Способ получения комплексов рибонуклеазы

Способ получения комплексов рибонуклеазы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

О П И С Д Н И Е „„4745З7

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 11.04.72 (2!) 1773700/28-13 (5!) Ч. Кл. С 07о 7,02 с присоединением заявки №

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (23) Приоритет

Опубликовано 25.06.75. Бюллетень № 23

Дата опубликования описания 14.10.75 (53) УДК 615.015.12 (088.8) (72) Лвторы изобретения P. Б. Пономарева, Н. В. Глазова, E. А. Плиско и Г. В. Самсонов

Институт молекулярных соединений AH СССР (71) Заявите пь (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПЛЕКСОВ РИБОНУКЛЕАЗЫ

Изобретение относится к медицине и касается получения полимерных физиологическиактивных веществ.

Известен способ получения комплексов рибонуклеазы, заключающийся в том, что фермент сочетают с полимерами, в том числе и водорастворимыми.

Однако такой способ не обеспечивает высокой активности рибонуклеазы.

С целью изменения активности фермента в

"торону повышения или понижения активности, фермент сочетают с полимером с молекулярным весом порядка 10 — 100 тыс. со степенью замещения меньше 1, при соотношении белок — полимер 4: 1 по весу, или с полимером с молекулярным весом порядка 100—

500 тыс. (1: 1) — (1: 4) по весу соответственно.

Способ осуществляют следующим образом.

К раствору, содержащему определенное количество бычьей панкреатической рибонуклеазы в буферном растворе (рН-5 или 6), при комнатной температуре добавляют полимер.

Раствор перемешивают до растворения.

Определяют ферментативную активность образующегося комплекса по начальной скорости расщепления дрожжевой РНК и сравнивают с активностью исходной рибонуклеазы. Выделяют комплекс лиофильной сушкой.

П р и мер 1. К 4 мл раствора рибонуклеазы концентрации 1 мг/мл в 0,08 М ацетатновероналовом буфере (рН 6) добавляют 1 мг декстрансульфата (ДС) с мол. весом 500 тыс., степень замещения 1,6.

Лктивность образующегося комплекса составляет 25% от активности исходной рибонуклеазы.

Пример 2. Условия примера 1, но добавляют 1 MI c) льфозтилцеллюлозьт (СЭЦ)

10 мол. весом 16 тыс. Буферный раствор имеет рН 5. Степень замещения (СЭЦ) 0,45.

Лктивность составляет 120% от исходной.

Пример 3. Условия примера 2, но молекулярный вес СЭЦ составляет 10 тыс. и сте15 пень замещения 0,38. Лктивность 150% от исходной.

Предмет изо бр етени я

Способ получения комплексов рибонуклеа20 зы путем сочетания фермента с водорастворимым полимером, отл il ч а ю щи и с я тем, что, с целью изменения активности фермента в сторону повышения или понижения активности, фермент сочетают с полимером с молеку25 лярным весом порядка 10 — 100 тыс. со степенью замещения меньше 1 при соотношении белок — полимер 4: 1 по весу или с полимером с молекулярным весом порядка 100-—

500 тыс. со степенью замещения больше 1, 30 при соотношении белок — полимер (1: 1)— (1:4) по весу соответственно.