Система растворителей для разделения желчных кислот

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

>i) 44590 9

ОП ИСАН И Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Зависимое от авт. свидетельства (22) Заявлено 12.07.73 (21) 1952184/31-16 с присоединением заявки ¹ (32) Приоритет

Опубликовано 05,10.74. Бюллетень ¹ 3?

Дата опубликования описания 04.03.75 (51) М. Кл. G Oln 33/16

С 07с 167/42

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 612.357.15 (088.8) (72) Авторы изобретения

А. Ф. Блюгер, А. Б. Райцис и В. А. Макня

Рижский медицинский институт (71) Заявитель (54) СИСТЕМА РАСТВОРИТЕЛЕЙ ДЛЯ РАЗДЕЛЕНИЯ

ЖЕЛЧНЫХ КИСЛОТ

Изобретение относится к области медицины.

Известная система растворителей для разделения желчных кислот методом тонкослойной хроматографии, содержащая 2,2,4-триметилпентан, диизопропиловый эфир, уксусную кислоту, изопропиловый спирт (2: 1: 1: 1), недостаточно эффективна.

Цель изобретения — повышение эффективности, ускорение и упрощение разделения— достигается тем, что в систему, кроме указанных компонентов, вводят этиленхлорид и воду и компоненты берут в соотношении 2: 1: 1:

:1:1:0,26.

Хроматографию проводят на стеклянных пластинах, покрытых слоем силикагеля марки ЛС5/ЧО мкм толщиной 0,25 мм, которые высушивают на воздухе в течение суток при комнатной температуре. На высушенную пластину наносят 0,01 мл желчи или кишечного содержимого или 0,05 мл спиртового экстракта желчных кислот, выделенных из сыворотки крови. Рядом с опытными образцами наносят

0,02 мл смеси стандартов желчных кислот (ТХ, ТХДХ, ТДХ, ТЛХ, ГХ, ГХДХ, ГДХ, Х, ГЛХ, ХДХ, ЛХ, ДХ) в концентрации 1 мг/мл.

Разделение проводят методом восходящей хроматографии в течение 12 — 14 час в пренлагаемой системе растворителей. После разделения пластину высушивают на воздухе, а

s затем экспонируют в парах йода до появления пятен или опрыскивают раствором хлористого марганца. В первом случае участки пятен силикагеля снимают с пластины и используют для количественного определения желч10 ных кислот методом спектрофотометрии или спектрофлуорометрии. Во втором случае пятна желчных кислот имеют разную окраску и хорошо различаются между собой по цвету.

Пример. При разделении 0,02 мл смеси

15 стандартов желчных кислот (TX, ТХДХ, ТДХ, ТЛХ, ГХ; ГХДХ, ГДХ, Х, ГЛХ, ХДХ, ДХ, ЛХ) в концентрации 1 мг/мл на хроматограмме обнаруживают 11 пятен. Разделяются все желчные кислоты, за исключением ТДХ и

20 ТХДХ, которые отделяются от других кислот, но не разделяются между собой.

При разделении экстракта желчных кислот, выделенных из сыворотки крови различных больных, получают различное число пятен, 2s идентификация которых приведена в таблице.

445909

Количество пятен на хроматограмме

Идентифицированные желчные кислоты

Заболевание

ТХ, ТХДХ+ТДХ, ГХ, ГХДХ, ГДХ, Х, ХДХ, ДХ

Подпеченочная желтуха (рак поджелудочной железы) ТХ, ТХДХ, ТЛХ, ГХ, ГХДХ, ГЛХ

ТХ, ТХДХ+ТДХ, ГХ, ГХДХ, ГДХ

Биллиарный цирроз

Болезнь Боткина

Составитель С, Малютина

Редактор Т. Шарганова Техред В. Рыбакова

Корректор Т. Гревцова

Заказ 428/8 Изд. Ке 306 Тираж 674 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4, 5

Типография, пр. Сапунова, 2

При разделении желчных кислот желчи, полученной от здорового человека, обнаруживают 5 пятен, идентифицированных как ТХ, ТХДХ + ТДХ. ГХ, ГХДХ, ГДХ.

Предмет изобретения

Система растворителей для разделения желчных кислот, содержащая 2,2,4-триметилпентан, диизопропиловьш эфир, уксусную кислоту и изопропиловый спирт, о т л и ч а ю щ ая с я тем, что, с целью повышения эффективности, ускорения и упрощения разделения, си5 стема содержит, кроме указанных компонентов, этиленхлорид и воду при соотношении между компонентами 2: 1: 1: 1: 1: 0,26.