Способ приготовления питательной среды для выращивания продуцентов ферментов

Способ приготовления питательной среды для выращивания продуцентов ферментов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Зависимое от авт. свидетельства— (22) Заявлено 15.09. 72 (21)I829I59/28-3 с присоедииеиием заявки/в ( (51) M Кл.

С Х2 с1 I3/IQ г

I (32) Г1риоритет— ! (Опубликоваио95,Og, 74 юллетеиь,1;ъ ЗЗ ,Дата олубликоваиия оттисаиия23.Й:74

Гасударственный комитет

Совета Мнннстров СССР оо делам нзобретеннй н отнрытнй (5З) Уй1 577. 15.08 (088.8) (2) Авторы E.A. ВЕЛИЧКО, К.А, ÊÀÄÓÍßÊÖ, П. ф, I p H И,А. БРУНС

" ретеии" П А СТАНКЕВИЧ Т П КУЗНЕЦОВА и Н А СщЕНОВА

ВСЕСОКБНЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИМИ ИНСТИТУТ

БИОСИНТЕЗА БЕЛКОВЫХ ВЕЩЕСТВ (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЧ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ

ДИ ИРАЦБАБИ ПРОДУЦЕНТОВ ФЕРМЕНТОВ

Изобретение относится к микробиологичеекой промышленности, точнее к способу приготовления йитательной среды для выращивания продуцентов ферментов. 5

Известен способ приготовления питательной среды для выращивания продуцентов ферментов, например

Asper д1.Ииь аьатттот i — продуцентов пектолитических ферментов, пре- 10 досматривающий получение экстракта свекловичного жома, вытяжки солодовых ростков, автолизата мицелияпродуцента с йоследующим смешиванием этих компонентов с минераль- 15 ными солями

Однако известный способ приго товления питательной среды не обес печивает достаточно высокий биосинте ферментов и не возволяет пол- о ностью использовать отходы микробиологического производства.

Предлагаемый способ позволяет интенсифицировать процесс биосинтеза, увеличить выход ферментов, 5

2 комплексно использовать о ходы про= изводства, сократить расходы питьевой воды и уменьшить загрязнения окружающей среды отходами микробиологического производства.

Это достигается тем, что в среду дополнительно вводят концентрат культуральной жидкости выращиваемого продуцента, полученного после выделения из него ферментов, содержащий IÎQ-160 г/л сухих веществ.

При этом концентрат культуральной жидкости целесообразно вводить в количестве ХОЯ от объема питатедной среды.

Концентрат культуральной жидкости вводят в среду при получении экстракта свекловичного жома, при приготовлении вытяжки солодовых ростков, а также при получении автолизата мицелия .

Предлагаемый способ заключается в следующем.

Концентрат культуральной жидкости (К1Б) получают после отделения Н2205

3 органического растворителя из жидкой фазы смеси, оставшейся после выеления пектолйтических ферментов. осле отделения органического растворителя на регенерационных колоннах получают концентрированный раствор углеводов, в основном, в виде моно=, ди= и тригалактуроновых кислот; аминокислот-лейцин, фенилаланин, валин, метионин, тйрозин, глицин, глютаминовая кислота, треонин, серйн, лизин и гистидин, а также небольшое количество минеральных солей, которые в процессе регенерации переходят в нерастворимые.

Для отделения нерастворимой твердой фазы IGK фильтруют, затем стерилизуют на установке непреоывной стерилизации (УНС) при П5 С, устанавливают рН, равными 3, 2-3,8 с помощью ортофосфорной кислоты и вводят в состав питательной среды в количестве po IOg от объема.

Срок годности KKZ к употреблению

4Н час. В сдучае более продолжительного хранения необходимо хранить концентрат в стерильных условиях.

Концентрат культуральной жидкости используют на стадиях приготовления экстракта свекловичного жома, вытяжки из солодовых ростков, автолизата мицелия за счет сокращения количества воды или вводят в состав питательной среды за счет сокращения количества экстракта свекловичного жома.

