Питательная среда для выращивания продуцентов литических ферментов

Питательная среда для выращивания продуцентов литических ферментов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОП ИКАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

1iiI 4395l2

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Зависимое от авт. свидетельства— (22) Заявлено 01.11.72 (21) 1842571/28-13 с присоединением заявки №вЂ” (32) Приоритет—

Опубликовано 74. Бюллетень № 30

Дата опубликования описания 17.06.75. (51) М,кл. С 12d 13, 10

Государственный комитет

Совета Министров СССР па делам изобретений и открытии (53) УДК 577.15.08 (088.8) (72) Авторы изобретения

С. А. Самцевич, Б. Х. Шкляр и Л. А. Шукан

Отдел микробиологии АН Белорусской ССР (71) Заявитель

I 1,1 (54) ПИТАТЕЛЪНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЪ|РАЩИВАНИЯ

ПРОДУЦЕНТОВ ЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ

Изобретение относится к микробиологической промышленности, точнее к питательным средам для выращивания продуцентов литических ферментов, Известна питательная среда для выращивания продуцентов лнтических ферментов, например Actinomyces cinel osus, содержащая, %:

Автолизат дрожжей 10

Сернокнслый магний 1

Двузамещенный фосфорнокислый калий 5

Азотнокислый натрий 1

Набор аминокислот 5.

С целью повыше пня активности продуцируемых ферментов в предлагаемую пптательную среду дополнительно введены соевая мука, пекарские дрожжи и хлористый аммоний, при этом компоненты среды содержатся в следующем соотношении, вес. %:

Соевая мука 1

Пекарские дрожжи 0,25

Двузамещенный фосфор нокисльш калий 0,25

Хлористый аммоний 0,06

Сернокислый магний 0,01

Дрожжевой автолизат 0,01

Вода Остальное

Готовят питательную среду следующим образомм.

В водопроводную воду вносят следующие компоненты, %:

Соевую муку 1

Пекарские дрожжи 0.25

Двузамещенный фосфорнокпслый калий 0,25

Хлористый аммонпй 0,06

Сернокислый магний 0,01

Дрожжевой автолпзат 0,01

После чего полученную питательную среду стерилизуют, засевают актиномицетом Actin myces cinегоsus и выращив ают глубинных способом при 28 — 30 С в течение 30 — 42 час на круговой качалке со скоростью 200 об/мин.

15 Если культивирование проводят в 1 л-ферментерах, то питательную среду аэрпруют шестью-семью объемами воздуха на 1 объем питательной среды. После культивирования мицелий отделяют центрифугпрованпем пр:I

20 3000 об/мин.

Литические ферменты культура IbHoll жидкости вызывают при принятых по методике специфических условиях 60 — 65% ;1113пс кормовых дрожжей Candida прп использован1н:

25 разведенной в 3 раза культуральной жидкости.

Для определения литпческой активности используют следующую методику, К 1 мл суспе нзии дрожжей прибавляют

Зо 1 мл трис-буфера (0,067 М, рН 7.01 и 2 мл

439512 культуральной жидкости или ферментного раствора. Исходную оптическую плотность реакционной смеси доводят до экстинкции

0,7 — 0,8 и определяют ее изменение на ФЭК-56 при 536 мм в кювете с расстоянием между стенками 1 мм после ннкубации при 40 С в течепис 1 час. Лктпвность лптических ферментов

1 !

Лизируемые дрожжи

Особенности методики определения лптической активности

%,;»ra»ca

Пролуцент

10 мл культуральной жидкости + 1 мл суспензий дрожжей, t — 2 час КЖ без разведения

5 мл КЖ + 0,2 мл суспензии дрожжей; t — 3 час, КЖ без разведения

Candida

uti 1 i s

Candida abhicans

StreptoInyces

20

Я1гер1о»1уеея

1 мл фермента+ 2 мл субстрата, t — 1 час. КЖ без разведения

NicroInonospora

ЛЯ

50 — 60

Разведение КгК в 3 раза

Actinomyccs

cinегоsus Зи

Разведение hHi в 3 раза

60 — 65

Предмет изобретения

Питательная среда для выращивания продуцентов литических ферментов, например

ActinoInyces ciner0sus, содержащая автолизат 35 дрожжей, сернокислый магний, двузамеще нный фосфорнокислый калий, отличающаяся тем, что, с целью повышения активности продуцируемых ферментов, в нее дополнительно введены соевая мука, пекарские дрожжи и хло- 40

Составитель M. Ларина

Редактор В. Блохина Техред Е. Борисова

Коррегктор И. Позняковская

Заказ 1553 Изд. № 1039 Тираж 456 ПОд писнпе

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открьний

Москва. гК-35, Раушская наб., д. 4/5

Обл. тип. Костромского управления издательств, полиграфии и книжной торговли ннтактные ацетон или терморазрушенные клетки

Candida

utilis СЕСТ 1061

Candida

scotti

Candida

utilis выражают в процентах онижения оптической плотности (ОД) по формуле:

Од ОДнлч — ОДнои y 100

ОДнач

Ниже приведена таблица активности литических ферментов по "íèæåíèþ оптической плотности суспенэии дрожжей турбидиметрическим методом. ристый аммоний, при этом компоненты среды содержатся в следующем соотношении, вес. О я:

Соевая мука 1

Пекарские дрожжи 0,25

Двузамещенный фосфорнокислый калий 0,25

Хлористый аммоний 0,06

Сернокислый магний 0,01

Дрожжевой автолизат 0,01

Вода Остальное