Ан ссср и всесоюзный научно-исследовательский институт антибиотиков

Ан ссср и всесоюзный научно-исследовательский институт антибиотиков

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

302I24

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

Заявлено 12.1Х.1969 (№ 1364572/31-16) с присоединением заявки №

Приоритет

Опубликовано 28.IV.1971. Бюллетень ¹ 15

Дата опубликования описания 26. т/11.1971

МПК А 61k 19/00

С 12d 13/00

Комитет по делам изобретеиий и открытий при Совете Министров

СССР

УДК 615.4(088.8) Авторы изобретения Л. В. Калакуцкий, С. Д. Таптыкова и С. А. Жуковская

Заявитель Институт микробиологии АН СССР и Всесоюзный научно-исследовательский институт антибиотиков

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКОГО КОМПЛЕКСА

Предмет изобретения

Изобретение относится к области микробиологии и касается способов получения протеолитического комплекса.

Известны опособы получения протеолитпческого комплекса типа проназы из культу- 5 ральной жидкости продуцента антибиотика; протеолитического комплекса из клеток мицелия акти номицетов после их разрушения механическими средствами; комплекса различных ферментов из клеток мицелия актиноми- 10 цетов после их разрушения автолизом с последующей экстракцией водой. Однако эти способы достаточно сложны.

Целью изобретения является предложение простого способа получения протеолитическо- 15 го ферментного комплекса с использованием отходов антибиотической промышленности.

Для этого культуральную жидкость перед отделением мицелия обрабатывают при рН

7,4 — 7,7 хлористым кальцием и двузамещен- 20 ным фосфатом аммония. Целевой продукт извлекают экстракцией мицелиальной массы

0,5 М раствором хлористого натрия.

Пример. К культуральной жидкости штамма-продуцента стрептомицина, получен- 25 ной после 150 ч ферментации в количестве

10 л, добавляют 40 г безводного хлористого кальция и 100 г двузамещенного фосфорнокислого аммония. Значение рН устанавливают на уровне 7,4 — 7,7 добавлением аммиачной 30 воды. После 40 мин выдержки мицелий отделяют фильтрованием, промывая его 4 л умягченной воды. Из нативного раствора известным способом получают стрептомпцин, а осадок мпцелия с протеолптической активностью

1,05 ед/лл при концентрации сухого вещества

45 .иг/ял эксграгпруют 8 л 0,5 М раствора хлористого натрия при перемешпвании и комнатной температуре в течение 1 час. После отделения осадка фильтрованием получают экстракт с протеолитпческой активностью

0,6 ед/лл. К этому экстракту постепенно прп перемешиванпп добавляют 3 объема пзопропанола, оставляют на 3 час, отделяют вьшавший осадок сепарацией и добавляют к нему

0,7 л дистиллированной воды. Получают суспензию с концентрацией сухого вещества

16 .чг/лл и протеолитпческой активностью

5,12 ед/.пл или 320 ед/г сухого вещества.

Способ получения протеолптического комплекса типа проназы из мицелиальной массы продуцента антибиотика путем ее отделения от культуральной жидкости с последующей экстракцпей, оглича ощийся тем, что, с целью увеличения выхода фермента и упрощения процесса, культуральную хкидкость перед отделением мпцелпя обрабатывают при pI-1

7,4 — 7.7 хлористым кальцием и двузамещенным фосфатом аммония, и целевой продукт извлекают экстракцпей мицелиальной массы

0,5 М раствором хлористого натрия,