Продуцент окситетрациклина

Продуцент окситетрациклина

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

О П А :g- :.. È Е

ИЗОБРЕТЕН ИЯ (»> 4I0645

Союз Советских

Социалистических

Республик

АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Зависимое от авт. свидетельства— (22) Заявлено 03.11.71 (21) 1724973 31-16 с присоединением заявки №вЂ” (32) Приоритет—

Опубликовано 05.05.74. Бюллетень № 17

Дата опубликования описания 15.01.75 (51) М. Кл. С 12d 9/18

Гасударственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 615.779 (088,8) (72) Авторы изобретения

С. М. Рудая, Э. М. Сингал, Н. К. Соловьева, С, А. Ильинская, А. С. Тихоненко, В. И. Фролова и А. Д. Кузовков

Всесоюзный научно-исследовательский институт антибиотиков (71) Заявитель (54) ПРОДУЦЕНТ ОКСИТЕТРАЦИКДИНА

Изобретение относится к производству антибиотиков.

Известно применение Act. rimosus в качестве продуцента окситетрациклина.

Предлаraется применение культуры Act.

pseudolysogenioys sp no BI-IИИА в качестве продуцента окситетрациклина. Культура Ас1.

pseudolysogenicys sp. nor. ВНИИА выделена в 1968 г. из почвы Средней Азии. На питательных средах: почвенной, крахмало-аммиачной, Придхэма-Готтлиба с раффиназой, Чапека, картофельной, крахмальной. Культура образует спиральные спороносцы, которые расположены моноподиально, ложно-мутовчато, имеет овальную форму спор с шиповидной оболочкой.

На средах аспарагипо-глюкозной, аспарагино-глицериновой, минеральной ¹ 1 Гаузе, CP Красильникова с глюкозой, ЧапекаДокс (видоизмененной), Ваксмана, ПридхэмаГоттлиба с мальтозой и с арабинозой, тирозиновой, соевой, кукурузной, органической ¹ 2

Гаузе гифы воздушного мнцелия стериальные, прямые или волнистые.

На среде Чапека воздушный мицелий слабо развит, беловатого цвета, субстратный мицелий бесцветный, На среде минеральной ¹ 1 Гаузе воздушнтяй мицелий слабо развит, мучнистый, белого цвета, субстратный мицелий бесцветный.

На крахмало-аммиачной среде воздушный мицелий белого цвета, мучнистый, с возрастом становится обильно пушистым белоснежным, субстратный мицелий от бежевого до песочного цвета.

На глицерин-аспарагиновой среде воздушный мицелий слабо развит, в виде пушка темно-пепельносерого цвета, субстратньш мпцелий темно-пепельный.

1lа овсяной среде воздушный мнцелпй обильный, ватообразный, белоснежный, субстратный мицелий от темно-оливкового до темно-орехового цвета, растворимый пигмент соответствует цвету субстратного мицелия.

10 На среде Эммерсона воздушный мнцелпй пушистый, белоснежный, субстратный мпцелнй песочный, бежевый.

Iia почвенной среде рост и воздушный мпцелий слабо выражены, последний беловатого

20 цвета, субстратный мицелий бесцветный, желатину раз>ни>кает, крахмал гидролизует, пз использованных углеводов усваивает глюкозу, мальтозу, раффинозу, арабинозу, сахарозу, инозит, образует антибиотик окситетрациклин.

Выделяют антибиотик из культуры Act.

Pseudolysogenicus sp. nov. ВНИИА следующим образом.

Пример 1. Ферментационную среду состава (в %): кукурузный экстракт 1,0 на сырой вес; аммоний сернокислый 0,35; натрий

410645

100

Ф0 в0 !

1600 1400 1, ч1 1000 500 700 с00 5170

3йИ !00 „ ва

О01 д0 (г <;г Я р д ю. кц т Ъ« liii0

/.ъ 1(, J1

600 S 00 0V0 лЫ0

2 i во

О и(I Ь Й

1600 1400 1200 1000 600 700 000 500

3600 т200 2И0 авив 3

Составитель С. Щеиева

Техред Е. Борисова

Корректор В. Гутман

Редактор Т. Каранова

Заказ 1723/571 Изд. № 824 Тираж 456 Подписно.

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, )К-35, Раушскаи наб., д. 4/5

Тип. Харьк. фил. пред. «Патент» хлористый 0,5; мел 0,5 крахмал 1,5, глюкоза

1 0 при рП вЂ” 6,8 — 7,0 засевают 5% 48 — 65 часового вегетативного мицелия. 4,5 л культуральпой жидкости подкисляют концентрированной ICI до ро 1,5. Через 30 л1ин перемешивания нативный раствор отфильтровывают (активность 316 2/ял), насыщают NCI, подщелачи вают до рН 9 — l0%-ныгм раствором

1"аОН и антибиотики извлекают бутанолом, первое извлечение — 1 л бутанола, второе и третье — 300 лл. Объединенные бутанольные экстракты нейтрализуют 0,1 и. НСI, промывают 50 л1л воды, упарнвают досуха. Полученный остаток (1,2 г) взбалтывают с 10 лл

2%-ного раствора щавелевой кислоты, отфильтровывают смолистый красный осадок, раствор доводят аммиаком до рН 3,5 — 4 и оставляют в холодильнике. Выпавший осадок отфильтровывают, высушивают (вес = 150 лг) н растворяют в 16 мл метанола при подкислении концентрированной НСI до рН 3. Раствор обрабатывают активированным углем, фильтруют, упаривают растворитель до 2 ил.

Выпавший кристаллический осадок отфильтровывают, высушивают в вакууме при 60 С, т. пл. 193 — 200 С, (ИК-спектр см. фиг. 1). Получают гигроскопичную форму хлоргидрата окситетрациклина.

Пример 2. Гигроскопиччую форму хлоргидрата окситетрациклина, полученную

5 по примеру 1, нагревают с трехкратным количеством изопропанола при 50 — 55 С, реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, осадок отфильтровывают. высушивают в вакууме; т. пл. 202 — 208 С (ИК-спектр см.

10 фиг. 2). Получают пегигроскопичную форму хлоргидрата окситетрациклина, Пример 3. Ги роскопичную форму хлоргндрата окситетрациклина, полученную по примеру 1, нагревают с трехкратным ко15 личеством смеси изопропанола с метанолом (70: 30) при 50 — 55 С. После охлаждения до комнатной температуры осадок отфильтровывают, высушивают в вакууме, т. пл. !94—

199 С (ИК-спектр см. фиг. 3) . Получают

20 умеренно гигроскопичную форму хлоргидрата окситетрациклнна.

Предмет изобретения

Применение культуры Actinomyces pseudolysogenicus sp. noi. ВНИИА в качестве продуцента окситетрациклина.