Способ получения лимфоцитозстимулирующего вещества

Способ получения лимфоцитозстимулирующего вещества

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

— еаза (it) 459227

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Зависимое от авт. свидетельства (22() Заявлено 18.10.72 (21) 1838355 31-16 с присоединением заявки № (32) Приоритет

Опубликовано 05.02.75. Бюллетень № 5

Дата опубликования описания 12.03.75 (5Ц М. Кл. А 61 17/00

Государственный комитет

Совета Миннстрое СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 615.45:615.361. .438 (088.8) (72) Авторы изобретения

И. А. Безвершенко, М. Г. Бойко, P Г. Лукашова и В. А. Малыжев

Киевский научно-исследовательский институт эндокринологии и обмена веществ (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИМФОЦИТОЗСТИМУЛИРУЮЩЕГО

ВЕЩЕСТВА

Изобретение относится к производству лекарственных препаратов.

Известен способ получения лимфоцитозстимулирующего вещества путем гомогенизации тимуса, ультрацентрифугирования, добавления ацетона, гельхроматографии, лиофилизации.

Однако указанный способ имеет сложную технологию производства и не обеспечивает высокого качества целевого продукта.

Для упрощения технологии и повышения качества продукта по предлагаемому способу гомогенат диализуют с последующей хроматографией диализата на анионите, например, Дауэксе 1+1 в летучем буфере, например аммиачно-ацетатном, в интервале рН 10 — 3.

Пример, Навеску тимуса тщательно из.мельчают с помощью электрической мясорубки,и заливают тремя объемами 0,15М NaCI, Гомогенат помещают в целлофановые трубки, применяемые в,мясомолочной промышленности, и укладывают в стеклянную или эмалированную металлическую посуду. При этом объем гомогената лимитируется только наличием целлофановых трубок и объемом посуды. Концы целлофановых трубок важи мают любым зажимом или завязывают. Пространство между трубками заливают 1,5 объемами

2 (по отношению к тимусу) 0,3 М NaCI. Диалив при 4 С длится 1 — 2 суток. При этом лимфоцитозстимулирующее вещество тимуса переходит в раствор.

5 Из 0,3 М раствора NaCI осаждают лимфоцитозстимулирующий фактор 10-,кратным объемам охлажденного ацетона. Осадок, содержащий лимфоцитозстимулирующий фактор, собирают на бумажном фильтре. Для более

1о полной очистки диализат (0,3 М раствор

NaCl), в котором содержится лимфоцитозстимулирующий фактор, разводят 0,05 М аммиачно-ацетатным буфером рН 9 (1: 1) и сорбируют анионитом Дауэкс 1)(1 в ацетатной

15 форме (двойной объем диализата по отношению к набухшему Дауэкс в ацетатной форме, уравновешенному 0,1 М аммиачно-ацетатным буфером). Сорбция длится 6 — 12 час. После сор бции жидкость отсасывают на воронке.

2О Промывают Дауэкс буфером рН 9 (трехкратным объемом), после чего Дауэкс заливают тем же буфером при рН 3 (объем элюирующего буфера 1: 1 по отношению к набухшему

Дауэкс 1;(1) и элюируют 6 — 12 час,при поме25 шивании. Элюат отсасывают на воронке, лиофилизируют и промывают ацетоном. С помощью электрофореза в полиакриламидном

459227

Предмет изобретения

Составитель С. Щенева

Редактор Т. Караиова Техред А. Камышникова Корректор Т. Хворова

Заказ 566/7 Изд. № 336 Тираж 559 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 геле выявляется одна основная и две слабовыраженные фракции.

Лимфоцитозстимулирующая актиBHOcTb препарата выражается в увеличении абсолютного количества л имфоцитов в периферической крови и увеличении веса селезенки. В,культуре клеток селезе нии под влиянием препарата происходит интенсивное бластообразование.

Препарат также усиливает иммунологичеокую реактивность л имфоцитов, что выражается в усилении реакции бластообразования в смешанной культуре клеток селезенками.

Способ получения лимфоцитозстимулирующего, вещества путем гомогенизации тимуса, 5 осаждения, очистки, л иофилизации, о т л и ч ающ ийся тем, что, с целью упрощения технологии и повышения качества целевого продукта, гомогенат диализуют с последующей хроматографией диализата на анионите, на10 премер Дауэксе 1)(1 в летучем буфере, например аммиачно-ацетатном, в интервале рН

10 — 3.