

(20) Полинуклеотид согласно указанному выше пункту (19), который содержит нуклеотидную последовательность, представленную нуклеотидами с номерами 58-423 в последовательности SEQ ID NO: 50, и нуклеотидную последовательность, представленную нуклеотидами с номерами 67-390 в последовательности SEQ ID NO: 52.

(21) Полинуклеотид согласно указанному выше пункту (19) или (20), который содержит нуклеотидную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 62, и нуклеотидную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 58.

(22) Полинуклеотид согласно указанному выше пункту (19) или (20), который содержит: нуклеотидную последовательность, выбранную из группы, состоящей из (a) нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-423 в последовательности SEQ ID NO: 84, (b) нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-423 в последовательности SEQ ID NO: 86, (c) нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-423 в последовательности SEQ ID NO: 88, (d) нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-423 в последовательности SEQ ID NO: 90, и (e) нуклеотидной последовательности, содержащей полинуклеотид, который гибридизуется с полинуклеотидом, состоящим из нуклеотидной последовательности, комплементарной любой из нуклеотидных последовательностей (a)-(d) в жестких условиях; и нуклеотидной последовательности, выбранной из группы, состоящей из (f) нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-384 в последовательности SEQ ID NO: 70, (g) нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-384 в последовательности SEQ ID NO: 72, (h) нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-384 в последовательности SEQ ID NO: 74, (i) нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-384 в последовательности SEQ ID NO: 76, (j) нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-384 в последовательности SEQ ID NO: 78, (k) нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-384 в последовательности SEQ ID NO: 80, (l) нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-384 в последовательности SEQ ID NO: 82, и (m) нуклеотидной последовательности, содержащей полинуклеотид, который гибридизуется с полинуклеотидом, состоящим из нуклеотидной последовательности, комплементарной любой из нуклеотидных последовательностей (f) -(l) в жестких условиях.

(23) Полинуклеотид согласно указанному выше пункту (22), который содержит нуклеотидные последовательности, выбранные из группы, состоящей из: нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-423 в последовательности SEQ ID NO: 84, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-384 в последовательности SEQ ID NO: 70; нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-423 в последовательности SEQ ID NO: 84, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-384 в последовательности SEQ ID NO: 72; нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-423 в последовательности SEQ ID NO: 84, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-384 в последовательности SEQ ID NO: 74; нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-423 в последовательности SEQ ID NO: 84, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-384 в последовательности SEQ ID NO: 76; нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-423 в последовательности SEQ ID NO: 84, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-384 в последовательности SEQ ID NO: 78; нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-423 в последовательности SEQ ID NO: 84, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-384 в последовательности SEQ ID NO: 80; нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-423 в последовательности SEQ ID NO: 84, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-384 в последовательности SEQ ID NO: 82; нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-423 в последовательности SEQ ID NO: 90, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-384 в последовательности SEQ ID NO: 70; нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-423 в последовательности SEQ ID NO: 90, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-384 в последовательности SEQ ID NO: 72; нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-423 в последовательности SEQ ID NO: 90, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-384 в последовательности SEQ ID NO: 74; и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-423 в последовательности SEQ ID NO: 90, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-384 в последовательности SEQ ID NO: 76.

(24) Полинуклеотид согласно указанному выше пункту (22) или (23), который содержит нуклеотидные последовательности, выбранные из группы, состоящей из: нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-1413 в последовательности SEQ ID NO: 84, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-699 в последовательности SEQ ID NO: 70; нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-1413 в последовательности SEQ ID NO: 84, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-699 в последовательности SEQ ID NO: 72; нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-1413 в последовательности SEQ ID NO: 84, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-699 в последовательности SEQ ID NO: 74; нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-1413 в последовательности SEQ ID NO: 84, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-699 в последовательности SEQ ID NO: 76; нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-1413 в последовательности SEQ ID NO: 84, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-699 в последовательности SEQ ID NO: 78; нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-1413 в последовательности SEQ ID NO: 84, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-699 в последовательности SEQ ID NO: 80; нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-1413 в последовательности SEQ ID NO: 84, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-699 в последовательности SEQ ID NO: 82; нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-1413 в последовательности SEQ ID NO: 90, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-699 в последовательности SEQ ID NO: 70; нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-1413 в последовательности SEQ ID NO: 90, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-699 в последовательности SEQ ID NO: 72; нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-1413 в последовательности SEQ ID NO: 90, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-699 в последовательности SEQ ID NO: 74; и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 58-1413 в последовательности SEQ ID NO: 90, и нуклеотидной последовательности, представленной нуклеотидами с номерами 61-699 в последовательности SEQ ID NO: 76.

(25) Полинуклеотид по любому из указанных выше пунктов (22)-(24), который содержит нуклеотидные последовательности, выбранные из группы, состоящей из: нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 84 и нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 70; нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 84 и нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 72; нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 84, и нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 74; нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 84, и нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 76; нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 84, и нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 78; нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 84, и нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 80; нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 84, и нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 82; нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 90, и нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 70; нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 90, и нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 72; нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 90, и нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 74; и нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 90, и нуклеотидной последовательности SEQ ID NO: 76.

