Способ выделения пиридоксаль-5-фосфата

Способ выделения пиридоксаль-5-фосфата

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

(и 463673

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Реслчолик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 02.07.73 (21) 1944360/23-4 с присоединением заявки № (23) Приоритет

Опубликовано 15.03.75. Бюллетень № 10

Дата опубликования описания 26.09.75 (51) N. Кл. С 07d 51/50

Государственный комитет

Совета Министров СССР ио делам изооретений и открытий (53) УДК 547.963.32 (088,.8) (72) Авторы изобретения

Н. Л. Яковлева, М. В. Балякина и В. И. Гунар

Всесоюзный научно-исследовательский витаминный институт (71) Заявитель (54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ПИРИДОКСАЛЬ-5 -ФОСФАТА

Изобретение относится к способу выделения пиридоксаль-5 -фосфата из разбавленных водных растворов.

Пиридоксаль-5 -фосфат (ПЛФ) является важным кофактором ферментов обмена и аходит широкое применение в медицине, Известен способ концентрирования ПЛФ из разбавленных водных растворов, который заключается в длительном упаривании таких растворов в вакууме при температуре около

40 С. При концентрировании ухудшается качество и падает выход целевого продукта за счет разложения термолабильного и легкоокисляемого ПЛФ, велики энергозатраты.

С целью упрощения технологического процесса, увеличения выхода и улучшения качества целевого продукта предлагается способ выделения пиридоксаль-5 -фосфата, заключающийся в известной процедуре сорбирования ПЛФ из разбавленных водных растворов на сильном анионите и последующей элюации

ПЛФ малым объемом разбавленной минеральной кислоты с последующим выделением целевого продукта известными методами.

Элюацию проводят с анионита кислотой, имеющей тот же ион, которым насыщен ионит, так как при этом одновременно с элюацией целевого продукта происходит регенерация анионита.

Пример 1, Водный раствор ПЛФ

2 (900,4 мл, рН 7,45, концентрация ПЛФ

0,2 мг/мл) пропускают со скоростью 100 мл/ч см через колонку (D=l,á, H=2 см) заполненную анионитом Дауэкс 1 2 в Cl-форме с

5 размером зерен 0,15 — 0,3 мм, ПЛФ элюируют 0,1 и. соляной кислотой со скоростью 20 мл/ч ° см . Получают 19,3 мл раствора с концентрацией 9,05 мг/мл. Выход

174,6 Mr (97% ), из них 56% имеют концен10 трацию 14,4 мг/мл.

После лиофилизации полученного раствора выделяют 161,0 мг (92,7%) ПЛФ, УФ-спектр:

Е 9в 6700 (0,1 н. НС1); Rf 0,33, WI, трет-бутанол - 85%-ная муравьиная кислота — вода

15 (70: 15: 15) .

Пример 2. Водный раствор ПЛФ (876 5 мл, рН 7 75, концентрация ПЛФ

0,2 мг/мл) пропускают со скоростью 100 мл/ч. .смв через колонку (D=1,á, Н=2 см), запол2о пенную анионитом АВ-17/8 в Сl-форме с размером зерен 0,3 — 1 мм.

ПЛФ элюируют 0,1 н. соляной кислотой со скоростью 20 мл/ч.см . Получают 21,3 мл раствора с концентрацией 8 мг/мл. Выход 170 мл

25 (97,5%). Выделение ПЛФ из соляпокислого раствора аналогично примеру 1.

Предмет изобретения

1. Способ выделения пиридоксаль-5 -фосфа30 та из разбавленных водных растворов, о т463673

Составитель А. Кост

Техред О. Гуменюк

Редактор E. Хорина

Корректор Л. Денискина

Заказ 2086/13 Изд. № 1250 Тираж 529 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 л и ч а ю шийся тем, что, с целью упрощения технологического процесса, увеличения выхода и улучшения качества целевого продукта, пиридоксаль-5 -фосфат сорбируют из разбавленных водных растворов на сильном анионите, а затем элюируют малым объемом разбавленной минеральной кислоты е последующим выделением целевого продукта известными методами.

2. Способ по п. отличающийся тем.

5 что для элюации применяют кислоту, содержащую тот же ион, которым насыщен ионит.