Способ поределения грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов

Способ поределения грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

О П И С А Н И Е п11 469741

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз СоветскиМ

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 12.10.73 (21) 1965632/28-13 с присоединением заявки № (23) Приоритет

Опубликовано 05.05.75. Бюллетень № 17

Дата опубликования описания 29.07.75 (51) М. Кл, С 12k 1/00

Государственный комитет

Совета й1инйстров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 576.08(088 8) (72) Авторы изобретения

В. Н. Карнаухов, Е, В. Мельникова, С. Б. Петрикевич, В. В. Теплова и В. A. Яшин

Институт биологической физики АН СССР (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГРАМПОЛО)КИТЕЛЪНЪ|Х

И ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ

Предмет изобретения

Изобретение относится к области микробиологических исследований, выделения, идентификации и разведения микророгранизмов.

Известен способ определения грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов путем обработки их красителями с последующим наблюдением с помощью микроскопа.

Микроорганизмы окрашиваются по методу

Грама.

Однако при таком методе окраски относительно длителен (около 10 мин) процесс подготовки препарата для анализа, и, кроме гого, он не может быть применен к живым, нефиксированным клеткам.

С целью ускорения определения и сохранения жизнеспособности микроорганизмов предложено последние последовательно обрабатывать водными растворами этидиум бромида (2,7-диамино-10-этил-9 - фенилфенантридиум бромида) и 8-анилинонафталено-1-сульфоната.

Водные растворы этидиум бромида целесообразно использовать в концентрации 1 . 10 — 5 мг/мл, 8-анилинонафталено-1-сульфоната в концентрации 1 10 — 4 мг/мл.

Пример. К суспензии живых микроорганизмов добавляют вначале водный раствор люминесцентного красителя этидпум бромида, затем раствор люминесцентного красителя 8анилинонафталено-1-сульфоната. Каплю суспензии окрашенных таким образом микроорганизмов наносят на предметное стекло и рассматривают с помощью люминесцентного микроскопа. При этом цвет люминесценции жи5 Bblx грамположптельных микроорганизмов— красный (окраска этидиум бромидом, 594 нм), грамотрицательных — синий (окраска 8-анилинонафталено-1-сульфонатом, Х=

490 нм). Время проведения анализа около

10 1 мин.

Предлагаемый способ определения грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов был опробован на 120 видах различных микроорганизмов и показал точное

15 соответствие результатов с паспортными данными изученных микроорганизмов.

20 1. Способ определения грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов путем обработки их красителями с последующим наблюдением с помощью микроскопа, отл ич а ю щи и с я тем, что, с целью ускорения оп25 ределения и сохранения жизнеспособности микроорганизмов, последние последовательно обрабатывают водными растворами этидиум бромида (2,7-диамино-10-этил-9-фенилфенантридиум бромида) и 8-анилинонафталено-130 сульфоната.

469747

Составитель Л. Минеева

Корректор Л, Орлова

Техред А. Камышннкова

Редактор Л. Гончарова

Заказ 1819/7 Изд. М 667 Тираж 529 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений н открытий

Москва, 7К-35, Раушская наб., д, 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что используют водные растворы этидиум бромида в концентрации 1 10 — мг/мл, а 8-анилинонафталено-1-сульфоната в концентрации

1 ° 10 — 4 мг/мл.