Способ определения биологической активности веществ
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Вс со к з
)латеи- . -, лй на
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (») 46П20
Сон)а Советских
Сациалистичевких
Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 30.10.72 (21) 1843422/31-16 (51) М. Кл. С 1Ж 1,, 00 с присоединением заявки №
Государственный комитет
Совета Министров СССР (23) Приоритет
Опубликовано 25.02.75. Бюллетень № 7
Дата опубликования описания 09.07.75 (53) УДК 578.087.1 (088.8) ло делам изобретений и открытий (72) Авторы изобретения (71) Заявитель
В. И. Богданова и М. Г. Гайдамака
Харьковский научно-исследовательский институт микробиологии, вакцин и сывороток (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКОЙ
АКТИВНОСТИ ВЕЩЕСТВ
Изобретение относится к области медицины, а именно к токсикологии.
Известен способ определения биологической активности различных соединений с использованием в качестве модели куриных эмбрионов.
Цель изобретения — повышение чувствительности.
Для этого определяют изменение веса эмбриона и его внутренних органов через 5—
6 дней после введения исследуемого вещества, Способ определения биологической активности веществ осуществляют следующим образом.
Берут исследуемый препарат и готовят 10или 100-кратные (от цельного до 10 — либо
10 — ) разведения в стерильной дистиллированной воде либо стерильным физиологическом растворе (0,85%-ном растворе хлористого натрия) рН 7,0 — 7,2.
В опыт берут куриные яйца с эмбрионами в возрасте 8 — 9 суток, предварительно промытые теплой водой с мылом и протертые этиловым 96 спиртом в области воздушной камеры. Помещают их в обычные картонные шта тивы для яиц в вертикальном положении, воздушной камерой вверх. Буравчиком делают точечное отверстие, через которое иглой со шприцем вводят на глубину 0,2 — 0,5 см одно из разведений препарата в объеме 0,2 мл с последующей заливкой отверстия расплавленным парафином. Каждым разведением препарата инъецируют не менее 3 — 5 эмбрионов.
Контролем служат 2 группы эмбрионов по
5 — 10 штук в каждой.
5 После того как исследуемые растворы препарата введены в воздушную камеру куриного яйца и запарафинировано входное отверстие, помещают их со штативом на 5 — 6 суток в условия увлажненной, периодически вентили10 руемой камеры термостата при температуре
37 С.
По мере достижения 14-суточного возраста куриных эмбрионов подопытные и контрольные группы яиц вскрывают общепринятым методом и извлекают пинцетом эмбрион, который взвешивают, и вычисляют средний вес эмбриона (в граммах) по группам. Одновременно учитывают выживаемость эмбрионов, их подвижность и степень развития (в
2р процентах) .
Затем у извлеченных эмбрионов разрезают вдоль брюшную стенку и грудную клетку, извлекают печень и сердце, также по группам, взвешивают и высчитывают средний их вес
25 (в мг). Затем полученные в подопытных группах данные сравнивают с данными контрольной группы (интактные эмбрионы) .
Средний вес 14-суточного эмбриона, его печени и сердца в контроле принимают за
30 100%. Для подопытных групп (по разведе461:120
Составитель С. Малютина
Техред О. Гуменюк
Корректор t. Гревцова
Редактор О. Стенина
Заказ 894/4 Изд. % 386 Тираж 529 Подписное
ЦНИИПИ Государс|сснного кеми;ета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Типография, пр. Сапунова, 2
3 ниям препарата) делают пересчет в процентах.
Учет и стандартизацию стимулирующей активности препарата ведут по 3 дозам: большие — цельный препарат и разведение 10 —, средние — разведения от 10- до 10- и малые — разведения от 10-4 до 10- и выше. К высокоактивным препаратам относят вещестэа, повышающие средний вес эмбриона более чем на 20%, к средней степени стимулирующей активности относят вещества, повышающие
4 вес эмбриона на 5 — 20%, и слабоактивным— менее 5фз.
Предмет изобретения
5 Способ определения биологической активности веществ на модели развивающегося куриного эмбриона, отл и ч а ющийся тем, что, с целью повышения чувствительности, определяют изменение веса эмбриона и его внутрен1о них органов через 5 — 6 дней после введения исследуемого вещества.