Способ получения вещества эпи-

Способ получения вещества эпи-

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

()440899

Союз Советских

Социалистических

Реслублив

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Зависимое от а вт. свидетельства— (22) Заявлено 27.02.73 (21) 1889164/28-13 (51) М. Кл. C12d 13,08

С 07с 169/32 с присоединением заявки №вЂ” (32) Приоритет—

Опубликовано 25.07,75. Бюллетень ¹ 27

Дата опубликования описания 17.05.76

Государственный комитет

Совета Министров СССР ло делам изобретений и открытий (53) УДК 663.18 (088.8) (72) Авторы изобретения

А. Д. Ковешников, М. А. Романчук, Л. В. Соколова, 3. В. Калинкина, Л. И. Ионисьян, 3. А, Ярославцева и В. Н. Васильев (71) Зая(в(и гель

Всесоюзный научно-исследовательский химикофармацевтический институт им. Серго Орджоникидзе (54) СПОСОБ ПОЛУЧ

Изобретение относится к микробиологической промышленности.

Известен способ получения вещества

ЭПИ-F путем трансформации ацетата вещества «S» Рейхштейна с помощью штамма

Thiegemella hyalospora в культуральной жидкости.

При известном способе стероид предварительно растворяют в ацетоне, метаноле, этаноле или другом растворителе и в таком виде вносят в культуральную жидкость для его дальнейшей трансформации.

Однако для такого способа характерна низкая концентрация исходного стероида в культуральной жидкости. Увеличению концентрации стероида препятствует наличие в культуральной жидкости токсичных для микроорганизма растворителей, вносимых со стероидом.

С целью повышения эффективности процесса и увеличения исходной концентрации ацетата вещества «S» Рейхштейна предложено это вещество вводить в культуральную жидкость в виде суспензии в диметилсульфоксиде (ДМСО). Суспензия представляет собой частицы ацетата вещества «S» Рейхштейна в диметилсульфоксиде размером преимущественно 3 — 20 мкм.

Механическое измельчение стероида можно проводить в присутствии ДМСО с помощью

ЕНИЯ ВЕЩЕСТВА ЭПИ-F любого известного способа: в фарфоровой ступке, с использованием шаровой мельницы для дезинтегратора. При этом получаются кристаллы величиной 3 — 20 мкм, которые доступ5 ны для ферментных систем микроорганизма.

Пример. Культуру гиба Thiegemella

hyalospora выращивают в течение 22 час в

400 мл среды в колбах с объемом 2 л при

28 С в среде следующего состава, %: куку.

10 рузный экстракт 5,0 (по сухому весу); сусло пивное неохмеленное 1,0 (сахара по шкале

Беллинга — 14 ); сахар-рафинад 1,0; рН среды 6,0.

В качестве инокулята используют споро15 вую суспензию T. hyalospora.

Засеянные колбы (3 колбы по 400 мл среды) инкубируют на круговой качалке (220 об/ мин) до получения 7 — 8 г/л биомассы (в пересчете на абсолютно сухой вес мицелия). хо После этого культуральную жидкость стерильно переносят в лабораторный ферментер и разводят в 3,5 — 4 раза питательной средой

СС-3 следующего состава, %: К2НРО, 1,0;

Мд$04 1 0 CuSO4 0 001 Zn$04 0 001.

Общий объем культуральной жидкости и среды СС-3 составляет 5 л.

Инкубацию в лабораторном ферментере продолжают до получения биомассы 3 — 4 г/л, после чего вносят стероид, который готовят следующим образом: к 7,5 г ацетата вещест440899

Составитель Л, Минеева

Редактор А. Бер

Техред 3. Таранеико

Корректор И. Симкина

Заказ 235/461 Изд. № 9I8 Тираж 529 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, Ж-35, Раушскан наб., д. 4/5

Тнп. Харьк. фил. пред. «Патент» ва «S» Рейхштейна добавляют 12,5 мл ДМСО, 50 г NaCI и 50 мл дистиллированной |воды.

Смесь тщательно растирают в фарфоровой ступке и образовавшуюся пастообразную массу вносят в,культуральную жидкость для трансформации.

Одновременно со стероидом вносят 25 г сахара-рафинада в виде 50 /о-ного стерильного раствора.

Дальнейшую трансформацию проводят в тех же условиях (рН, температура), как указано выше, при расходе воздуха 0,2 л в 1 мин на I л культуральной жидкости.

Окончание трансформации стероида определяют с помощью хроматографии в тонком слое.

Выделение стероида после окончания трансформации проводят на ионообменной смоле известным способом. Получают 6,75 г продукта, удовлетворяющего техническим требованиям (выход 76,2 /о от теоретического).

5 Предмет изобретения

1. Способ получения вещества ЭПИ-F путем трансформации ацетата вещества «S»

Рейхштейна с помощью штамма Thiegemella

1О hyalospora в культуральной жидкости, отличающийся тем, что, с целью повышения эффективности процесса и увеличения выхода готового продукта, перед трансформацией ацетат вещества «S» Рейхштейна измельчают в присутствии диметилсульфоксида и в культуральную жидкость вводят в виде полученной суспензии.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что измельчение осуществляют до размеров частиц, преимущественно 20 — 30 мкм.