(26) Вектор экспрессии, содержащий полинуклеотид по любому из указанных выше пунктов (19)-(25).

(27) Клетка-хозяин, которая трансформирована вектором экспрессии согласно указанному выше пункту (26).

(28) Клетка-хозяин согласно указанному выше пункту (27), в котором клетка-хозяин является эукариотической клеткой.

(29) Способ получения антитела или функционального фрагмента антитела, отличающийся включением стадии культивирования клетки-хозяина согласно указанному выше пункту (27) или (28) и стадии сбора требуемого антитела или функционального фрагмента антитела из культивируемого продукта, полученного на стадии культивирования.

(30) Антитело или функциональный фрагмент антитела, отличающийся тем, что он получен способом получения согласно указанному выше пункту (29).

(31) Функциональный фрагмент антитела согласно указанному выше пункту (30), в котором функциональный фрагмент выбран из группы, состоящей из Fab, F(ab)2, Fab' и Fv.

(32) Антитело или функциональный фрагмент антитела по любому из указанных выше пунктов (1)-(18), (30) и (31), в котором регулируют модификацию гликана для усиления антитело-зависимой клеточной цитотоксической активности.

(33) Фармацевтическая композиция, отличающаяся включением, по меньшей мере, одного из антител или функциональных фрагментов антител согласно указанным выше пунктам (1)-(18) и (30)-(32).

(34) Фармацевтическая композиция согласно указанному выше пункту (33), которая предназначена для лечения опухоли.

(35) Фармацевтическая композиция для лечения опухоли, отличающаяся тем, что она содержит по меньшей мере одно из антител или функциональных фрагментов антител согласно указанным выше пунктам (1)-(18) и (30)-(32) и по меньшей мере одно терапевтическое средство для лечения злокачественного новообразования.

(36) Фармацевтическая композиция согласно указанному выше пункту (34) или (35), в котором опухоль является злокачественным новообразованием.

(37) Фармацевтическая композиция согласно указанному выше пункту (36), в котором злокачественное новообразование представляет собой рак легкого, рак молочной железы, рак простаты, рак поджелудочной железы, рак прямой и ободочной кишки, меланому, рак печени, рак яичника, рак мочевого пузыря, рак желудка, рак пищевода или рак почек.

(38) Способ лечения опухоли, отличающийся введением индивидууму по меньшей мере одного из антител или функциональных фрагментов антител согласно указанным выше пунктам (1)-(18) и (30)-(32).

(39) Способ лечения опухоли, отличающийся введением индивидууму по меньшей мере одного из антител или функциональных фрагментов антител согласно указанным выше пунктам (1)-(18) и (30)-(32) и по меньшей мере одного терапевтического средства для лечения злокачественного новообразования одновременно, по отдельности или последовательно.

(40) Способ лечения согласно указанному выше пункту (38) или (39), в котором опухоль является злокачественным новообразованием.

(41) Способ лечения согласно указанному выше пункту (40), в котором злокачественное новообразование представляет собой рак легкого, рак молочной железы, рак простаты, рак поджелудочной железы, рак прямой и ободочной кишки, меланому, рак печени, рак яичника, рак мочевого пузыря, рак желудка, рак пищевода или рак почек.

Преимущество изобретения

Согласно изобретению может быть получено терапевтическое средство или тому подобное для лечения злокачественного новообразования, содержащее антитело, которое связывается с В7-Н3 и обладает противоопухолевой активностью против злокачественных клеток.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

На фиг. 1 представлен график, показывающий присутствие или отсутствие ADCP-активности анти-В7-Н3-антитела против клеток NCI-H322. Планки погрешностей на графике представляют стандартные ошибки (n=3).

На фиг. 2 представлен график, показывающий присутствие или отсутствие ADCP-активности коммерчески доступного анти-В7-Н3-антитела против клеток NCI-H322.

На фиг. 3 представлен график, показывающий присутствие или отсутствие ADCC-активности антитела М30 против трансфицированных пустым вектором клеток 293 и В7-Н3-экспрессирующих клеток 293. Планки погрешностей на графике представляют стандартные ошибки (n=3). На чертеже «имитация» означает ADCC-активность М30 против трансфицированных пустым вектором клеток 293, и «В7Н3» означает ADCC-активность М30 против В7-Н3-экспрессирующих клеток 293.

На фиг. 4 представлен график, показывающий присутствие или отсутствие CDC-активности анти-В7-Н3-антитела против клеток NCI-Н322. Планки погрешностей на графике представляют стандартные ошибки (n=3).

На фиг. 5-1 представлен график, показывающий реактивность антитела М30 против дефицитного по В7-Н3 мутанта (IgV1 В7-Н3). Пунктирной линией указано свойство связывания для контрольного антитела, а сплошной линией указано свойство связывания антитела М30.

На фиг. 5-2 представлен график, показывающий реактивность антитела М30 против В7-Н3-дефицитного мутанта (В7-Н3 IgC1). Пунктирная линия показывает свойство связывания контрольного антитела, а сплошная линия показывает свойство связывания антитела М30.

На фиг. 5-3 представлен