Способ определения сульфгидрильных соединений в содержащих их продуктах

Способ определения сульфгидрильных соединений в содержащих их продуктах

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ»4З8682

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социвлистимеских

Республик (61) Зависимое от авт. свидетельства (22) Заявлено 15.09.72 (21) 1828856/28-13 с присоединением заявки Ке (32) Приоритет

Опубликовано 05.08.74. Бюллетень Ке 29

Дата опубликования описания 28.01.75 (51) М, Кл. С 12d 13/00

Гасударственный комитет

Совета Министров СССР ао делам изобретений и открытий (53) УДК 663.18(088.8) (72) Автор изобретения

К. П. Петров (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУЛЬФГИДРИЛЬНЫХ

СОЕДИНЕНИЙ В СОДЕР)КАЩИХ ИХ ПРОДУКТАХ

Известен способ определения сульфгидрильных соединений в содержащих их продуктах путем отбора пробы исходного продукта и введения в нее реактива, Цель изобретения — упрощение процесса и определение водора створ имых, легкоокисляющихся сульфгидрильных соединений типа восстановленного глютатиона.

Это достигается тем, что на пробу воздействуют IN раствором сульфосалициловой кислоты, выдерживают раствор, фильтруют, в фильтрат добавляют 5 /О-ный раствор сульфата кадмия и 1 н. раствор едкого натрия, затем центрифугируют, а в полученном центрифугате определяют легкоокисляющиеся сульфгидрильные соединения 4%-ным раствором сульфосалициловой кислоты и 5o -ным раствором иодистого калия с последующим расчетом этих соединений.

Пример 1. 1) В мерную колбу на 100 мл отвешивают 10 г отобранного растительного или животного материала (бражку, промывные воды дрожжевых заводов, послеспиртовую мелассную барду и т, п.). Постепенно приливают 80 мл дистиллированной воды и взбалтывают в течение 10 мин. В хорошо перемешанную смесь медленно при постоянном помешивании добавляют 5 мл 1М раствора сульфосалициловой кислоты, еше раз перемешивают и оставляют на 5 мин.

Содержимое колбы доводят водой до метки и сильно встряхивают. Смесь фильтруют через складчатый бумажный фильтр или центрифугируют.

2) 50 мл прозрачного фильтрата или центрифугата, то есть половину первоначальной навески — 5 г, помещают в мерную колбу на

100 мл, добавляют 40 мл 5 /О-ного раствора сульфата кадмия и 4 мл 1 н. раствора едкого

10 натрия, .взбалтывают и доводят водой до метки, отстаивают 30 мин., затем центрифугируют и осторожно декантируют чтобы не захватить осадка.

15 3) Пипеткой Мора отбирают 50 мл прозрачного центрифугата (2) в коническую колбу на 150 мл. Это количество отвечает 2,5 г первоначальной навески. В колбу добавляют при помешивании 2,5 мл 40/О-ного раствора

20 сульфосалициловой кислоты и 2,5 мл 5/О-ного раствора иодистого калия. Иодистый калий приготовляют ежедневно и проверяют на отсутствие свободного иода (качественная реакция с крахмалом). К анализируемой

25 пробе прибавляют 10 капель 1 /О-ного раствора крахмала и титруют 0,001 н. раствором

KI03 до появления устойчивой синей окраски. В случае небольшого объема раствора, идущего на титрование, пользуются микро30 бюреткой.

438682

Предмет изобретения

Составитель Г. Субботина

Техред Г. Васильева

Корректор Н. Учакина

Редактор В. Дибобес

Заказ 3701/7 Изд. № 131 Тираж 456 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, 7К-35, Раушская наб., д. 4/б

Сапунова, 2

Типография, пр.

В качестве контроля титруют 50 мл дистиллированной воды в условиях, идентичных с опытными. Это титрование производят для внесения поправки на чистоту реактивов, а поэтому при пользовании одними и теми же реактивами контрольное титрование можно производить только один раз; при получении новой партии реактивов, контрольное титрование следует повторить.

4) В коническую колбу на 150 мл отмеривают пипеткой Мора 25 мл прозрачного центрифугата или фильтрата, полученного до осаждения восстановленного глютатиона сульфатом кадмия (что равно 2,5 г первоначальной навески), добавляют 25 мл дистиллированной воды и поступают аналогично пробе 3.

В этом случае, как и в предыдущем, ставят контрольный опыт на чистоту реактивов, 0,001 н. раствор KIOS готовят перед определением из заранее приготовленного 0,005 н.

KIO3 стойкого при хранении. 50 мл 0,005 н. раствора KIO смешивают с 22,8 мл 1 м раствора сульфосалициловой кислоты и доводят дистиллированной водой в мерной колбе на

250 мл до метки.

0,005 н. раствор К10з готовят путем растворения 0,1783 r KIO3 в дистиллированной воде в мерной колбе емкостью на 1 л и доводят водой до метки.

Формула расчета; Х=А — Б. где: Х вЂ” количество восстановленного глютатиона, в мг %, А — суммарное количество высокореакционных, легкоокисляющихся

SH-групп до осаждения сульфатом кадмия, в условном пересчете на восстановленный глютатион, вмг, Б — остаточное количество легкоокисляющихся SH-групп после осаждения сульфатом кадмия в условном пересчете на восстановленный глютатион, в мг %.

А и Б вычисляют по отдельным формулам, где А= (г — г ) ° 12,28; Б= (в — в ) ° 12,28;

r — количество мл 0,001 í. KI03, пошедшее на титрование пробы 4;

ri — количество мл 0,001 н. К10з, пошедшее ,на титрование контроля для пробы 4;

Зо в — количество мл 0,001 н. К10з, пошедшее на титрование пробы 3; в — количество мл 0,001 í. KIO3, пошедшее на титрование контроля для пробы 3;

12,28 — коэффициент пересчета на восстановленный глютатион.

В процессе определения высокореакционные, легкоокисляющиеся SH-группы мгновенно вступают во взаимодействие с ничтожно малыми количествами йода, не превышающими 6 мкг, то есть 6.10а г. По окончании реакции незначительный избыток йода тотчас же обнаруживается индикатором. Другие редуцирующие вещества, кроме указанных

SH-соединений, то есть редуцирующие сахара, альдегиды и тому подобные в описанных условиях в реакцию не вступают.

Биологическим активатором (катализатором) считается вещество, содержащее высокореакционные легкоокисляющиеся SHгруппы в суммарном пересчете на восстановленный глютатион от 100 до 600 мг и выше и восстановленный глютатион от 50 до

300 мг % и выше.

Каталитически активное вещество вводят в подлежащую активированию массу или в производственную смесь из расчета содержания в них 0,2 мг восстановленного глютатиона при условном пересчете сульфгидрильных групп на последний.

Способ определения сульфгидрильных соединений в содержащих их продуктах путем отбора пробы исходного продукта и введения в нее реактива, отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса и возможности определения водорастворимых, легкоокисляющихся сульф гидр ильи ых соединений типа восстановленного глютатиона, на пробу воздействует 1М раствором сульфосалициловой кислоты, выдерживают раствор, фильтруют, в фильтрат добавляют 5 -ный раствор сульфата кадмия и 1 н. раствор едкого натрия, затем центрифугируют, а в полученном центрифугате определяют легкоокисляющиеся сульфгидрильные соединения 4 -ным раствором сульфосалициловой кислоты и 50 -ным раствором иодистого калия с последующим расчетом этих соединений.