Штамм 15157а-продуцент п-дифенолоксидазы

Штамм 15157а-продуцент п-дифенолоксидазы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (п1 440405

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Зависимое от авт. свидетельства (22) Заявлено 04.08.72 (21) 1818924/28-13 с присоединением заявки М

ГасУларственный номитет (32) Приоритет

Совета Министров СССР л ла„изоб вта„и» Опубликовано 25.08.74. Бюллетень М 31 (51) М. Кл. С 12с1 13/00

С 12k 3/00 (53) УДК 577.151.08 (088.8) и открытий Дата опубликования описания 29.09.75 (72) Автор изобретения

О. Н. Антропова (71) Заявитель

Украинский научно-исследовательский институт целлюлознобумажной промышленности (54) ШТАММ МИСОК RACEMOSUÁ 15157a—

ПРОДУЦЕНТ и-ДИФЕНОЛОКСИДАЗЫ

Изобретение относится к микробиологической промышленности и касается получения нового штамма, используемого для получения фермента Il-дифенолоксидазы.

Предлагаемый штамм может быть использован также при очистке сточных вод от лигнина и его производных, для получения мономеров лигнина, например ванилиновой, и-оксибензойной, протокотеховой, сиреневой и других,кислот и мономеров.

Известен штамм Mucor racemosus 15157.

Данный штамм получен из штамма Mucor

racemosus 15157 путем адаптации его к лигнину и имеет следующую характеристику.

Морфология.

На жидкой лигнинсодержащей среде мицелий формируется пленкой. Гифы светло-желтой окраски. Спорангиеносцы изогнутые, высота свыше 50 мм, толщина 26 — 28 мк. Спорангии 70 — 85 мк в диаметре, темно-бурые. Споры имеют утолщенную оболочку, образуются на пленке, желтого цвета, шаровидной формы, шиповатые. Ризоиды коричневого цвета. На твердой суслоагаровой среде мицелий одноклеточный без перегородок. Колонии белого цвета.

Биохимические свойства.

Гидролизует сульфатный лигнин осины до ароматических веществ (п-оксикоричной, п-оксибензойной, ванилиновой, протокатеховой, гомопротокатеховой, сиреневой и феруловой кислот ацетованилона и ванилина).

Примером получения лигнинразрушающего фермента и-дифенолоксидазы при поверхност5 ном способе культивирования,продуцента микромицета Mucor racemosus 15157a.

С 5-суточной культуры Мисок racemosus

15157а, выращенной на сусло-агаре, произво10 дят смыв спор стерильной водопроводной водой. Полученной споровой суспензией засевают матрацы на 1 л, содержащие по 200 — 500 мл лигнинсодержащей среды. Матрацы термостатируют при температуре 27+2 С в течение

15 8 — 10 суток. Ферментный .препарат получают отделением мицелил гриба от культуральной жидкости на фильтре. Концентрируют фильтрат на вакуум-сушильной установке (или вакуум-сушильном шкафу) до 1/10 первоначаль20 ного объема. B сконцентрированной культуральной жидкости определяют активность и-дифенолоксидаза по окислению а-нафтола калориметрически на ФЗК-56М.

Активность определяют следующим обра25 зом.

К 1 мл культивированного фильтрата прибавляют 0,5 мл 0,1 М раствора а-нафтола, 2,5.мл ацетатного буфера; рН 5,0. Через 30 мин колориметрируют. Расчет содержания фермсн30 та производят по формуле:

440405

Составитель М. Ларина

Техред Е. Борисова

Корректор E. Рогайлина

Редактор А. Бер

Заказ 2698/9 Изд. № 575 Тираж 506 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

Ех

Сх — о

Ео где C — искомая концентрация окисленного фенола и соответственно активность, мг/мл;

Е.,— оптическая плотность исследуемого раствора;

Ео — оптическая плотность используемого фенола;

Со — концентрация используемого субстрата, выраженная в мг/мл.

Активность п-дифенолоксидазы, продуцируемой Mucor racemosus 15157а — 0,02-0,0б мг/мл культуральной жидкости, Предмет изобретения

Штамм Mucor racemosus 15157a — продуцент Il-дифенолоксидазы.

Морфология.

На жидкой лигнинсодержащей среде мицелий формируется пленкой, гифы светло-желтой окраски. Спорангиеносцы изогнутые высотой

5 свыше 50 мм и толщиною 26 — 28 мк. Спорангии 70 — 85 мк в диаметре, темно-бурые. Споры образуются на пленке желтого цвета шаровидной формы, шиповатые ризоиды коричневого цвета.

10 На твердой сусло-огаровой среде мицелий одноклеточный без перегородок. Колонии белого цвета.

Биохимические свойства.

Гидролизует сульфатный лигнин осины до

15 ароматических веществ (п-оксикоричной, п-оксибензойной, ванилиновой, протокатеховой, гомопротокатеховой, сиреневой и феруловой кислот, ацетованилона, ванилина).