Способ определения активности антилимфоцитарной сыворотки

Способ определения активности антилимфоцитарной сыворотки

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

О Il И-C.- -Н И Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ!!!! 469749

Йо!оз Советских

Социалистических

Реслублик

Б АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 15.01.74 (21) 1986145/31-16 (51) М. Кл. С 12k 9/00 с присоединением заявки М

Государственный комитет

Совета Министров СССР (23) Приоритет

Опубликовано 05.05.75. Бюллетень Ме 17

Дата опубликования описания 08.08.75 (53) УДК 576.8.097(088.8) ло делам изобретений

1 и открытий (72) Авторы изобретения В. H. Новоселова, М. А. Фролова, Г. А. Курелла и Б, В. Янкелевич (71) Заявитель

Институт сердечно-сосудистой хирургии (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ

АНТИЛ ИМФОЦИТАРНОЙ СЫВОРОТКИ

Предмет изобретения

Изобретение относится к иммунологии.

Известен способ определения активности антилимфоцитарной сыворотки путем визуального подсчета погибших клеток — лимфоцитов после их соединения с исследуемой сыворот- 5 кой. Однако при таком способе возможна неточность при подсчете количества погибших лимфоцитов.

С целью повышения точности определения в реакционной смеси определяют концентрацию 10 ионов калия.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом. Приготовляют двойные разведения испытуемой антилимфоцитар ной сыворотки (АЛС) на веронал-мединаловом буфе- 15 ре в объеме 2,0 мл (до 1: 2048). К, разведениям добавляют 1,0 мл (2, 10в клеток) свежеприготовленной суспензии жизнеспособных лимфоцитов и инкубируют 30 мин. К реакционной смеси добавляют 1 мл комплемента, 20 переносят смесь в измерительные кюветы. При постоянном помешивании на магнитной»ешалке инкубируют в теченис 60 мин. Одновременно готовят необходимые контроли клеток, сыворотки и комплемента, а также один образец реакции с рсференс АЛС, разведенных! до титра. После этого в каждой кювете проводят изз!сренис электродного потенциала путем погружения калийспецифичного электрода (КСЭ) и учета показаний на шкале индикатора электрометра. По заранее составленной калибровочной кривой определяют процент погибших клеток. Одновременно определяют процент погибших клеток в контролях, вычисляют цитотокспчсскпй индекс для каждого разведения по испытуемой АЛС и определяют титр лимфоцитотоксинов.

Способ определения активности антилимфоцитарной сыворотки путем соединения исследуемого препарата с лимфоцитами, с т л и ч аи щи и ся тем, что, с целью повь|шснпя точности определения, в реакционной смеси опрсдсля!от концентрацию ионов калия,