Патент ссср 294860
Патент 294860
Авторы
Классы МПК
Патент ссср 294860
Иллюстрации
Реферат
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
29486О
Союз Советских
Социалистических
Республик
Зависимое от авт. свидетельства №
МПК С 12k 9!00
Заявлено 26.I.1970 (№ 1399804/31-16) с присоединением заявки №
Приоритет
Опубликовано 04.11.1971. Бюллетень ¹ 7
Дата опубликования описания 29.III.!971
Комитет по делам изобретений н открытий при Совете Министров
СССР
УДК 612.398.1:616-076 (088.8) Авторы изобретения
М. Н. Мейсель, В. Е. Барский, В. Б. Иванов, К. Л. Шаханина, В. A. Чибисова, Ю. Е. Скляр, А, В. Афанасьева и Г. И. Михайлов
Заявитель
КРАСИТЕЛЬ ДЛЯ ЛЮМИНЕСЦЕНТНОЙ МЕТКИ БЕЛКА
Предме т изобретения
Изобретение относится к области микробиологии и касается красителей, используемых для люминесцентной метки белка.
Известно применение производных родамина В, например хлоридсульфородамина В, в качестве красителя для люминесцентной метки белка.
В настоящем изобретении в качестве красителя для люминесцентной метки белка предлагается использовать 4 (5) - (дихлор-сил.я- 10 триазиниламино) -редамин В, что позволяет расширить ассортимент флюорссцентных меTчиков белка.
Предлагаемый краситель позволяет производить флурохромировапие имунных антител 1S или срезов тканей.
Пр им ер 1. 50»le красителя растворяют в
5»1л спирта и постепенно добавляют к раствору глобулинов, содержащему 20 — 25»сг/лл белка из расчета 1» г красителя на 20» г бел- 20 ка. Реакцию конъюгации проводят при комнатной температуре в течение часа при постоянном перемешивании. Несвязанный краситель удаляют на сефадексе Г-25 в 0,1 М фосфатном буферном растворе при рН 7,5. Получен- 25 ные сыворотки изучают под люминесцентным микроскопом, например М,"1-2. Г1ри реакции с соответствующими антигенамп препараты сибиреязвснной, тулярсмийной и других сывороТОК ДаЮТ SlPl OC жЕЛтО-ОРаНЖСВОЕ СВСЧЕНи"
П р и м с р 2. Препараты срезов помещают в 0,02%-ный раствор красителя в 0,15 М фосфатном буферном растворе прп рН 5,6 — 5,7 и нагревают до 60 С, выдерживая при этой температуре в течение 1 час. Отмывку осуществляют 5 порциями буферного раствора (по
5 мин) и затем проточной дистиллированной водой. Затем срез сушат илн промывают спиртом и ксилолом ll заключают в нсфлюоресцирующую среду. Препараты рассматривают в люмипесцентный микроскоп, используя для возбуждения область 400 — 450 ллк. Флюоресценция препаратов наблюдается в оранжевой области спектра.
Применение 4(5) -(дихлор-сиял-триазиниламино)-родамина B в качестве красителя для люминесцептной метки белка.