Способ получения 21-ацетата ацетонида -фторпрегнен-4-тетрол- 11 ,16 , 17 ,21-диона-3,20

Способ получения 21-ацетата ацетонида -фторпрегнен-4-тетрол- 11 ,16 , 17 ,21-диона-3,20

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

4 » 48244

ОП ИСАНИ Е

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

Союз Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВЫДЕТЕПЬСТВУ (61) Зависимое от авт. свидетельства— (22) Заявлено 29.01.74 (21) 1991792/23-4 с присоединением заявки №вЂ” (32) Приоритет—

Опубликовано 30.08.75. Бюллетень № 32

Дата опубликования описания 04.08.76 (51) М.Кл. С 07с 169/32

С 07с 169/30 государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 547.689.6. .07 (088.8) (72) Авторы изобретения

В. М. Рыжкова, Г. А. Клубничкина, Т, И. Гусарова и Г. С. Гриненко (71.) Заявитель

Всесоюзный научно-исследовательский химико-фармацевтический институт им. Серго Орджоникидзе (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 21-АЦETATA АЦЕТОНИДА

6а-ФТОРПРЕГНЕН-4-ТЕТРОЛ-11!, 16а, 17а, 21-ДИОНА-3,20

Изобретение относится к области усовершенствования способа получения 21-ацетата ацетопида ба-фторпрегнен-4-тетрол-11р, 16а, !

7а, 21-диона-3,20, являющегося промежуточным продуктом в синтезе высокоактивных кортикостероидов.

Известен способ получения 21-ацетата ацетонида 6а-фторпрегнен-4-тетрол-llр, 16а, 17а, 21-диона-3,20, заключающийся в том, что ацетонид 6а-фторпрегнен-4-триол- 1 ба, 17а, 21--диона-3,20 подвегают микробиологическому гидроксилированию с помощью культуры

Cunninghamella blakestecana и полученный цри этом ацетонид 6а-фторпрегнен-4-тетрол11 3, 16а, 17а, 21-диона-3,20 ацетилируют по

21-положению. Используемая нагрузка исходного стероида 0,1 г/л.

Известны также способы получения ацетонида 6а-фторпрегнен-4-тетрол-11р, 16c., 17а, 21-диона-3,20 путем микробиологического 11р-гидроксилировàHHÿ ацетонида 6а-фторпрегнеп-4-триол-16а, 17а, 21диона-3,20 с помощью культур Cunninghamella bainieri u Curvularia

lunata с последующим ацетилцрованием.

Однако в этих способах или не указан выход целевого продукта, или не приведены показатели качества продукта, что не позволяет сделать определенные выводы об эффективности того или иного способа. Используемая нагрузка исходного стероида низка, в ос2 новном, 0,1 — 0,3 г/л, что ведет к повышенным расходным коэффициентам сырья. Кроме того, во всех указанных случаях использовались культуры микроорганизмов, не применя5 емые в СССР.

С целью упрощения процесса предлагают использовать отечественный штамм культуры

Absidia orchidis (Tieghemella orchidis).

Предлагаемый способ получения 21-ацетаt0 та ацетонида 6-а-фторпрегнен-4-тетрол-11Р, lба, !7а, 21-диона-3,20 заключается в том, что ацетонид ба-фторпр гиен-4-триол-1 ба, 17а, 21-диона-3,20 подвегают микробиологическому превращению с помощью отечественно-!

5 ro штамма культуры Absidia orchidis (Tieghemella orchidis) и полученный при этом ацетонид 6а-фторпрегнен-4-тетрол-11р, lба, 17а, 21-диона-3,20 ацетилируют по 21-положению.

По предлагаемому способу трансформирующую культуру выращивают на среде, содержащей углеводы, органические источники азота и соли фосфора и к выросшему мицелию добавляют 5оо-ный раствор стероида в диметплформамиде из расчета конечной концен25 трации 0,5 г/л.

