Патент ссср 416759
Иллюстрации
Реферат
416759
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
H АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советских
Социалистических
Республик
Зависимое от авт. свидетельства X
Заявлено 19.11.1971 (№ 1631381/18-24) с присоединением заявки №
Приоритет
Опубликовано 25.11.1974. Бюллетень ¹ 7
Дата опубликования описания 06 VIII.1974
1,л. С 12k 1, 00
Государственный комитет
Саввтв Министров СССР ао делам изобретений и открытий
УДК 576.8(088.8) Авторы изобретения
Л. Е. Корш и T. 3. Артемова
Заявитель
Институт общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА
МИКРООРГАНИЗМОВ В ВОДЕ
Изобретение относится ы области санитарно-бактериологического исследования качества воды.
Известные спосооы определения количества микроорганизмов в воде, основанные на окрашивании содержащихся в пробе воды клеток с последующим их подсчетом, характеризуются большой трудоемкостью и недостаточно высокой точностью. ,По предлагаемому способу, с целью повышения точности и ускорения процесса определения числа клеток, микроорганизмы из пробы воды при их окрашивании флуорохромируют на нагретом, например до 70 С, нелюмпнесцирующем мембранном фильтре буферным (с рН порядка 7,5) распвором флуорохрома ривапола концентрации. порядка 1:2000 и затем регистрируют флуоресценцию ми кроорганизмов.
Концентрирование бактерий производят не на обычных, мембранных фильтрах, а на нелюминесцирующих. Вместо скрашивания микроорганизмы флуорохромируют непосредственно на мембранном фильтре.
Для флуорохромирования из многих флуорохромов выделен риванол, так как он дает яркую флуоресценцию .всех разнообразных по видовому составу микроорганизмов природной воды, хорошо дифференцирует бактериальные клетки AT частичек. Для получения стабильного эффекта флуорохромиравания флуорохром готовят на буферном растворе концентрации порядка 1: 200 непосредственно перед анализом. С целью ускорения способа флуорохромирование проводят горячим раствором риванола (70 С).
Важной особенностью люминесцентно-микроскопичеокого метода является возможность автоматпчекого учета светящихся клеток, 1О поэтому метод может быть использован в приборе для регистрации общей микробной загрязненности воды.
Пробу воды для исследования отбирают в стерильную посуду. Через нелюминссцирую15 щпй мсмбпаш|ый Фильтр в фильтровальном аппарате фильтруют определенные объемы воды с учетом того, чтобы прп подсчете в 1 квадрате сетки Гаженко было нс более 10 клеток.
20 Фильтр с осевшими на него бактериями подсушивают сухим жаром до полного высыхания. Флуороxðîìnðовànnå производят в течение 2 мин, помещая фильтр стороной с бактериями вверх на поверхность 0,2о о-ного ра25 створа флуорохрома ри ванола на фосфатном
1/15 М буфере с рН = 7,0 — 7,5, предварительно нагретого до 70 С. Затем остатки красителя удаляют, помещая фильтр на фильтровальную бумагу, смоченную дистилли30 рованной водой, путем перекладывания до
416759
Предмет изобретения
Составитель Е. Тимохин
Техред Г. Васильева
Редактор А. Батыгин
Корректор В. Брыксина
Заказ 1553!12 Изд. М 529 Тираж 456 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
Москва, )K-35, Раугвская паб., д. 4/5
Типография, пр. Сапунова, 2 тех пор, пока площадка под фильтром не перестанет окрашиваться.
После высуши вания фильтр помещают на предметное стекло между слоями нелюминесцирующего иммерсионного масла, накрывают тонким покрывным стеклом, мпкросхопнруют под л1сминесцентным микроскопом в,падающем свете со светофильтр".ìè СЗС-14, БС-8 н
ФС-1, запирающим светофильтром rKC-18.
Просчитывают с помощью окулярной сетки
Гаженко количество бактерий не менее, чем в
20 квадратах. При подсчете необходимо учитывать быстрое выцветание препарата под воздействием возбужда1ощих люминесценцию лучей.
Способ определения количества микроорганизмов в воде, основанный на окрашивании
5 содержащихся в проое воды клеток с последующим их подсчетом, отл н ч а ю щ ее с я тем, что, с целью lIQBbIIHcHI: точности и ускорения процесса определения ..сла клеток, микроорга:шзмы из пробы воды при их окра10 шиванпн флуорохромируют на нагретом, например до 70 С, нелюминесцирующем мембранном фильтре буферным (с рН порядка
7,5) раствором флуорохрома риванола концентрации порядка 1: 2000 и затем регистри15 руют флуоресценцию микроорганизмов.