Способ получения фицина
Патент 281745
Классы МПК
Способ получения фицина
Иллюстрации
Реферат
ОПИСАН И Е
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
281745
Союз Советскиз
Социалистическив
Респуолин
Зависимое от авт. свидетельства №
Заявлено 1.Х,1968 (№ 1272486/31-!6) с присоединением заявки №
Приоритет
Опубликовано 14.1Х.1970. Бюллетень № 29
Дата опубликования описания 14.Х11.1070
Кл. 3011, 2, 03
МПК А 61k 19/00
С 07О 7/00
УД1", 61 5.45:65.779,94 (088.8) Комитет по дедам иаобретеиий и открытие при Совете Министров
СССР
Авторы изобретения
А. Е. Мшвидобадзе, Б. И. Чумбуридзе и Р. В. Махарадзе
Тбилисский государственный медицинский институт
Заявитель
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФИЦИНА
Предмет изобретения
Изобретение Относится к области фарма кологии в частности получения фицина, иопользуемого в качестве лечебного средства.
Известны способы получения фицина из энзимсодержагцсго растительного сырья, например млечного сока инжира, путем осаждения фицина, очистки его с последующим диализом и сушкой.
Эти способы не позволяют получать чистый фицин в кристаллическом состоянии.
С целью выделения фицпна:в чистом виде в предлагаемом способе очистку осуществляют хроматографированием его на диэтиламиноэтилцеллюлозс с градиентной элюцией в ацетатном буферном растворе при рН 5,5—
5,7 в присутствии 0,5М раствора хлорида натрия.
Для получения фпцпна предлагаемым способом млечный сок из листьев и незрелых плодов инжира цептрифугируют при 5000—
5500 об/мин в течение 40 — 45 мин и смеши вают центрифугат с ацетоном в соотношении
1: 3. Выделявшийся фермент отделяют центрифугированием и растворяют в дистиллированной воде. Осаждение фермента ацетоном повторяют еще 3 — 4 раза, отделяя растворитель с примесями центрифугированием. Выделившийся сырой фермент растворяют в десятикратном количестве дистиллированной Воды. Полученный раствор пропускают через диэтиламиноэтилцелл10лозой пви
10 С. Элюцию осущоствляют ацетатным буферным раствором при рН 5,5 — 5,7 в присутствии 0,5М раствора хлорида натрия со скоростью 0,3 ял/1тин, собирая фракции по 10 .11л (исходя из 50 лтл 10%-ного водного раствора фицина и колонки диаметром 3 с,1т и длиной
50 сл1). Чистый фпцин выделяют из фракций
10 с максимумом сзетопоглощения прп 280 ль11к, проявляющих протеолитическую активность и нp содержащllх посторонних ОргliнH IескHх примесей. Этп фракции диализнруют пропу скяниеы через колонк с сефадексом и затем
15 подвергают лиофильнои сушке. Выход 7% от исходного растительного сырья.
20 Способ получения фицина из энзпмсодер>кащего растительного сырья, например млечного сока инжира, путем осаждения фицина, очистки его с последующим диализом и сушко1, отличатощийся тем, что, с целью выде25 пения фицина з чистом виде, очистку осуществляют хроматографированием его на диэтиламиноэтилцеллюлозе с градиентной элюцией в ацстатном буферном растворе при рН 5,5 — 5,7 в присутствии 0,5Ы раствора хлорида натрия.