Способ получения гравогормона

Способ получения гравогормона

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВЙДЕТЕЛЬСТВУ

Сома Сеаетскиа

Социалиотическиа

Реопублик

Зависимое от авт. свидетельства ¹â€”

Заявлено 23.1.1970 (№ 1398381/30-15) с присоединением заявки ¹â€”

Приоритет

Опубликовано 02.1Ю1971, Бюллетень № 9

Дата опубликования описания 13.IV,1971

МПК А 61k 17i06

Комитет по делам иаобрвтеиий и открытий при Соаете Миииотроа

СССР

УДК 615.361(088.8) Авторы изобретения

Ф. Ю, Рышка, Н. К. Ассонова, A. A. Молчанова, П. И, Шаталов, А. И. Коковии и А. С. Хохлов

Заявитель

Институт химии природных соединений АН

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГРАВОГОРМОНА

Изобретение относится к способам получения гормональных препаратов.

Известны способы получения сывороточного гонадотропина, заключающиеся в осаждении балластных белков в сыворотке крови. В качестве исходного сырья используют сыворотку, которую получают из крови жеребых кобыл с выходом около 60%.

Предложенный способ отличается тем, что в качестве исходного сырья берут кровь жеребых кобыл и фракционное осаждение проводят спиртом или ацетоном при значении рН 4,0—

4,5. Первое осаждение проводят при концентрации растворителей 20 — 50%, отделяют балластные белки, а активное вещество получают из надосадочной жидкости путем дальнейшего осаждения его повышением концентрации растворителей до 70 — 80%. Полученный осадок активного вещества лиофильно высушивают. Для дальнейшей очистки осадок экстрагируют водой, обессоливают фильтрацией через молекулярные сита и первую фракцию повторно фракционируют органическими растворителями.

Активность препарата первой ступени очистки составляет 50 — 100 мыш. ед./мг, а препарата второй ступени очистки 1800 †24 мыш. ед./мг.

Пример 1. 20 л дефибринированной крови жеребых кобыл с активностью 200 мыш. ед. лл подкисля от ледяной уксусной кислотой до рН 4,0 — 4,5 и при перемешивании добавляют 20 л 96% -ного этилового спирта. Через

12 час суспензию фильтруют на нутч-фильтре

5 под вакуумом, осадок отжимают на прессе, затем на фильтре его еще раз промывают 6 л

50% -ного этилового спирта и отбрасывают.

К фильтрату при перемешивании добавляют

60 л 96%-ного этилового спирта. Через 3 час

10 верхнюю часть раствора декантируют, а нижнюю центрифугпруют или фильтруют. Полученный осадок лиофильно сушат. Выход 30 г, активность 80 мыш. ед./мг.

15 Пример 2. 30 г осадка, полученного в примере 1, растворяют в 200 л л воды, нерастворимую часть отделяют центрифугHpoBBHHåì (выход 4,8 г, активность 40 мыш. ед./лг), а раствор пропускают через колонку, наполнен20 ную сефадексом Г-25 и уравновешенную водой. Первые 600 л г элюата, содержащего активное вещество, доводят до рН 4,5 и добавляют 500 лтл спирта. Через 2 час раствор центрифугируют, осадок сушат, выход 2,32 г, ак25 тивиость 100 мыш. ед./мг. К иадосадочиой жидкости добавляют еще 1500 мл спирта и через час раствор цеитрифугируют. Осадок промывают спиртом, су пендируют в воде и лиофилизуют. Выход 730 мг, активность

30 2400 мыш. ед./мг.

Предмет изобретенйя

Составитель P. Махнюк

Редакт ор T. Загребельная

Техред Л. В. Куклина Корректоры: В. петрова и Е. Ласточкина

Заказ 851/8 Изд. ¹ 379 Тираж 473 Подписное

ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Я-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

1. Способ получения гравогормона путем фракционного оса.ждения его в гонадотропиносодержащем сырье с последующим отделением примесей молекулярным фильтрованием, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода гравогормона и упрощения процесса, в качестве исходного сырья берут кровь жеребых кобыл, 2. Способ по и. 1, отличающийся тем, что фракционное осаждение крови спиртом проводят при рН 4,0 — 4,5.

3. Способ по пп. 1 и 2, отличающийся тем, что, с целью дальнейшей очистки препарата, после молекулярного фильтрования проводят повторное фракционное осаждение и лиофилизацию.