Способ совместного получения гигромицина б и препарата протеолитического фермента

Способ совместного получения гигромицина б и препарата протеолитического фермента

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

fl

О П И Г А Н И,Е iiI 397026 ,ИЗОБРЕТЕН ИЯ

Союз сьаетакнк. оаиалистичесннх

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт- свид-ву— (22) 3 аявлено 24.08.71 (21) 1693635!31-16 с присоединением заявки №вЂ” (23) Приоритет— (43) Опубликовано 30.10.79. Бюллетень ¹ 40 (45) Дата опубликования описания 30.10.79 (51) M. Кл.

С 12 D 9/14

С 12 D 13/00

Государственный комитет. по делам изобретений и открытий (53) УДК 615.779.931:

:615.779.94 (088.8) (72) Авторы изобретения А. П. Башкович, E. С. Зимнухова, В. О. Кульбах, А. В. Прокопович, В. А. Валов, Б. П. Томашевский, Я. И. Новоселов, Б. Д. Gropeëüöåâ и А, А, Томашевская (71) Заявители (54) СПОСОБ СОВМЕСТНОГО ПОЛУЧЕНИЯ

ГИГРОМИЦИНА Б И ПРЕПАРАТА

ПРОТЕОЛИТИЧЕСКОГО ФЕРМЕНТА

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к производству антибиотиков и ферментов.

Известен способ совместного получения гигромицина Б и препарата протеолитического фермента гигролитина, заключающийся в том, что культуральную жидкость Act. hygroscopicus отделяют от мицелия, осаокдают ионы кальция путем добавления двухзамещенного фосфата натрия, отделяют осадок и сорбируют антибиотик на смолах, в частности на смоле КБ-4П-2 в натриевой форме, а из фильтрата после сорбции антибиотика получают препарат протеолитического фермента гипролитина, например, путем лиофильного высушивания фильтрата.

Целью изобретения является повышение ферментативной активности и снижение потерь антибиотика и фермента.

Достигается это тем, что культуральную жидкость подвергают тепловой обработке при 40 С в течение 30 мин., ионы кальция осаждают в нейтральной среде до остаточного уровня 0,05 — 0,1% путем добавления оксалатов, сорбцию антибиотика проводят непосредственно из культуральной жидкости, а в фильтрат после сорбции антибиотика вводят ионы кальция до концентра2 ции 0,05 — 0,1 "o, отделяют мицелий и осадок и обезвоживают раствор.

Пр и м е р. 100 л полученной при глубинной ферментацпи Act. 11удгoscopicUs культуральпой жидкости, содержащей

1600 ед/мл гигромицина Б и 30 ПЕ/мл протеолитической активности, нагревают в ферментере до 40 С и выдерживают при этой температуре 30 мин. Затем культуральную жидкость охлаждают до 20 С и передают в аппарат для осаждения ионов кальция. В аппарат добавляют при перемешивании 0,27 кг оксалата натрия, Значение рН уставив. пвают 6.5. После 30 мпн.

1б перемешивания культуральную жидкость подают на сорбцию гигромицина Б ионообменной смолой КБ-4П-2. Сорбцию производят в колонке открытого типа при подаче культуральной жидкости снизу вверх.

2о 90 л фильтрата после колонки собирают в емкость, добавляют 50 г хлористого кальция. После отстаивания раствор декантируют от мицелия и подают на вакуум-упарку с помощью пленочного испарп25 теля. Температура греющей воды в рубашке 60 С, температура паров 23 С. Получают 30 л концентрата, которые подают на распылительную сушилку. Процесс сушки производят при температуре входящего

ЗО воздуха 120 С и выходящего — 80 С. По397026

Составитель С. Шенева

Тскрсд H. Строганова

Корректор А. Степанова

Редактор Е. Месропова

Заказ 7030 Тираж 549

НПО «Поиск» Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб. д 4/5

Изд. М 633

Подписное

Загорская типография Упрполиграфиздата Моссблисполкома

2 лучают 2 кг протогигролитина ГЗХ с активностью 300 ПЕ/г. Антибиотик, сорбированный смолой КБ-4П-2, десорбируют 30 л

1 н. NH4OH. Получают 25 л элюата, содержащего 50 000 ед/мл.

Формула изобретения

Способ совместного получения гигромицина Б и препарата протеолитического фермента с использованием культуры

Act. hygroscopicus путем осаждения ионов кальция, со рбции антибиотика на ионообменной смоле и выделения фермента пу3 тем обезвоживания фильтрата после сорбции а нтибиотика, отличающийся тем, что, с целью повышения ферментативной активности и снижения потерь антибиотика и фермента, культуральную жидкость подвергают тепловой обработке при 40 С в течение 30 мин, ионы кальция осаждают в нейтральной среде до остаточного уровня

0,05 — 0,1 /о путем добавления оксалатов,,10 сорбцию антибиотика проводят непосредственно из культур альной жидкости, а в фильтрат после сорбции антибиотика вводят ионы кальция до концепт рации 0,05-—

0,1 /о, отделяют мицелий и осадок и обезвоживают .раствор.