Способ придания микроорганизмам множественной устойчивости к антибиотикам

Способ придания микроорганизмам множественной устойчивости к антибиотикам

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

495844

Посредством т я к и х l l I) C n c !1 о I3 a T e n I п е р е севов культуры штамм, lain!i«III 1олько 50—

60% скорости роста во время первого культивирования в молочной среде, в конце дает

100%-ный рост, а время отверждения молока постоянно составляет 2 — 3 дня.

Штамм «БИО-4Н» молочных бактерий, полученный этим способом, легко растет в молочной среде при культивировании в среде, основным элементом которой является обезжиренное молоко, поэтому ее легко можно превращать в порошкообразное со-тояние посредством сушки распылением.

При пероральном ежедневном введении мышам вместе с СМ лекарственного средства предлагаемого изобретения в их испражнениях бактерий в количестве, отклоняющемся от нормы, не было обнаружено, в то время, как при введении мышам только СМ количество бактерий в испражнениях заметно увеличивается. Кроме того, в том случае, когда мышей, которым вводят перорально СМ ЭМ, заражают штаммом Salmonella Enteritadis ¹ 11, их смертность доходит до 80 — 100%. Однако, если им вводить лекарственное средство, содср)кащее молочные бактерии штамма «БИО-4R», полученные по предлагаемому способу, одновременно с введением СМ и ЭМ и или перед их введением, смертность снижается прю)ерно до 50%. Иначе говоря. можно признать, ITO лекарственные средства, содержащие молочные бактерии, полученные по предлагаемому способу, обладают устойчивостью по отношению к СМ и ЭМ, задерживая ненормальное увеличение количества бактерий (явление суперинфекцпи) и обладает действием, спи)ка)о!цим инфекционные свойства Salmonella

cntcritadis. В случае Streptococcus lactis его можно обрабатывать так же, как и Streptococcus faccalis и он приобретает ту же устойчивость, что и Streptococcus faccalis.

Пр им ер 1. Штаммом Streptococcus facca1ls «БИО» привива)от среду для пластин с косым агаром (среда СаЛа), полученную, как описано выше, к которой добавляют СМ. Указанный штамм культивируют по периодическому способу в течение 72 ч при 37 С с использованием «способа с применением пластин с лекарственным косым агаром».

После культивирования проросшую колонию с наибольшей концентрацией СМ выоирают из колоний, проросших на,пластине, и указанную колонию подвергают повторному последовательному пересеву с использованием такой же среды. После проведения последовательного пересева культур 16 раз получают молочные бактерии с высокой устойчивостью по отношению к СМ.

Затем эти молочные бактерии с высокой устойчивостью к СМ подвергают последовательному 30-кратному пересеву так же, как указано выше, но с использованием среды, в которую добавляют ХМ, что приводит к получению молочных бактерий с устойчивостью против СМ и ХМ.

Получснные млло шые ояктсрпп с 3010))ч:Iвостью к СМ;! ХМ подвергаю1 посс)едо33ательному 40-кратному пepeceI33 iai;, и;ii; указано выше. но с использованием среды, ii

5 которую введен ТЦ.

Молочные бактерии, устойчивые к СМ, ХМ и ТЦ. подверга)от последовательному 16кратному пересеву так, как 3 h;132 IIo выше, ))О с использованием среды, «котору 0 «нсдап!

10 ЭМ, и Одичают молочныс оактср ш. мстойчпвые по отношению и СМ, ХМ. ТЦ и З.1I.

И н аконец мо !0 Ii! blc бактерии, устойч нвыс к СМ, ХМ, ТЦ и ЗМ, подвергают последоваTeльнОм; 20-кратном; iiepece!33 тя!, как мк215 зано выше, но с испо)ьзовс)нпе)! культуры, в которую вводят ЛЬПЦ, в резуль-:аге чзго получаю f штаммы мо Io øüë бактсi)!Ili («ЬИО4Гс»), устойчивые не только и СМ, ХМ. ТЦ.

ЗМ li тБПЦ, )!О Стойчив!.)е тя! же I кязан20 ным антиб )Отпкам и суг)ьфанп,!амида)!.

Бы:io подтверж;сепо, что степень стойчпвостп к разл;! )ным указанным лекарствам дос)пгас г предела IIJ)!i 16 — -1! -кратном НОс10доватсльном !cpa:eiic культуры в случае СМ, )5 30-- -10 кратном пер.сеi!c в ."С) чае Х.Ч, 40 50)ср 21 но)I Iicpccci)e «c! 1 Iic ГЦ, 16 1 / !рат ном псрсссве в сс)1 чае 3. )I и 20 — 30-крагном пересеве в случае ЛБПЦ.