Добавление стероида осуществляют дрооно таким образом, чтобы исключить выпадение стероида в кристаллической форме, что обеспечивает полноту трансформации. Время

30 подачи стероида рассчитывают на основе пред482444

Предмет изобретения

Составитель T. Илюхина

Техред T. Курилко

Корректор М. Л ейзерм ан

Редактор T. Никольская

Заказ 1095 Изд. Мз 1819 Тиране 529 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4, 5

МОТ, Загорский филиал

3 варительного изучения скрости реакции гидроксилирования и растворимости стероида в условиях проведения опыта.

Ilo окончании реакции культуральную жидкость экстрагируют не смешивающимся с водой растворителем, растворитель упаривают и образующийся ацетонид бк-фторпрегнен-4-тетрол-11р, 16к, 17к, 21-диона-3,20 ацетилируют по 21 ïoëoæåíèþ и целевой продукт выделяют.

Выход целевого продукта по предлагаемому способу составляет 75 — 80 /О.

Пример.

Культуру гриба Tieghemella orchidjs выращивают на скошенном сусло-arape в пробирках в течение 2 — 3 недель при 26 — 28 С, Споры гриба смывают с поверхности агара 5 мл физиологического раствора и споровую суспензию в количестве 1 мл вносят в 100 мл стерильной среды следующего состава:

Глюкоза, r 30

Кукурузный экстракт (сухой вес), г 5

Пептон, г 3

Дрожжевой автолизат, г 3

КН2Р04, г 5

Вода водопроводная, мл рН 6,8 — 7,2. 1000

Первый инокулят выращивания в конических колбах емкостью 0,75 л на круговой качалке при 220 об/мин при 26 — 28 С. Через сутки содержимое четырех колб (400 мл) переносят в 4 л среды того же состава, Выращивание трансформирующей культуры осуществляют в стеклянном ферментере (рабочая емкость

6 л); подача воздуха 0,5 л/л/мин, число оборотов мешалки в 1 мин 400, температура

28"С. Через сутки роста вносят первую порцию ацетонида 6к-фторпрегнен-4-триол-láo., 17к, 21-диона-3,20 в количестве 0,5 г в 100 мл диметилформамида; вторую порцию стероида

4 в количестве 1 г в 20 мл диметилформамида вносят через 5 час после первой; через 8 час после второй вносят третью порцию стероида — 0,5 r в 10 мл диметилформамида.

5 Трансформацию проводят при том же режиме, что и выращивание культуры.

Продолжительность процесса составляет

20 — 27 час и контролируется методом хроматографии на пластинках «Sjlufol». При содер1о жании исходного стероида не более 5 /о опыт заканчивают, культуральную жидкость OTфильтровывают от мицелия и экстрагируют

4 л хлористого метилена. Экстракт промывают водой, сушат безводным сульфатом натl5 рия, растворитель упаривают в вакууме. Остаток ацетилируют 7 мл уксусного ангидрида, 0,87 г ацетата бария и 15 мл уксусной кислоты. Реакционную массу оставляют на ночь при комнатной температуре, затем выливают

29 в 150 мл воды.

После перекристаллизации из хлористого метилена и метанола получают 1,68 г 21-ацетата ацетонида бк-фторпрегнен-4-тетрол-11р, lбк, 17к, 21-диона-3,20; т. кип. 267 †2 С; (n) а +132 (СНСlз); log в 4,17; Л „,„., 236—

238 мм), что мало отличается от литературных данных (т. пл. 261 — 263 С; 1к) о 1 135 (СНСlз); 1оде 4,18; Л „„, 236 — 238 мм).

Способ получения 21-ацетата ацетонида

6к-фторпрегпен-4-тетрол-11р, 16к, 17к, 21-диона-3,20 путем микробиологического превра35 щения ацетопида 6к-фторпрегнен-4-триол-lбк, 17к, 21-диона-3,20 с последующим ацетилированием, отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса, в качестве микроорганизма используют штамм культуры Absjdia огс1() hidjs