Способ получения литических ферментов
Патент 439514
Авторы
Классы МПК
Способ получения литических ферментов
Иллюстрации
Реферат
Оll ИСАН ИЕ
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
i 4395I4
Союз Советских
Социалистических
Республик (61) Зависимое от авт. свидетельства— (22) Заявлено 01.11.72 (21) 1842570/28-13 с присоединением заявки Xo— (32) Приоритет—
Опубликовано 15.08,74. Бюллетень № 30
Дата опубликования описания 07.04.75: (51) М.Кл. С 12d 13/10
Гасударствеииый комитет
Совета Министров СССР па делам изооретеиий и открытий (53) УДК 577.15.08 (088.8) (72) Авторы изобретения
С. А. Самцевич, Б. Х. Шкляр и Л. А. Шукан
Отдел микробиологии АН Белорусской ССР (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ
Изобретение относится к микробиологической промышленности, точнее к способу получения литических ферментов, используемых в пищевой промышленности, медицине, сельском хозяйстве.
Известен способ получения литических ферментов путем культивирования Actinomyces на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли.
С целью увеличения активности литических ферментов по предлагаемому способу культивирование осуществляют Actinomyces, относящихся к виду cinегоsus. При этом из Actinomyces, cinегоsus. используют штамм За.
Предлагаемый штамм Actinomyces cinегоsus шт. 3 а. выделен в 1971 г. из торфяноболотной почвы, Выделение провод на среде CP-1 (г/л) с дрожжами рода
Candida в качестве единственного источника углерода при рН 7,0 и при 28 — 30 С. Выделенную культуру подвергают многократной очистке путем рассева на среде CP-1, хранят выделенный штамм на среде CP-1.
Штамм имеет следующую характеристику.
Морфология.
Воздушный мицелий беловато-серый, Культура бесцветная, в среду пигмент не выделяет. Спороносцы спиральные, растянутые
2 с 3 — 5 завитками. Споры овальные с гладкой поверхностью.
Культуральные и физиологические свойства.
Среды CP-1, Чапека, на картофеле — рост хороший, воздушный мицелий беловато-серый.
На крахмал-аммиачном агаре рост хороший, воздушный мицелий беловато-серый. Келатипу разжижает быстро, молоко пентонизирует, на клетчатке растет умеренно, нитратов не восстанавливает, крахмал гидролизует умеренно.
Ассимилирует глюкозу, маннозу, сахарозу, галактозу, крахмал. Не усваивает арабинозу, мальтозу, фруктозу, инозит, лактозу, рамнозу, 5 мапнит, цитрат натрия, ацетат натрия.
На предлагаемой питательной среде следу1ощего состава, /о:
Соевая мука 1
Пекарские дрожжи 0,25
NH4С1 0,06
КеНРО4 0,25
Мазо, 0,01
Дрожжевой автолизат 0,01 образует литические ферменты, лизирующие кормовые дрожжи Candida utilis на 60 — 65 /О при разведении культуральной жидкости в 3 раза.
Способ осуществляют следующим образом.
В водопроводную воду вносят следующие зо компоненты, /о:
439514
Составитель М. Ларина
Техред E. Борисова Корректор Т. Добровольская
Редактор В. Блохина
Заказ 7522 Изд. № 1917 Тираж 456 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
МОТ, Загорский цех
Соевую муку 1
Пекарские дрожжи 0,25
Двузамещенный фо сфор нокислый калий 0,25
Хлористый аммоний 0,06
Сернокислый магний 0,01
Дрожжевой автолизат 0,01.
Полученную питательную среду стерилизуют и в качестве посевного материала используют четырехсуточную культуру Actinomyces
cinегоsus штамм За, выращенную на агаризованной среде CP-1, г/л:
СаСОз 0,7
KNO3 0,7
Мазо, 0,35
NaC1 0,35
FeSO4 Следы
Агар 18,00
Культивирование антиномицета ведут глубинным способом при 28 — 30 С в течение
30 — 42 час. При этом среда аэрируется 6 — 7-ю объемами воздуха на 1 объем питательной среды. После культивирования мицелий отделяют центрифугированием при 3000 об/мин.
Литическую активность ферментов определяют следующим образом.
К 1 мл суспензии дрожжей прибавляют
1 мл трис-буфера 0,067 М при рН 7,0 и 2 мл культуральной жидкости или ферментного раствора. Исходную оптическую плотность реакционной смеси доводят до экстинции 0,7 — 0,8 и определяют ее изменение на ФЭК-56, при
i. =- 537 мм в кювете с расстоянием между стенками 1 мм после инкубации при 40 С в течение 1 час.
Активность литических ферментов выража1от в процентах снижения оптической плотности (ОД) по формуле:
ОД Oa „,„— ОД, ОД нач
l5
Предмет изобретения
1. Способ получения литических ферментов путем культивирования Actinomyces на пи2р тательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли, отличающийся тем, что, с целью увеличения активности ферментов, культивирование осуществляют
Actinomyces, относящихся к виду с1пегозпз.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что из Atinomyces cinегоsus используют штамм
За.