Штамм 5072-продуцент спор и энтомоцидных токсинов
Патент 477190
Авторы
Штамм 5072-продуцент спор и энтомоцидных токсинов
Иллюстрации
Реферат
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
r»r 47719О
Союз Советских
Социалистических
Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 18.06,73 (21) 1934905/30-15 с присоединением заявки № (23) Приоритет
Опубликовано 15.07.75. Бюллетень № 26
Дата опубликования описания 16.10.75 (51) M. Кл. С 121с 1/00
С 126 7/00
Государственный комитет
Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 576.851.5.576. .8.97.29 (088.8) (72) Авторы изобретения Л. Т. Крушев, T. И. Машнина, В. И. Фомина и Д. А. Орехов (71) Заявитель Белорусский научно-исследовательский институт лесного хозяйства (54) ШТАММ BACILLUS TXURINGIENSIS VAR. ТН1)К!й61ЕМЯЯ
{ BERLINER) БЕЛ Н И ИЛХ 5072 — П РОДУЦЕНТ СПОР
И ЭНТОМОЦИДНЫХ ТОКСИНОВ
Изобретение относится к области микробиологического т|роизводства энтомоцидных бактерпальных препаратов для нужд защиты растений от вредных насекомых.
Известный штамм Bacillus thuringiensis var.
thuringiensis (Berliner) ИНМИ АРМ 647 не может быть использован по применяемой технологии для обычных энтомоцидных бактериальных препаратов спороэндотоксинного типа, поскольку он не образует кристаллов эндотоксина. Известный штам не устойчив к антибиотическим веществам хвои сосны.
Предлагаемый штамм Bacillus thur ingiånsis
var. thuringiensis (Berliner) ВелНЙИЛХ
5072 — продуцент спор и энтомоцидных токсинов получен методом селективного отбора по признаку устойчивости к антибиотическим веществам хвои сосны из культуры, выделенной из гусениц соснового шелкопряда; культивируется на обычных питательных средах; продуцирует эндо- и экзотоксины; способен вызывать септицемию у ряда чешуекрылых вредных насекомых.
Морфология
Вегетативные клетки палочковидной формы с округлыми концами (1,5 — 2,3;к 4,6 — 5,5 мк), подвижные, перитрихи, образуют овальные споры (1,2 — 1,5к 1,8 — 2,3 мк) ближе к одному из концов клетки. B другом конце формируетя ромбовидное включение — кристалл эндотоксина. Клетки в старых культурах образуют цепочки.
Культуральные и биохимические свойства
На МПА образуют колонии трех форм—
R, S u D. На бобовом arape колонии крупные
15 — 20 мм, матовые с лопастными краями, На агаре Чапека мелкис бесцветные колонии с зубчатыми краями. На картофеле растет в виде толстой складчатой пленки, вызывает почернение среды. На мясопептонном бульоне образует крупные хлопья, большой осадок.
Красится по Граму.
Усваивает аммонийный азот.
На средах с мальтовой, сахарозой, глицерином, маннитом и салицином образует кислоту без выделения газа.
Крахмал гидролизует.
Клетчатку не усваивает.
Молоко .пептонизирует.
20 Желатину разживает.
Лецитиназу образует слабо.
Уреазу не образует.
Индол, сероводород, ацетилметилкарбинол не образует.
25 Дает положительную реакцию с сывороткой
1-го серотипа.
Антагонистическими свойствами к другим видам энтомопатогенных бактерий не обладает.
30 Факультативный аэроб, 477190
Предмет изобретения
Составитель О. Сливкина
Редактор Н. Коган Техред 3. Тараненко Корректор Н. Учакина
Заказ 2422/11 Изд. № 1595 Тираж 529 Подписное
ЦНИИПИ Государственного, комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
Москва, 7К-35, Раушская наб., д. 4/5
Типография, пр. Сапунова, 2
Оптимум температуры 28 — 30 .
В процессе развития внутри клеток образует ромбовидные кристаллы токсина; в питательную среду выдсляст токсины, в том числе термостойкий экзотоксин, Устойчив к антибиотическим веществам сосновой хвои.
Штамм БелНИИЛХ 5072 хорошо культивируется на средах с кукурузным экстрактом и меляссой или кукурузной мукой при среднем значении рН=7,3 — 7,8.
Штамм Bacllius thuringiensis var. thuringiensis (Berliner) БелНИИЛХ 5072 — продуцент спор и энтомоцидных токсинов.
Морфолого-культуральные признаки.
Вегетативные клетки палочковидной формы с округлыми концами размером 1,5 — 2,3)(Q4,6 — 5,5 мк, подвижные, перитрихп, грамположительные. Клетки парные, в старых культурах образуют цепочки.
Споры овальные 1,2 — 1,5;к,1,8 — 2 3 мк ие превышают толщину клеток.
Прорастание спор происходит без сбрасывания оболочек.
При цитохимическом исследовании в клетках выявляются валютин и гликоген.
МПА — колонии трех типов (R-форма — оеловато-серые зернистые с изрезанными краями, $-форма — гладкие, круглые, плоские, матово-белые, D-форма — мелкие, белые).
МПБ — обильный рост, без образования пленки, образует крупные хлопья и большой осадок.
На бобовом агаре — крупные (15 — 20 мм) матовые колонии с лопастными краями.
На агаре Чапека — колонии мелкие, бесцветные с зубчатыми краями.
На картофеле растет в виде толстой складчатой пленки и вызывает почернение ломтиков картофеля.
Физиолого-биохимические свойства.
Факультативный аэроб.
10 Источники углерода: использует мальтозу, сахарозу, глицерин, магнит, салицин с образованием кислоты без выделения газа.
Источники азота: усваивает аммонийный азот.
15 Молоко пептоннзирует. ,7Келатнну разжижает.
Крахмал гидролизует.
Клетчатку не усваивает.
Протеазы, амилазы, лецитиназы — продуци20 рует.
Уреазу не образует, Индол, сероводо; од, ацетилметилкарбинол не образует.
Максимум роста при 28 — 30 С. Образует в
25 процессе развития клеток ромбовидные кристаллы.
Реакция агглютинации положительная с сывороткой 1-го серотипа.
Антагонистическими свойствами к другим
30 гидам энтомопатогенных бактерий не обладает.
Устойчив к действию антибиотических веществ сосновой хвои.
Продуцирует термостойкий токсин, активный
35 по отношению к гусеницам соснового шелкопряда.