Способ получения диосгенина

Способ получения диосгенина

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

О П И С А Н И..Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВКДЕТЕЛЬСТВУ 1 11 440404

Союз Советскик

Социалистических

Республик (61) Зависимое от авт. свидетельства (22) Заявлено 02.01.73 (21) 1865021/31-16 с присоединением заявки М (32) Приоритет

Опубликовано 25,08.74. Бюллетень Ме 31

Дата опубликования описания 25.09.75

Государственный комитет

Совета Министров СССР

ll0 делам изобретений и открытий (53) УДК 576.8.093.1 (088.8) (72) Авторы изобретения

P. Г. Бутенко, С. И. Демченко, С. Л. Каранова, И. А. Рапопорт и 3. Б. Ш,амина (71) Заявитель

Институт химической физики АН СССР (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ДИОСГЕНИНА ты и добавляют растворы солей и витаминов, так, чтобы в 1 л среды содержалось (в мг):

NH4NOg 1650

К1 1Оз 1900

СаС1> 2НзО 440

MgSO4 ° 7НзО 370

КН2Р04 170

НзВОз 6,2

MnSO4 ° 4Н20 22,3

ZnSO4 7НзО 8,6

KI 0,83 мг

Na MoO4 2НзО 0,25

Сп$04 5НзО 0,025

СоСlз 6НзО 0,025

FeSO4 7НзО 27,8

Na ЭДТА 37,3 (натриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты)

Фолиевая кислота 0,5

Рибофлавин (Вз) 0,5

Биотин 1,0

Са. пантотенат 1,0

Пиридоксин (Вв) 1,0

Тиамин (В1) 1,0

Амид никотиновой кислоты 2

В з 0,00015

15

25

После 1-часовой экспозиции воздействия му30 тагена ткань отмывают на матерчатом фильИзобретение относится к области химикофармацевтической промышленности.

Известен способ получения диосгенина, заключающийся в культивировании клеток, культуры ткани Dioscorea deltoidea Wall in vitro с последующим выделением целевого продукта.

Целью изобретения является интенсификация процесса.

Поставленная цель достигается тем, что ткань предварительно обрабатывают N-нитрозометилмочевиной в концентрации 0,25—

30 мМ.

При обработке мутагеном в концентрациях

0,25 — 2 мМ используют всю обработанную ткань, обладающую равномерным ускоренным ростом, вследствие индуцированной мутагеном стимуляции, а при обработке мутагеном в концентрациях 2 мМ и выше отбирают мутантные штаммы с ускоренным темпом роста и увеличенным накоплением биомассы.

П р имер. 2, 5 г ткани Dioscorea ое1тоЫеа

Wall суспендируют в 50 мл жидкой среды Мурасиге-Скуга и стерильно добавляют раствор

N-нитрозометилмочевины, чтобы конечная концентрация составляла 0,5 мМ.

Среду Мурасиге-Скуга готовят следующим образом.

На 1 л среды берут 9 г агар-агара, 30 г сахарозы, 40 мг 2,4-дихлорфенилуксусной кисло(51) М. Кл, С 12d 13/08

С 121с 9/00

С 07с 173!00

440404

Составитель С. Щенева

Техред Е. Борисова

Корректор Е. Рогайлина

Редактор Д, Пинчук

Заказ 2223/5 Изд. № 575 Тираж 456 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, К-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

3 тре 5-кратной сменой свежего питательного раствора, высаживают .по 250 мг в,пробирки на агаризованную среду Мурасиге-Скуга, выращивают 8 недель в термостате .при 25 С, 70 /о влажности и определяют сырой .вес ткани. Он составляет 140% по отношению к контролю,,при этом наблюдают равномерный рост ткани и ее большую диссоциированность по сравнению с контролем. При пассировании эффект стимуляции сохраняется и усиливается.

Так к IV пассажу сырой вес ткани превышает вес исходного контроля в 1,5 — 5 раз. При этом максимального .прироста ткань достигает за более короткий срок. Кроме того, увеличение биомассы ткани не сопровождается снижением концентрации действующего продукта в ней.

Усиления оводненности ткани в вариантах

4 опыта не наблюдают, т. е. увеличенный вдвое выход сырой ткани с одной пробирки сопровождается также удвоением «урожая» воздушно-сухого сырья, Следовательно, если в

5 100 г воздушно-сухого сырья содержится 340г диосгенина, то соответственно 200 г воздушно-сухого сырья содержит 680 мг диосгенина.

Предмет изобретения

Способ получения диосгенина путем культивирования изолированной ткани DloscOI де11оЫеа Wall и последующего выделения целевого продукта, отличающийся тем, что, 15 с целью интенсификации процесса, ткань предварительно обрабатывают,N-нитрозометилмочевиной в концентрации О, 25 — 30 мМ.