Способ определения активности моноаминоксидазы

Способ определения активности моноаминоксидазы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

0 П И С А Н И Е 4О5О72

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЙЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

М. Кл. 6 OIn 33/16

Заявлено 15.11.1972 (№ 1744101/31-16) с присоединением заявки №

Приоритет

Опубликовано 22.Х.1973. Бюллетень № 44

Дата опубликования описания 23.VII.1974

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

УДК 612.015.1(088.8) Автор изобретения

А. И. Балаклеевский

Белорусский научно-исследовательский санитарно-гигиенический институт

Заявитель

I

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ

МОНОАМИНОКСИДАЗЫ

zH

0.

0 + ынь+ Н202 сов М4 мАо н,о;- о, который в кислой среде подвергают взаимо- 10 соответствующий гидрофобпый гидразоп (будействию с избытком 2,4-динитрофенилгидра- рого цвета) зина, при этом образуется и кристаллизуется

Н

С

0 + Н К вЂ” N

H Ко

ХЬ

0=и†N

+Н 0

Nl02 тель (ацетон, этанол, н.-бу анод и другие) .

При этом образуется хромофор малиново-розового цвета. Интенсивность окраски хромофора измеряют на фотоэлектроколориметре

После центрифугирования гидразоп выпадает в осадок.

Осадок гидразона в щелочной среде экстрагируют в полярный органический раствориИзобретение о",носится к области биохимии.

Известен способ определения активности моноаминоксидазы (с использованием в качестве субстрата бензиламина), основанный на спектрофотометрическом определении при Х

250 нм количества циклического хромофора, образующегося при взаимодействии продукта реакции бензальдегида с циклогексаном.

Недостатком такого способа является нестабильность получаемых результатов, а также относительно цевысокая чувствительность.

С целью повышенп; чувствительности и специфичности способа химическую обработку бензальдегида проводят 2,4-динитрофенилгндразином в кислой среде.

Пример. Из бензиламина в забуференной среде инкубации в присутствии мопоаминоксидазы (МАО) получают бензальдегид

405072

Предмет изобретения

Составитель С. Щенева

Редактор Н. Спиридонова Техред Л. Богданова Корректор Л. Орлова

Заказ 175!/12 Изд, Хо 1307 Тираж 743 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 (ФЭК) или спектрофотометре при 3,=460 ммк; она и служит мерой активности ионоаминоксидазы в биологическом материале.

Предлагаемый способ обладает высокой чувствительность1о: молярный коэффициент экстинции хромофора — 2,4-динитрофенилгидразона бензальдегида равен 23700 М )(см (при 1=460 ммк), что намного превышает коэффициент экстинции как самого бензальдегида (13000 М вЂ” см — при Х=-242 ммк), так и других хромофоров, используемых в известных спектрофотометрических методах определения МАО.

Способ определения активности моноаминоксидазы, заключающийся в том, что в пробу добавляют бензиламин, с последующим превращением бензальдегида в хромофор и спектрофотометрированием, отл и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью повышения чувствительности и специфичности способа, обработку бензальдегида проводят 2,4-динитрофенилгидразином в кислой среде.