Способ определения ксерофильности микроорганизмов в пористых средах

Способ определения ксерофильности микроорганизмов в пористых средах

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

О П Е пц 42!927

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Зависимое от авт. свидетельства (22) Заявлено 1 9.10.72 (21) 1838433,:30-15 (51) 41. Кл. О 01п 33 24 с присоединением заявки No

Гасударственный комитет

Совета Министров СССР ла делам изобретений и открытий (32) Приоритет

Опубликовано 30.03.74. Бюллетень ЛЪ 12

Дата опубликования описания 05.09.74 (53) УДК) 631.425.2=

=-631.432 (088.8) (72) Авторы изобретения

Д. Г. Звягинцев, И. И. Судницын и А. П. Питрюк

Московский государственный университет им. М. В. Ломоносова (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КСЕРОФИЛЬНОСТИ

МИКРООРГАНИЗМОВ В ПОРИСТЫХ СРЕДАХ

Изобретение Относится к способам определения кссрофильности микроорганизмов в iioристых средах (почва, минерал, уголь, uolloобменная смола, силикагель и др.) и может быть применено B сельском хозяйстве, микробиологической промышленности, микробиологии, в почвоведеиии, космических исследованиях.

Известен способ определения ксерофильности микроорганизмов в пористых средах, заключающийся в том, что в эксикаторах при помощи водных растворов различных Веществ создают заданный потенциал воды и помещают образцы пористой среды с культурами микроорганизмов. Ксерофильность микроорганизмов определяют по нижнему уровшо потенциала воды в пористой среде, где происходит развитие микроорганизмов, оцениваемое лишь качественно, например по прорастанию спор, росту мицелия, образованию колоний.

Однако известный способ, во-первых, нс позволяет количественно оценивать степень ксерофильности микроорганизмов, так как в пористых средах перечисленные признаки развития микроорганизмов не поддаются точной количественной оценке; во-BTopblx, микооргапизмы начинают интенсивно развиваться задолго (например, за 10 суток) до достижения заданного потенциала воды, и к моменту его установления энергетические ресурсы срсды оказыва1отся частично использованными, а накопление в среде продуктов метаболизма микроорганизмов препятствует их нормальной жизнедеятельности. Таким образом, определяемая известным способом степень ксерофильности пе является истшшой.

Цель изобретения — создание количественного способа определения степени ксерофильности микроорганизмов в пористых средах.

10 Эта цель достигается тем, что микроорганизмы вносят в пористую среду, которую выдерживают В замкнутом объеме с различными уровнями потенциала воды при температуре от 0 до + 1 С, что предотвращает жизпедея15 тельность микроорганизмов вплоть до достижения равновес1гя воды в растворе и B пористой среде. После этого измеряют интенсивность жид! сдс.7ятсльности микоорганизмов, например по количеству потрсблсш1ого кисло20 рода, либо по другим количественным показателям в зависимости от вида микроорганизмов. Затем определя!От показате.7ь кссрофильИОсти, pBBiii и потс11цпалу ВОды, npil котором интенсивность >кизисдеяте 7ьности микроорга25 пизмОВ состЯВляет 50 0 От максима Iblloi О уровня жизнедеятельности при потсциале вод ы, 17 а в и 0 з I I x 7 Io .

На чертеже прс7стявлспа зависимость между поте11циалом воды в каолините и количе50 ством кислорода, поглощенного культурами

421927 Ы ср

4 О

4 п и-д -zoo

Паггтеициал 1о3ы, ттгм

Состави гель Л. Бельская

Техред Т. Курилко

Редактор А, Купрякова

Заказ 2119/18

Корректор Т. Хворова

Подписное

Изд. ¹ 1448

Тираж 651

Типография, пр. Сапунова. 2

Cladosporium cladosporioides, Serratia marcescens за 6 час. Интенсивность дыхания снижается в 2 раза при уменьшении потенциала воды в каолините от 0 до — 126 амт для

Cladosporium cladosporioides и также при уменьшении потенциала воды от 0 до — 24атя для Serratia marcescens. Следовательно, показатель ксерофильности для культуры

C l a dosporium cl a do sp or ioi des равен — 126 атм, а для Serratia marcescens — 24 атм, таким образом культура Cladosporium cladosporioides в 5 раз более ксерофильна.

Пример. В 1 г среды (например, каолинита) добавляют 0,5 мл суспензии микроорганизмов (1.10 клеток в 1 мл мясо-пептонного бульона (МПБ). Тщательно перемешивают и высушивают в сушильном шкафу в течение 2 час при 30 С, Высушенный минерал с культурой микроорганизмов переносят на дно сосудика аппарата Варбурга. В боковой отсек наливают 1 мл титрованпого раствора КОН определенной концентрации, обеспечивающей получение заданного потенциала воды. Сосудики закрывают стерильной ватой и ставят в анаэростат, откачивают воздух до остаточного давления 10 мм рт. ст. и помещают анаэростат в холодильник (+1 С). Каждые 4 суток раствор щелочи заменяют. При достижении равновесия воды в растворе и в пористой среде концентрация щелочи перестает изменяться.

Сосудики вынимают из анаэростата, удаляют шприцем раствор КОН и наливают

0,5 мл 10о о-ного раствора КОН. Сосудики помещают в аппарат Варбурга при 30 С. Потребление кислорода определяют в течение

6 час по стандартной методике.

Дыхание и потребление МПБ микроорганизмами во время пребывания в холодильни«е отсутствовало, что позволило сохранить энергетические ресурсы среды и предотвраТо тить накопление продуктов метаболизма микроорганизмов.

П ip е д м е т .и з о б р е т е н и я

ls Способ определения ксерофильности микроорганизмов в пористых средах, включающий помещение образцов пористой среды с культурой микроорганизмов в замкнутый объем и создание в нем заданного потенциала воды с

20 последующей оценкой жизнедеятельности микроорганизмов, отличающийся тем, что, с целью количественного определения степени ксерофильности микроорганизмов, пористую среду с культурой микроорганизмов выдержи25 вают в замкнутом объеме при температуре от 0 до + 1 С до достижения равновесия воды в растворе и пористой среде, затем определяют интенсиваность жизнедеятельности микроорганизмов, например по потреблению кисЗО лорода микроорганизмами и устанавливают показатель ксерофильности.