Способ получения внеклеточной неспецифической кислой рибонуклеазы

Способ получения внеклеточной неспецифической кислой рибонуклеазы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Советских

Социалистических

Республик (11)- 497887 (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 31.07.74 (21) 2049182/28- 13 с присоединением заявки №вЂ” (23) Приоритет (43) Опубликовано 25.11,7б. Бюллетень № 43 (45) Дата опубликования описания 19.04.77 (51) Я. Кл.е

С 12D 13/10

Гасударственный хомитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК

577.15.08 (088.8) (72) Авторы изобретения

В. А. Ежов, Ю. М. Попова и Н. И. Санцевич

Институт биохимии и физиологии микроорганизмов AH СССР (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВНЕКЛЕТОЧНОЙ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ

КИСЛОЙ РИБОНУКЛЕАЗЫ

Изобретение относится к области получения ферментов, в частности внеклеточной неспецифической кислой рибонуклеазы, микробиологическим путем и может найти применение в пищевой промышленности и медицине. 5

Известен способ получения внеклеточной неспецифической кислой рибонуклеазы путем культивирования плесневого гриба Penicillium brevi — corqpactum на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли, при проведении процесса в колбах на качалке.

Однако ферментация в колбах является лабораторным способом, который не позволяет получить большое количество фермента. При этом концен- 15 трация растворенного кислорода в течение процесса ферментации не становится постоянной и оптимальной, Происходит также закисление среды, вызывающее торможение роста культуры.

С целью повышения выхода рибонуклеазы 2р предлагается осуществлять аэрацию в ферментере таким образом, чтобы концентрация растворенного в среде кислорода подцерживалась постоянно на уровне 20 — 30% от полного насьпцения, а рН среды— при значениях 3,0 — 3,2. 25

Предлагаемый способ получения внеклеточной неспецифической кислой рибонуклеазы заключается в том, что культуру Penicillium brevi — compactum выращивают в ферментере на комплексной среде при постоянной оптимальной концентрации растворенного в среде кислорода, равной 20 — 30% от полного насьпцения, начиная с 10 — 15 час роста культуры до конца процесса ферментации, и при оптимальном постоянном уровне рН, равном 3 0 — 3,2. Фермент выделяют известными способами.

Пример. В 10-литровый простерилизованный ферментер загружают 7 л стерильной комплексной среды следующего состава%: глюкоза 5,0; пелтон

1,0; соевая мука 0,5;,М5&04 7на00,5; СоС8 2йеО

0,02; (gg<) $0 0,2; пеногаситель (подсолнечное масло или кашалотовый жир) 0,07; рН среды после стерилизации 6,0. Среду засевают 700 мл вегетативного материала, выращенного на той же среде в колбах в течение 24 час. Процесс ферментации ведут при температуре 24+0,5 С в течение 75 час при непрерывном перемешивании и аэрации.

С увеличением биомассы культуры концентрация растворенного кислорода и рН начинают сни497837

Составитель П. Бонарцев

Техред М Ликович Корректор В. Куприянов

Редактор Е. Шепелева

Заказ 5572/291

Тираж 575 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4 жаться, При снижении концентрации растворенного кислорода до 25% ее стабилизируют на уровне

23.0+ 3,0% до конца процесса ферментации, регулируя число оборотов мешалки (от 400 до 560 об/мин) . рН среды стабилизируют на уровне

3,0 — 3,2,добавляя 1 н. стерильный раствор Na ОН.

Окончание процесса ферментации обычно совпадает с началом естественного повышения рН культуральной жидкости. Через 72 час ферментации получают культуральную жидкость, содержащую 62 ед/мл фермента. Жидкость отделяют от мицелия на нутчфильтрах и фермент выделяют известным способом.

Формула изобретения

Способ получения в пекле точной неспецифической кислой рибонуклеазы путем культивирования

5 плесневого гриба Pen ici I I ium brevi — compactum на питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли при аэрации, о т л и ч а ющий с я тем, что, с целью повышения выхода рибонуклеазы, аэрацию осуществляют таким обрар зом, чтобы концентрация растворенного в среде кислорода поддерживалась постоянно на уровне

20 — 30% от полного насыщения, à рН среды — при значениях 3,0 — 3,2.