Способ определения триптофана и его метаболитов в кровивсесоюзная
Патент 304449
Классы МПК
Способ определения триптофана и его метаболитов в кровивсесоюзная
Иллюстрации
Реферат
ЗО4449
О П И С А Н И Е
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Соввтскиз
Социалистическиз
Республик
Зависимое от авт. свидетельства ¹
МПК G Olj 3/00
Заявлено 15.1V.1970 (№ 1431469/30-15) с присоединением заявки №
Приоритет
Опубликовано 25.V.1971. Бюллетень ¹ 17
Дата опубликования описания 8Л II.1971
Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров
СССР
УДК 616.073.56(088.8) Авторы изсбретения
Н. М. Климов, Н. И. Передереев и Г. Л, Коромыслова
Всесоюзный институт экспериментальной ветеринарии
Заявитель
ЕСе . Я
ПАТЕИ|ЫС-ТЕХЦИЧЕИА
БИБЛИОТЕКОЮ
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРИПТОФАНА И ЕГО
МЕТАБОЛИТОВ В КРОВИ матографическую бумагу. Разделение производят методом вос«одящей хроматографии в н-бутаноле, ледяной уксусной кислоте и воде при отношении 4: 1: 1. Пятна триптофана и его метаболитов обнаруживают с помощью ультрафиолетового «емпскопа, вырезают и элюиру|от в 4 мл 70 1,-ного этанола в течсш|е
2 час, затем спектрофотометрнруют против контрольного элюата.
10 Расчет производят по формуле:
С т— и с где С, — количество триптофана, антраниловой :,ислоты H.111
E„— экстинкция испытуемого вещества при 280 нм для триптофана, прн
330 нм — для антраниловой кислоты и при 270 нм — для пндола;
С, — количество триптофана, антранпловой кислоты или индола в ст:1ндартном растворе, нанесенное на
«роматограмму;
E; — экстпнкция элюата, полученная при указанны.; длина«волн.
20
1. Способ определения трпптофана и его ме30 таболитов в крови, включающий разделение
Известен способ количественного определения метаболитов триптофана в крови, заключающийся в хроматографическом разделении проб крови, выявлении триптофана и его метаболитов, эл|оировании, окрашивании и количественном колориметрическом определении, Зтот способ приемлем только для определения больших количеств метаболитов в крови, а потому недостаточно точен и чувствителен.
Предложенный способ позволяет выявить минимальные количества триптофана и его метаболитов в крови и более прост по технике выполнения. Он заключается в том, что непосредственно после элюирования определяют концентрации триптофана и его метаболптов спектрофотометрически по степени поглощения ультрафиолетовых лучей, при максимуме поглощения для триптофана, равном
280 нм, для атраниловой кислоты — 330 нм и для индола — 270 нм.
Техника определения триптофана и его метаболитов по предложенному способу закл;очается в следующем.
К 3 мл гепаринизированной крови добавляют 12 мл ацетона и выдерживают при +4 C
24 час; экстракт отделяют от осадка фи7bTpoванием, ацетон упаривают и досушивают лиофильно. Сухой остаток расторяют в 0,1 мл
480 0-ного этанола и 0,02 мл наносят на хроПредмет изобретения
304449
Составитель В. Туманова
Редактор Е. П. Хорина Техред 3. H. Тараиеико Корректор Г. С. Мухина
Заказ 1840/!6 Изд. ¹ 773 Тираж 473 Подписное
ЦНИИПИ Комитета по делам изоврегений и открытий IpH Совете Министров СССР
Москва, )К-З5, Раушская наб., д. 4/5
Тиногр )фия, нр. Сапунова, 2 проб крови и выявление триптофана и его метаболитов, элюирование и количественное их определение, отлича)ошайся тем, что, с целью более точного количественного определения триптофана и его метаболитов, после элюирования определяют их концентрацгио спектрофотометрически по степени поглощения ультрафиолетовых лучей.
2. Способ по и. 1, отла1а)оа1айся тем, то спектрофотометр1гческое определение три1 TGфана и его м таболитов производят II() ма сспм альному lIîãëîùñíkllо ультрафиолетовых;)уБ чей для триптофана при 280 нл, а определе1;kIL ;IQT200,1HTII Триптофаllа 211Tp2IIII IOB011 кислоты — при 330 нл, метаболита индола— при 270 нм.