Способ получения антигенных препаратов из культур бактерий кишечной группы

Способ получения антигенных препаратов из культур бактерий кишечной группы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ п 46О 749

Сс оз Советских

Социалистических

Реслублик (61) Зависимое от авт, свидетельства (22) Заявлено 02.03,72 (21) 1754898/31-16 (51) М. Кл. С 12k 5/00 с присоединением заявки №

Гасударственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (32) Приоритет

Опубликовано 25.06,75. Бюллетень № 23

Дата опубликования описания 14.10.75 (53) УДК 615.372 (088.8) (72) Авторы изобретения

Н. И. Шапиро, T. Г. Васильева, И. В. Москвичева, М. И. Дудкина и 3. М. Круглихина

Ленинградский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток (71) Заявитель

:ЗГтТБ (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИГЕННЫХ ПРЕПАРАТО

ИЗ КУЛЬТУР БАКТЕРИЙ КИШЕЧНОЙ ГРУППЫ

Изобретение относится к медицинской промышленности, а именно к производству вакцинных препаратов.

Известен способ получения антигенных препаратов из культур бактерий кишечной группы путем выращивания культуры, извлечения антигенов при обработке культуры трипсином с последующим центрифугированием, диализом и лиофилизацией.

Однако известный способ не обеспечивает высокой иммуногенности препарата.

С целью повышения иммуногенности препарата процесс стерилизации культур и экстракции антигенов осуществляют при последовательном воздействии перекисью водорода и формалином в сублетальных конструкциях.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.

Обработке подвергают взвеси живых культур вакцинных штаммов возбудителей, выращенные в производственных условиях в реакторах при активной аэрации среды. Используют культуры 10 — 16 часового роста с густотой в 40 — 80 млрд/мл.

После завершения вырашивания культуру перекачивают из реактора для культивирования в аналогичный стерильный реактор с мешалкой, замеряют объем взвеси и охлаждают ее до 20 С.

Во взвесь вводят Н20 — перегидроль до конечной концентрации в 0,15 — 0,25 /с и перемешивают мешалкой, реактор герметизируют.

Инкубацию ведут в течение 8 — 12 час при

20 С и периодическом перемешивании. Концентрацию и срок воздействия перекисью определяют в зависимости от исходной густоты культуры.

В конце инкубации берут выемку для определения густоты взвеси по оптическому стандарту и чистоты по микроскопии мазка.

Через 8 — 12 час после внесения расчетной дозы Н О2 в реактор дополнительно вводят формалин и перемешивают мешалкой.

Концентрация формалина для брюшнотифозных культур должна 6ягь равна 0,1, температура 20 С. Через 1 час контакта с формалином производят контрольный посев на мясопептонный бульон и тиогликолевую среду. В паратифозные В культуры формалин вводят до концентрации в 0,2%, температуру взвеси поднимают до 37 С, контрольный посев производят через 5 час, После отбора выемок для посева взвесь в реакторе охлаждают до

8 — 12 С. Контрольные посевы должны быть стерильными.

Дальнейшие операции по -ыделению анти30 генных экстрактов из полученных стерильных

460749

Предмет изобретения

Составитель С. Малютина

Редактор H. Хлудова Техред 3. Тараненко Корректор Н. Аук

Заказ 2329)2 Изд. № 825 Тираж 529 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, K-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 экстрактов не отличаются от принятых в тсхлогии производства триптических антигенов: а) отделение жидкой фазы стерильной взвеси на суперцентрифуге; б) осаждение антигенных компонентов из центрифугата этанолом; в) диализ растворенного осадка против водопроводной воды; г) лиофильное высушивание диализата (получение сухих антигенных препаратов).

Способ получения антигенных препаратов из культур бактерий кишечной группы путем выращивания культуры, экстракции антигенов, центрифугирования и лиофилизации, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения иммуногенности препарата, процесс стерилизации культур и экстракции антигенов осуще10 ствляют при последовательном воздействии перекисью водорода и формалином в сублетальных концентрациях.