Ш г;! м м мо)0 ))ой б» к тер )! и «ЬИО-4», устойчн!3bii много: исл:ш I»! лекарственным всщсст««;:, полученный по спо"ооу, приведенно)!) выше, зя тсм upil!3IIBaioT !3 молочнм)0 среду (примерно 15 мл). которую получают з,) прн iio;Ii!ci)III!32»нп «нес СМ в кол:I!Icc) i!c

2000 у)мг! (мкг), ХМ 15,)мл, ТЦ 10 1!3)с), ЭМ

100 у,"3)г! и ЛБГ1Ц 20 у, мл пс)сле чего выбпр i!ÎI пггамм с на)гболсе высокой отверждающей способностшо для молока, Выбранный штамм обрабатывают 10 — 15 раз по указанной методике с получение)! штамма, об1;1дающего наибольшей устойчивостью и отвержденню молока, то есть высокой способностсю к росту в мо,точной среде. Затем полу.j5 )снный IIITaмм е li тп!3пру)от !3 ci)еде. содержащей примерно 18% обезжиренного молока в Ie ;ei!I!e примерно 96 ч. После значнтсльноГО nPQP acTaii II ;i!О, in÷ïûõ 02!" TcP il!i I& ьт3 1) этик бактерий превращают l3 порошкообразное состояние путем м)ч)овснноп сушки распылением прн 70 100 С.

В полученный пора)пкоооразный препарат можно )3))одит! связующее, разноооразныс ферменты, витамины и вспомогательные вс55 шест!3 !.

Пример 2. Каждую пз культур Stl cptococcus faccalis Г 59828, Streptococcus lactis

dactobacillus cauc2siuin М. dactobacil i!is г)О acidiphilus 360 обраоатывают по методике примера 1.

Спо -oo выдслснпя устойчilaых ко мноп!м

IeK2pcTi323I мха з2нньгх штя м мо!3, их сокр ященныс обозна )синя и образць, приведены

G5 в табл)ще.

49() <)44

Способ в(!!(е)(ени5! н(т)ам)!ов, устойчивых ко мног(1)(11екарствен!3! !м вещее гнат! (и(!!«>!)О Гик<), )>)>о !ll ill (<. )< «Ре,,Y !l !(!)а

С)! X(тl (16 р(!.!) (36) р))з) (60 ра()1 5!6! II ((26 раз) ЭЛI (17 1)()3) (I!,1 " ХЛ1 (, Ч, ((1, Ф (. 1, I(ЛI, Ф;t Г:ЛI, Х ii!

1 !, Ф ХЛ1 !(..),1, «Л(,

Г!1, (С!

3 сто!l 1)! вl>)е фор)и>!

F 69878«,.lillli(0itll:(ин, друг:!е )!акрогп!5<ы

S, lactls"

ЛI, СМ

СЛI i. ХЛ! С, i, ХЛ1 СМ, ХЛ! и ЭМ анн:(о)си lllll u

С )1, ХМ, ЭМ друг.ie;liiды и ЛБ!ТЦ вен нил lllu 7((, <(е(! а. )сп )рин, пефа.(р > ие !

Молочная кислота" ! !

Streptococcus faccalis (F 59828)

Streptococcus factls ЛБ

Lactobacillus Caucasiuin Л!

I ас(оЬаcillus асЫ!р!1!1(!в 86(3 антибиотиков, ис:; было использовано ", Ilpo:(cccc пот!(

HL>ij)uII(è1itlioT 3 присутствии с!рсптомицина, хлора)!(рсниколя, тетрацпклш(а, эр (тромициiI Ll В 1>1:П. О )C11ЗИЛИСН И ЦИ. 1,1i! IIC, IIÎ!31ОРЯ51. Iij)O

l l CC C l3I>1j) ПИ Ка!)>К>Г(0! О ЯНг:.!Оиогикя 1б б)0 ряз (Р о р .,1 у г! 53 и з о б р с т с п и и

Сo«rавитель Б. Ьелясв! «, (<))< Г<)р Л. E. >le.5)!)Овы

Гехред T. Курилко

Коррек<о:) Л. Денискина

:3ак га 789,16 11зл. X 1074 Гира)к 629 1 lодпиcli )å

1(1(1!11!(И Рос) !!;)«(n«(<)<ог«1;о):!)тета Сове(а "!ii!:iicr io» СССР д«Г!)!) !!eo!)!)(1«ll;

I!6>0:.36), i!!)! каа,,К-)Ч), I ау)и«кая lie<) 6

Гii!.<>«I;!!

I! ocu clou . гсл, ного выра)цив III:-IH lie 0,(íojI к,, I> Г ) ры i! I!!) ис < TCT;31111 1)5I7(я апТ>lбиОТиков, o T I li u я 50 (ц 1;: Г(с 5! ем, ! о, с це. Il.io по;!уиеИ(5! (ÒN !i 1>I, ) С ГО(.::!111300 К ООЛЬП1С .>13

К i(, Ф Х.Л(, т(((С) ЭМ, ХМ

:1,дру . 1.<д

)1 Л611! (, 1!! (11(, (Н (К

ll«iiili!нллгн! 7К и и нефа locilopiii(1(ефа(!Ор!!д