Способ получения 11-дезацетокси-вортманнина

Способ получения 11-дезацетокси-вортманнина

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

||439994

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К ПАТЕНТУ

Со|оз Советских

Социалистических

Республик (61) 5ависимып от патента (22) Заявлено 12.05.70 (21) 1437524/

1647954/31-16 (32) Приоритет 14.05.69 (31) 7349/69 (51) М.Кл. С 12d 9/04 йсударственный комитет

Совете министров СССР аа делам изооретений и открытий (33) Швейцария

Опубликовано 15.08.74. Бюллетень ¹ 30 (53) УДК 615.779.932 (088.8) Дата опубликован; я описания 05.03.75

Иностранец (72) Автор (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 11-ДЕЗАЦЕТОКСИ-ВОРТМАН Н И НА

Изобретение относится к области медицины, к,производству антибиотиков.

Способ получения предложенного препарата в патентной литературе не описан.

11-дезатокси-вортм аннин обладает высоким фунтпстатическпм действием против разл ичных возбудителей, грибковых заболеваний гуманнопатогенными грибами илп грибами, представляющими собой паразиты растен|ий.

Кроме того, 11-дезацетокси-вортманнин обладает действием против отеков и воспалений, как вт|дно из опыта отека Каррагена, из опыта кистозного гранулома Каррагена и из опыта кистозного гранулома СМС на бодрствующей крысе.

Предложен способ получения 11-дезацего»кси-вортманнина, заключающийся в том, что культуру Penicillium funiculosum Thorn М)хК1

3363 илп Aspergillus janus Raper u Thorn

ККК1 3807 выращивают,в аэробных условиях на среде, содержащей источники углерода, азота п минеральные соли, а также микроэлементы при 18 — 27 С в течение 3 — 10 дней и из фильтрата культуральной жидкости выделяют и очищают целевой продукт известны м и приемами.

Штао|о| S 3196 Реnicillium funiculosum Thorn выделен пз пробы почвы. взятой Кларскбург, Мэрилэнд (США). Указанный штамм растет на агаре солода и дрожжей пои 18 — 27 С и образует густой зеленый мицелий с желтыми кондиеносцами, субстрат окрашен в зеленожелтый цвет.

Штамм S 8033/F Aspergillus janus, выделен из пробы почвы, взятой,в республике Центральной Африки. Указа нный штамм растет на агаре, глюкозы-экстракта дрожжей-экстракт солода-пептона при 18 — 33 С (предпочтительно выращивать прн 18 — 27 С). На

10 этой среде мицелий,рыхлый, субтрат и обратная сторона колонии имеют желтоватый цвет.

Предложенные штаммы выращивают на различных питательных средах, содержащих в качестве источников углерода глюкозу, 15 крахмал, декстрин, лактозу, тростниковый сахар и т. д., в качестве источников азота: органические и неорга нические азотосодержащие соединения, такие как пептон, экстракты дрожжей и мяса, сульфат аммония, нитрат

20 аммония, аминокислоты и т. д., а также минсральные соли и микроэлементы.

Для получения 11-дезацетокси-вортманнина жидкую питательную среду засевают споровой суспензией одним из предложенных

25 штаммов.

Если берут штамм Penicillium funiculosum

Thorn, то инкубируют культуру в течение

5 — 10 дней при 27 С, в случае применения штамма Aspergillus janus Raper u Thorn инзо кубацию,проводят в течение 3 — 4 дней пр:|

439994

С. Щенева

Составитель

Редактор Н. Ногаи

Техред Е. Борисова Корректор Т. Добровольская

Заказ 118 Изд Ао 1950 Тираж 456 Подписное

Ц1-1ИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, гК-35, Раушская наб., д. 4/5

Обл. гип. Костромского управления издательств, полиграфии и книжной торговли

18 С. Выращивание может происходить при аэробных условиях в поверхностной культуре или в жидкой среде прои взбалтывании,или в ферментерах с пропусканием воздуха или кислорода с перемешиванием.

