Способ получения панкреатического ингибитррапротеазг'

Способ получения панкреатического ингибитррапротеазг'

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

О Й И С А Й Й Е 293384

ЙЗОБРЕТЕН Ия

Goes Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №вЂ”

Заявлено 08.V.1969 (№ 1328865/31-16) с присоединением заявки №вЂ”

Приоритет

Опубликовано 07.111.1972. Бюллетень № 9

Дата опубликования описания 12.1V.1972

М. Кл. А 61 k 19, 00

Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров

СССР

,> Д К 615.45:615.779.9>1 (088.8) Авторы изобретения

Н. И. Ларионова, H. Ф, Казанская, И. В. Березин,,11. Б. Полонская, Н. Ф. Говорова, 8. Л. Константинов и С. С. Тугунов

Московский государственный университет

Заявитель

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПАНКРЕАТИЧЕСКОГО ИНГHBHT()РА-ПРОТЕАЗ г:-=

Предмет изобретс и ия

Изобретение относится к области биохимии и касается способов получения панкреатического ингибитора протеаз.

Известны способы получения панкреатического ингибитора протеаз из смеси белков нанесением ее на иопообменник с последующим смыванием, диализом и высушиванисм.

Однако известные способы, предусматривающие проведение ионного обмена в колонках с использованием амберлита и других смол, сравнительно сложны и не обеспечивают получения достаточно чистого препарата.

Цель предлагаемого изобретения — выделение панкреатического пнгибитора протеаз в чистом виде.

Для этой цели смесь белков наносят па ограниченный объем КМ сефадекса С-50, например 1 г смеси на 2 г сухого ионообмснника B присутствии 0,2 лтоль раствора хлористого натрия при рН 7,2, и смывают 0,3—

0,6 моль раствора хлористого натрия.

Пример. 1 г пантрипипа или обессоленный раствор смеси белков с содержанием 1 г сухого вещества растворяют в 10 лл раствора, содержащего 0,2 лоль/л хлористого натрия и 0,005 лоль/л фосфорнокислого натрия (рН 7,2). Раствор наносят на 2 г сухого КМ сефадекса С-50, предварительно уравновешенного растворителем. После псремсшиваиия н течение 10 лпя ионообменник отфильтровывают, а фильтрат вновь смешивают с такой же порцией свежего сефадекса. Обе порции

5 ионообменника промывают до исчезновения окраски растворителем, используемым для растворения иантрипипа. Э,>поци|о ингибитора осуществляют раствором фосфатного буфер,1 при рИ 7,2 и той же концентрации, но c . o10 держанием хлористого натрия 0,3--0,6 лтоль/л.

Обессоливание элюата производят диализом

II использованием целлофановой мембраны и фильтрованием через сефадекс Г-25 в 5%-ной уксусной кислоте.

Способ получения панкреатического ингибитора протеаз из смеси белков путем ианс20 сепия се на ионообменник с последующим смыванием, диализом и высушиванием, отлича оцпйся тем, что, с целью выделения конечного продукта в чистом виде, смесь наносят на ограниченный объем КМ сефадекса

25 С-50, например 1 г смеси на 2 г rух гго ионообменника в присутстшш 0,2 ло п> раствора хлористого натрия при р11 7,2, и смывшот

0,3 — 0,6 лоль раствора хлористого натрия,