Экстракт свекловичного жома получают путем температурного и ферментативного гидролиза водной суспензии свекловичного жома, используя ККЫ на стадии приготовления суспензии с последующей фильтрацией и прессованием твердой фазы.

Вытяжку из солоцовых ростков готовят в виде IO;" суспензии путем выдерживания в течение 4 час при

37оС при использовании в качестве экстрагирующего агента ККЫ с последующей фильтрацией и прессованием твердоф фазы.

Автолизат мицелия готовят в виде I0/ суспензии мицелия грибапродуцента, полученного от предыдущеи ферментации путем выдерживания в течение 4 час при 37оС при использовании в качестве экстрагирующего агента KICi" с последующей фильтрацией и прессованием.

В дальнейшем способ поясняется примером.

П Р Й М Е Р. В высушенный и мелко размолотый мицелий грибапродуцента, полученный от предыдущего

1 культивирования в количестве 10 кг заливают IOO л KHZ с РН 3 5, перемешивают, нагревают до 40оС и выдерживают 4 час при посточнном пе . ремешивании. Ьатем суспензию фильтруют и прессуют для отделения фазы. К полученному таким образом автолизату мицелия (4/) добавляют вытяжку из солодовых ростков (IOfo) °

1о экстракт свекловичного жома(85,Х5 ) соли — сульфат аммония (0,7/), калий фосфорнокислый (О,Ig), магний сернокислый (0,05/) перемешивают, устанавливают рН 4,0, стерилизуют на установке непрерывной стерилизации и загружают в стерильный ферментер. Посев производят спорами

А ре удача awamori I6 в количестве 50 г íà I мз питательной среды с содержанием спор I 2xIO . на 1 r питательной среды, добавляют пеногаситель марки АС-50 в количестве 0,0I/ от объема питательной среды.

25 Культивирование проводят при

30оС в условиях аэрации при подаче ? мз стерильного воздуха на

I мз питательной среды в 1 мин., давлении 0,6 ати и скорости вразо щения мешалки 300 об/мин. Время культивирования 52 час. Культуральную жидкость отделяют от биомассы на автоматическом камерном фильтр-прессе. Пектолитическая акTNBH0cTE> культуральной K EGQTH

92 ед/мл (интерферометрический метод определения активности).

1РЩЕЕТ ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Способ приготовления nu-Tàòåëüíîé среды для выращивания продуцентов ферментов, например

А ape hagi(tus nwamor — продуцентов пектолитических фермен4" тов, предусматривающий получение экстракта свекловичного жома, вытяжки солодовых ростков, автолизата мицелия-продуцента с последую щим смешиванием этих компонентов

5о с минеральными солями, о т л и— ч а ю шийся тем, что, с целью интенсификации процесса бйосинтеза продуцируемых ферментов и использования отходов производства, в среду дополнительно вводят концентрат культуральной жидкости выращиваемого продуцента, полученного после выделения из него ферментов, содержащий 100-I60 г/л сухих веществ.

2. Способ по п.I, о т л и— ч а ю шийся тем, что концентрат культуральной жйцкости вводят

442205 Составитель М 1!аРИНа

В. Смирягиня

Редактор Техред 1.ДВорин2.3 а к аз 1

Изд. 1й 5О5 Тираж М !1одиисиое

lIl!l!111!l1 Государственного комитета Совета Министров СССР ио делам изобретений и открытий

Москва, 113035, 1заушская иаб., 4

1!р дириятис <1!атеит», Москва, Г.59, Бережковская иаб., 24

5 в количестве IOj. От объемэ питательной среды.

3. Способ rro nn.I-2, о т л ич 8 ю шийся тем, что концентрат культуральной жйдкости вводят ь в среду при получении экстракта свекловичного жома.

4. Способ по пп.I и 2, о тл и ч а ю шийся тем, что кон, 6 центрат культуральной жидкости вводят в среду при приготовлении вытяжки солодовых ростков»

5. Способпопп. l и2, о тл и ч а ю шийся «тем, что концентрат культуральной жидкости вводят при получении автолизата ми-. целия.