Как только:произведено максимальное количество антибиотика, фильтруют и антибиотик получают эк"трактивным или адсорбтивным методами известным образом из фильтрата.

Лучший выход получен при экстракц ии фильтрата сложным уксусным эфиром, однако можно применять другие органические,pacTворители, такие как бензол, хлороформ, бутилацетат, метилен-хлорид или бутанол. После этого освобождают экстракты от растворителя, напр имер дистилляцией, и остаток очищают для изолирования а нтибиотика xipoMoтографнческим путем на адсорбирующих веществах, таких как глинозем, силикагель, силикат магния и т. п., или посредством,противоточного распределения.

Пр и мер 1. Ферментер со 150 л питательной среды, содержащей на 1 л деминерализованной. воды 20 r церелозы,,2 г экстракта солода, 2 г экстракта дрожжей, 2 r КН2РО4, 2 г NgSO4.7Н20, засевают споровой суспензией штамма МКК1 3363 Penicillium funiculosum Thorn и .инкубируют при продувании воздуха (15 л/мин) и перемешиван ия 100 об/мин в течение 112 час при 27 С. Культуральную жидкость фильтруют и фильтрат экст рагируют двумя порциями сложного уксусного эфира по 100 л. Органическую фазу промываю1г один раз 60 л воды и сгущают в вакууме до 5 л. Концентрат сушат над безводным сульфатом магния и испаряют. Затем осадок подвергают противоточному распределению iB системе петролейный эфир и метанол-вода (9:1). Метанольную фазу концентрируют и после этого экстрагируют трижды сложным уксусным эфиром. Растворы сложного уксусного эфира промывают один раз водой, сушат над безводным сульфатом магния и испаряют. Экстракт хроматографируют на 50-кратном количестве силикагеля. Хлороформом-метанолом (99:1) элюируют 11-дезацетокси5

30 вортманнин, который после двухкратной перекристаллизации из метиленхлорида эфира плавится при 178 †1 С.

Пр им е р 2. Ферментер с 30 л питательной среды, 1которая имеет состав, описанный а примере 1, засевают 3 л предварительно выращенной на жидкой среде, содержащей дополнительно 2 г пентона на 1 л воды, культуры штамма ХКК1 3807 Aspergillus janus

Raper u Thorn и инкубируют при продувании (6 — 24 л;воздуха/мин) и перемешивании (150 об/мин) в течение 90 час при 18 С. Культуральную жидкость фильтруют и фильтрат экстрагируют д важды по 20 л сложного уксусного эфира. Органическую фазу промывают один раз!2 л воды и концентрируют в вакууме до 1 л.

Концентрат сушат над безводным сульфатом магния .и испаряют. Затем осадок подвергают противоточному распределению в системе петролейный эфир и метанол-вода (9:1), Метанольную фазу концентрируют и после этого экстрагируют трижды сложным уксусным эфиром. Растворы сложного уксусного эфира промывают один раз в одной, сушат над безводным сульфатом магния и испа|ряют. Эксгракт хроматографируют,на 50-кратном количестве силикагеля. Хлороформ-метанолом (99:1) элюируют 11-дезацетокси-вортманнин, который после двухкратной перекристаллизации из метиленхлорида-эфира пла,внтся п ри i178 — 180 С.

Предмет изобретения

1. Способ получения 11-дезацетокси-вортманнина, отличающийся тем, что культуру

Penicillium funiculosum Thorn МКК1 3363 или

Aspergillus janus Raper» Thorn NRRL 3807 выращивают в аэробных условиях на среде, содержащей источники углерода, азота, минеральные соли, а также микроэлементы и из фильтрата культуральной жидкости выделяют,и очищают целевой продукт известными прием а ми.

2. Способ по и. 1, отличагощийся тем, что выращивание осуществляют при 18 — 27 С в течение 3 — 10 дней.