Система растворителей для разделения желчных кислот
Иллюстрации
Показать всеРеферат
>i) 44590 9
ОП ИСАН И Е
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советских
Социалистических
Республик (61) Зависимое от авт. свидетельства (22) Заявлено 12.07.73 (21) 1952184/31-16 с присоединением заявки ¹ (32) Приоритет
Опубликовано 05,10.74. Бюллетень ¹ 3?
Дата опубликования описания 04.03.75 (51) М. Кл. G Oln 33/16
С 07с 167/42
Государственный комитет
Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 612.357.15 (088.8) (72) Авторы изобретения
А. Ф. Блюгер, А. Б. Райцис и В. А. Макня
Рижский медицинский институт (71) Заявитель (54) СИСТЕМА РАСТВОРИТЕЛЕЙ ДЛЯ РАЗДЕЛЕНИЯ
ЖЕЛЧНЫХ КИСЛОТ
Изобретение относится к области медицины.
Известная система растворителей для разделения желчных кислот методом тонкослойной хроматографии, содержащая 2,2,4-триметилпентан, диизопропиловый эфир, уксусную кислоту, изопропиловый спирт (2: 1: 1: 1), недостаточно эффективна.
Цель изобретения — повышение эффективности, ускорение и упрощение разделения— достигается тем, что в систему, кроме указанных компонентов, вводят этиленхлорид и воду и компоненты берут в соотношении 2: 1: 1:
:1:1:0,26.
Хроматографию проводят на стеклянных пластинах, покрытых слоем силикагеля марки ЛС5/ЧО мкм толщиной 0,25 мм, которые высушивают на воздухе в течение суток при комнатной температуре. На высушенную пластину наносят 0,01 мл желчи или кишечного содержимого или 0,05 мл спиртового экстракта желчных кислот, выделенных из сыворотки крови. Рядом с опытными образцами наносят
0,02 мл смеси стандартов желчных кислот (ТХ, ТХДХ, ТДХ, ТЛХ, ГХ, ГХДХ, ГДХ, Х, ГЛХ, ХДХ, ЛХ, ДХ) в концентрации 1 мг/мл.
Разделение проводят методом восходящей хроматографии в течение 12 — 14 час в пренлагаемой системе растворителей. После разделения пластину высушивают на воздухе, а
s затем экспонируют в парах йода до появления пятен или опрыскивают раствором хлористого марганца. В первом случае участки пятен силикагеля снимают с пластины и используют для количественного определения желч10 ных кислот методом спектрофотометрии или спектрофлуорометрии. Во втором случае пятна желчных кислот имеют разную окраску и хорошо различаются между собой по цвету.
Пример. При разделении 0,02 мл смеси
15 стандартов желчных кислот (TX, ТХДХ, ТДХ, ТЛХ, ГХ; ГХДХ, ГДХ, Х, ГЛХ, ХДХ, ДХ, ЛХ) в концентрации 1 мг/мл на хроматограмме обнаруживают 11 пятен. Разделяются все желчные кислоты, за исключением ТДХ и
20 ТХДХ, которые отделяются от других кислот, но не разделяются между собой.
При разделении экстракта желчных кислот, выделенных из сыворотки крови различных больных, получают различное число пятен, 2s идентификация которых приведена в таблице.
445909
Количество пятен на хроматограмме
Идентифицированные желчные кислоты
Заболевание
ТХ, ТХДХ+ТДХ, ГХ, ГХДХ, ГДХ, Х, ХДХ, ДХ
Подпеченочная желтуха (рак поджелудочной железы) ТХ, ТХДХ, ТЛХ, ГХ, ГХДХ, ГЛХ
ТХ, ТХДХ+ТДХ, ГХ, ГХДХ, ГДХ
Биллиарный цирроз
Болезнь Боткина
Составитель С, Малютина
Редактор Т. Шарганова Техред В. Рыбакова
Корректор Т. Гревцова
Заказ 428/8 Изд. Ке 306 Тираж 674 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4, 5
Типография, пр. Сапунова, 2
При разделении желчных кислот желчи, полученной от здорового человека, обнаруживают 5 пятен, идентифицированных как ТХ, ТХДХ + ТДХ. ГХ, ГХДХ, ГДХ.
Предмет изобретения
Система растворителей для разделения желчных кислот, содержащая 2,2,4-триметилпентан, диизопропиловьш эфир, уксусную кислоту и изопропиловый спирт, о т л и ч а ю щ ая с я тем, что, с целью повышения эффективности, ускорения и упрощения разделения, си5 стема содержит, кроме указанных компонентов, этиленхлорид и воду при соотношении между компонентами 2: 1: 1: 1: 1: 0,26.