Среда для выделения вибрионов

Среда для выделения вибрионов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

6.) а: с «? ь. г-:: - т » <1 Р™ 411A ?, а

О П ИСА Н И-Е » 465IOI

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

Союз Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВг-ДЕТЕЛЬСТВУ (61) Зависимое от авт. свидетельства— (22) Заявлено 11.10.72 (21) 1835214/31-16 с присоединением заявки № (23) Приоритет—

Опубликовано 30.03.75. Бюллетень № 12

Дата опубликования описания 20.11.75 (5! ) М. Кл. С 12k 1/06

Государственный иомите1

Совета Министров СССР по делам изаеретений и открытий (53) УДК 576,8.093.33 (088.8) (72) Авторы изобретения

И, В. Домарадский, Н. Я. Шиманюк и А. Е. Либинзон (71) Заявитель

Ростовский-на-Дону государственный научно-исследовательский противочумный институт (54) СРЕДА ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ВИБРИОНОВ

Для приготовления сухой минерально-желатиновой основы навеоки всех ингредиентов (кроме желтка), растирают в ступке или шаровой мельнице и тщательно смешивают. Ы таком виде основа может храниться в про1

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано для выделения вибрионов при исследованиях на холеру.

Известна среда для выделения вибрионов, содержащая агар-агар, хлористый натрий, мясо-пептонный бульон и эмульсию яичного желтка.

Однако известная среда обладает низкой элективностью (избирательностью).

С целью повышения элективности и дифференцирующих свойств предложенная среда содержит кальция хлористого 0,1 — 0,2 г, магния сернокислого 0,1 — 0,2 г, цинка сернокислого 0,05 — 0,075 г, натрия хлористого 5,0— — 25,0 г, натрия двууглекислого 0,75 — 0,8 г, бромтимолового синего 0,04 — 0,06 г, желатины 10 0 — 11,0 r, агар-агар 9,5 — 10,5 г, эмульсию яичного желтка 20 — 30 мл, дистиллированную воду 1000 мл.

Увеличение содержания поваренной соли до 2,5% (вес./объем) в среде придает ей большую элективность и делает пригодной для выделения галофильных вибрионов

Vibrio parahaemolyticus u V. alginolyticus. хладном сухом месте при условии герметизации паковки, Перед употреблением сухую основу вновь перемешивают в"тряхиванием в таре и берут требуемую навеску из расчета 26 — 28 г на

1 л дистиллированной воды (46 — 48 r для галофильных вибрионов), Навеску суспендируют в небольшом количестве дистиллирова|шой воды и оставляют для набухания на

i0 15 — 20 мин. Затем доливают воду до нужного объема и растворяют навеску кипячением в течение 5 — 6 мин при постоянном перемешивании. Эмульсию желтка готовят ех

tempore. Свежие куриные яйца моют щеткой

15 в мыльной воде, выдерживают 5 — 10 мин в спирте и обжигают. Затем отделяют желтки от белка и добавляют к ним равный объем стерильного физиологического раствора.

Смесь встряхивают для гомогенизации (из одного желтка получается 30 — 40 мл эм\ Ihcuu).

К расплавленной и охлажденной до 50 С минерально-желатиновой основе добавляют

2 — 3 об. % эмульсии желтка, среду тщательно перемешивают и разливают по чашкам

Петри, затем подсушивают как обычно и используют для посевов.

Предлагаемая среда имеет зеленовато-голубой цвет. На ней могут расти вибрионы, вп когорые «не боятся» высокого рН и способ465101

Предмет изобретения

Составитель С. Малютина

Текред E. Подурушина

Корректор Н. Аук

Редактор Д. Пинчук.,оказ 4992 Изд. № 1417 Тираж 529 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Ми нистров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, K-35, Раушская наб., д. 4/5

МОТ, Загорский филиал ны утилизировать желток и желатину — единственные источники азота и углерода. Выросшие колонии вибрионов окрашены в желтый цвет и окружены таким же ореолом.

Ореолы, возникающие в результате расщепления микробами лецитина, — двуконтурны. Внутренний контур мутный, с металлическим блеском, наружный — прозрачный. Соотношение контуров и величина ореолов зависят от возраста культур, их варьируют от штамма к штамму. После того как среду заливают 5 — 7 мл 15 — 20 о о -ного раствора трихлоруксусной кислоты ее цвет меняется до белесовато-желтого, а на месте колоний на мутном фоне проявляются прозрачные зоны протеолиза (расщепление желатины).

Размеры зон могут быть больше, чем площадь ореолов. Для пересевов и постановки реакции агглютинации колонии снимают до обработки чашек раствором трихлоруксусной кислоты.

При посеве 200 клеток на предлагаемой среде вырастает примерно столько же колоний, сколько и на щелочном агаре Мартена— эталонной среде.

Предлагаемая среда обладает способностью подавлять рост воздушной микрофлоры, благодаря чему даже в открытых чашках

Петри она остается стерильной (по крайней мере в течение двух суток).

Электронные свойства этой среды проявляются в угнетании роста таких микробов, как Е, coli, S. typhosa, S. paratyphi А, Sh. flexneri, Proteus vulgaris, Comamonas

5 terrigena, Iersinia pseudotuberculosis, Iersinia

entегоcolitica, Staphylococcus aureus, Bacillus

s ub ti l is.

Штаммы Aегоmonas formicans на этой среде либо не растут, либо образуют очень мел1О кие колонии, расщепляющие лецитин, но не желатину. Pseudomonas aeruginosa растет в виде мелких колоний, вызывающих лишь протеолиз.

Среда для выделения вибрионов, вклю20 чающая источники углерода, азота и минеральные соли, отличаюи1аяся тем, что, с целью повышения элективности и дифференцирующих свойств, она содержит кальция хлористого 0,1 — 0,2 г, магния сернокислого

О,1 — 0,20 г, цинка сернокислого 0,05 — 0,075 г, натрия хлористого 5,0 — 25,0 r, натрия двууглекислого 0,75 — 0,8 г, бромтимолового синего 0,04 — 0,06 г, желатины 10,0 — 11,0 г, агарагара 9,5 — 10,5 г, эмульсии яичного желтка зо 20 — -30 мл, дистиллированной воды 1000 мл.