Патент 490821

Способ определения жизнеспособности грамотрицательных микроорганизмов

 

Соиза Советскик

Социалистические

Республик

О П И С А Н И Е r>i>490823

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 19.11.73 (21) 1978032/28-13 с присоединением заявки— (23) Приоритет—

Опубликовано 05.11.75. Бюллетень М 41

Дата опубликования описания 25.08.76 (51) N.. Кл. С 12k 1/ОО

Государственный иозаитет

Совета Министров СССР ло делам изобретений и открытий (53) УД1х 576.8.093. .1 (088.8) (72) Автор ы изоб>ретения

В. H. Карнаухов, Е. В. Мельникова и С. Б. Петрикевич

Институт биологической физики АН СССР (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБНОСТИ

ГРАМОТ Р И ЦАТ ЕЛ Ь НЫХ МИ КРОО Р ГАН ИЗМОВ

Пред,;åò изобретения

Изобретение относится к микробиологической промышлeííoñòè.

Известны способы определения жизнеспособности бактериальной культуры, для чего к ней добавляют раствор трифенилтетразолий

vëîðèäà, затем уксусной кислоты, извлекают толуолом образовавшиеся гранулы формазача, проводят Нх количественное определение прп помощи фотоколориметрии.

С целью, повышения эффективности способа предложено к суспензии грамотрицательных микроорганизмов добавлять водные растворы 2,7-ди-амино-10-этил-9-фенилнатридиум бромида (эт..диум бромида) и 8-анилинонафталено-1-сульфоната (ANS) и по интенсивности IIoмпнесценции;в голубой (490 нм) и красной (594 нм) областях спектра определять соотношение живых и мертвых клеток в анализируемом препарате.

Способ определения жизнеспособности грамотрицательных микроорганизмов осуществляют следующим образом.

Приготавливают 0,5 мл суспензии грамотрицательных микроорганизмов, содержащей определенную часть у-битых клеток. К этой суспензии добавляют 0,5 лтл А".1Я (1-анилинонафталено-8-сульфонат) в концентрации !

О - г/мл и 0,5 лзл этидиум бромчда 10 г!мл.

Спектр люминесценции полученной таким образом смеси регистрируют на спектрофлюориметре, н соотношение .интенсивности люминесценции .в голубой (490 нм) и краснои (594;м) областях спектра сравнивают с из,вестным соотношением живых и мертвых клеток >в исследуемом образце. Во >всех случаях измеренное соотношение интенсивностей люминесценции в голубой и красной областях соответствует (= точностью 2 — 4%) соотношению живых н мертвых клеток в анализируемом препарате. Время проведения анализа около 1 лтин.

Способ определения жизнеспособности грамотрицательных микроорганизмов путем их обработки люминесцентным красителем с

pîñëåäóþùåé оценкой люминесценции живых и мертвых клеток, отличающийся тем, что, - целью повышения эффективности способа, к суспензия грамотрицательных микроорганизмов добавляют водные растворы 2,7днаминз-10-этил-9-фенилнатридиум бромида (этидиум бромида) и 1-анилино-нафталено-8сульфоната (АМЯ) .и,по интенсивности люминесценции в голубой (490 нм) и красной (594 ня) областях спектра определяют соотношение жи".ых и мертвых клеток в анализируемом препарате.