Способ получения аргинин-содержащегополипептида с повторяющейся последовательностью аминокислот

Способ получения аргинин-содержащегополипептида с повторяющейся последовательностью аминокислот

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

1Щ 4174I5

Союз Советских

Социал истицеских

Республик (61) Зависимое от авт. свидетельства (22) Заявлено 21.12.71 (21) 1727542/23-4 (51) М. Кл. С 07с 103/52 с присоединением заявки

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (32) Приоритет

Опубликовано 28.02.74. Бюллетень ¹ 8

Дата опубликования описания 12.08.74 (53) УДК 547.964.4(088.8) (72) Авторы изобретения

В. К. Буриченко, Г. Ф. Касымова и Э. Е. Мейтус

Институт химии АН Таджикской ССР (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АРГИНИН-СОДЕРЖАЩЕГО

ПОЛИПЕПТИДА С ПОВТОРЯЮЩЕЙСЯ

ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬЮ АМИНОКИСЛОТ

Изобретение относится к получению полипептидов с повторяющейся последовательностью аминокислот и может быть использовано в м еди цин е.

Известен способ получения аргинин-содержащего полипептида с повторяющейся последовательностью амин0кислот, заключающийся в том, что бромгидрат М-оксисукцинимпдного эфира 1 -лейцил-N -трифторацетил-1 -орнптил1.-лейцина полимеризуют в диметилформамиде в присутствии триэтиламина, из полимера удаляют трифторацетильнуto группу с помощью пиперидина и освободившуюся аминогруппу гуанидируют, получая названный выше трипептид. При этом гуанидирование протекает только на 25%.

Предлагаемый в изобретении спосоо получения нового аргинин-содержащего полипептида с повторяющейся последовательностью аминокислот (гли-L-ала-L-apr) заключается в том, что бромгидрат Хо-нитроаргинин-содержащего трипептида, например, 2,4,5-трихлорфенилового эфира глицил-L-аланил- (Хб-HHTpo) -1 -аргинина, полимеризуют в димстилформамиде в присутствии 2,5 эквивалента триэтиламина с последующим удалением Хо нитро-группы гидрогенолизом и выделением целевого продукта известными приемами, В качестве мономера используют бромгидрат 2,4,5-трихлорфенилового эфира глицил-1аланил-1-(Хо-нитро)-аргпнпна. Полимерньш продукт реакции гидрируют для удаления нитро-группы. Чол. вес образующегося при этом полипептида равен 10000.

Применив известный способ полимерпзации, получают новый физиологи 1ески активный аргинин-содержащий полипепти 1 (гли-1 -ала-1— арг) „. Кроме того, в отличие от известного tt предложенном решении исключен процесс гуа и и д и р о в а н и я, и 13 о т е к <110 гц! и н е и о t I I o c T b lo u уменьшено число стадий.

Пример 1. Получение мономера — бромгидрата 2,4,5-трихлорфенилового эфира гли15 цил-1 -аланил-1 - (Xt -нитро) -аргинина.

К 0,5 г карбобензокси-глицил-аланила в тетрагидрофуране (ТГФ) при перемешивании и охлаждении до — 5 С добавляют 0,7 r дициклогексилкарбодиимпда в ТГФ, перемешпва20 ют 20 мин, приливают раствор 1,5 r бромгидрата 2,4,5-трихлорфенилового эфира Nо-ннтроаргинина в ТГФ и 0,8 мл триэтпламина. Реакционную массу перемепшвают 4 час прн — 5 С и оставляют на ночь при комнатной темпера25 туре. Избыток дициклогексилкарбодиимида разрушают ледяной уксусной кислотой, растворитель отгоняют, остаток растворяют в этилацетате и промывают последовательно 2 и.

НС1, НеО и 5%-ным ХаНСО,. Органический

30 слой сушат над МдЯО.„растворитель отгоня417418

Предмет изобретения

Составитель А. Васильев

Техред Л. Богданова

Корректор А. Степанова

Редактор Г. Тимофеева

Заказ 1707/6 Изд. Кз 1330 Тираж 506 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 ют, остаток кристаллизуют из смеси этилацетат-петролейный эфир.

Выход карбобензокси-трипептида 0,85 г (66%); т. пл. 89 — 91 С; Кг 0,9 и 0,81 в системах Н20 — СНзСООН вЂ” н-С Н,ОН (30: 10:100) и вторичный С НзОН вЂ” 3 /о NH: ОН (100: 44) .

Растворяют 0,85 г 2,4,5-трихлорфенилового эфира карбобензокси-глицил-1 -аланил-1 - (Nонитро)-аргинина в 3 мл ледяной уксусной кислоты и прибавляют 2 мл 35%-ной HBr/

/СНзСООН. Реакционную смесь встряхивают в течение 20 мин при 20 С и приливают абсолютный эфир. Выпавший осадок промывают эфиром и сушат в вакууме. Выход 0,5 г (63%) Rr 0,28 и 0,54.

Пример 2. Получение полипептида глицил-L-аланил-L-аргинин.

Растворяют 0,5 r бромгидрата 2,4,5-трихлорфенилового эфира глицил-1 -аланил-L- (Ю-нитро) -аргинина в 0,4 r диметилформамида (ДМФА) при нагревании не выше 50 C. После охлаждения раствора до 20 С прибавляют

0,2 г триэтиламина (2,5 эвк). Полимеризацию проводят в течение 5 суток при комнатной температуре в запаянной ампуле. Полученный продукт обрабатывают абсолютным метанолом и выпавший осадок промывают декантацией метанолом и эфиром.

Поли - (глицил-1 — аланил-1.- (Ю-нитро-аргинин) подвергают каталитическому гидрированию на Pd в присутствии эквивалентного количества НС1 в ДМФА в течение 15 час. Раствор фильтруют, растворитель отгоняют в вакууме, а остаток обрабатывают абсолютным эфиром. Мол. вес образующегося при этом

10 полипептида равен 10000.

1. Способ получения аргинин-содержащего полипептида с повторяющейся последовательностью аминокислот, отличающийся тем, что бромгидрат NG-нитроаргинин-содержащего полипептида полимер изуют в диметилформамиде в присутствии 2,5 эквивалента

20 триэтиламина с последующим удалением NGнитро-группы гидрогенолизом и выделением целевого продукта известными приемами.

2. Способ получения по п. 1, о тл и ч а юшийся тем, что как мономер используют

25 бромгидрат 2,4,5-трихлорфенилового эфира глицил-L-аланил-1 - (N -нитро) -аргинина.