Способ выделения винкристина
Патент 499778
Авторы
Классы МПК
Способ выделения винкристина
Иллюстрации
Реферат
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ (ii> 499778
Союз Советских
Социалистических
Республик
I 61) Дополнительный к патенту (51) М. Кл.2 А 61К 35/78
С 07G 5/00 (22) 3 аявлено IS12.72 (21) 1869026/28-13 (23) Приоритет (32)
< 31) (33)
Опубликовано 15.01.76, Бюллетень № 2
Государственный комитет
Совета Министров СССР (53) УДК 6)545:615.7 (088.8) по делам изобретений и открытий
Дата опубликования описания 09.04.76 (72) Авторы изобретения
Иностранцы
Каролина Йованович, Кальман Сас, Дьердь Фекете, Эмил Биттнер, Эстер Дежери и Янош Элеш (BHP) Иностранное предприятие
«РИХТЕР ГЕДЕОН ВЕДЬЕСЕТИ ДЬЯР РТ» (BHP) (71) Заявитель (54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ВИНКРИСТИНА
Изобретение относится к области медицины.
Известен способ выделения винкристина из алкалоидсульфатной смеси, полученной из
Vinca rosea 1 путем растворения в смеси хлористого метилена — хлороформа (2: 1), хроматографирования, элюирования тем же растворителем, управления. Однако известный способ дает низкий выход винкристина.
С целью повышения выхода винкристина по предлагаемому способу алкалоидсульфатную смесь предварительно обрабатывают смесью муравьиной кислоты и уксусного ангидрида с последующим подщелачиванием до рН 8,5—
9,0.
Пример 1. 3,85 r сырой алкалоидсульфатной смеси, которая получена известным способом, растворяют в смеси из 35 мл
98%-ной муравьиной кислоты и 5,75 мл уксусного ангидрида и оставляют стоять при комНВТНоН температуре в течение 5 мин. Затем раствор выливают в 160 мл воды с температурой 0 — 5 С, в нем при охлаждении с помощью также охлажденного, концентрированного водного аммиака устанавливают значение рН вЂ” 8,5 — 9,0, и раствор обраоатывают 300 мл метиленхлорида в несколько ступеней до негативной реакции на алкалоиды. Объединенную и обезвоженную метиленхлоридную фазу упаривают до сухого остатка при пониженном давлении. Получают 3,1 г песочного цвета аморфной смеси димерных алкалопдных ос5 нований, в которой первоначально имеющийся
N-десметилвинбластин в результате формилирования уже,превратился в винкристин. Смесь растворяют в этаноле и путем добавления
1%-ного этанольного раствора серной кисло10 ты выделяют сульфатную смесь димерных алкалоидов.
Кристаллическую сульфатную смесь дпмерных алкалоидов растворяют в 20 мл смеси хлороформ — метиленхлорид в соотношении
15 1: 2, и раствор хроматографируют на колонне, содержащей 250 г частично дезактивированной водой окиси алюминия, благодаря чему связываются сульфатные группы и выделяются свободные алкалоидные основания. Элюпру20 ют смесью растворителей приведенного состава, димерные алкалоиды извлекают из колонны в форме свободных оснований, Фракции отб ирают каждая по 50 мл. Первая— третья фракции содержат сопутствую25 щие алкалоиды, четвертая — девятая фракции — вибластин и возможно имеющийся винлеурозин. Винкристин появляется в девятой
499778
Составитель А. Покатилов
Техред Т, Курнлко
Корректор Е. Хмелева
Редактор В. Филиппова
Заказ 616/15 Изд. № 1076 Тираж 629 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д, 4/5
Типография, пр. Сапунова, 2 фракции, его элюация заканчивается с 18-й фракцией. Идентифицированные с помощью бумажной или соответствующей тонкослойной хроматогр афии винбластин, винлеурозин и винкристин, содержащие фракции, раздельно упаривают до сухого остатка. Содержащие аморфные димерные алкалоидные основания вещества превр ащают указанным путем в сульфат. Из четвертой — девятой фракций получают 2,0 г винбластинсульфата, из 9 — 18 фракций — 0,25 г сырого винкристинсульфата, который перекристаллизовывают из смеси метанола и этанола в соотношении 1: 4.
)а) =+11 — 12 (C=1, вода).
Ri=0,30 (появляется с живым синим цветом), Соединение идентифицируют с помощью инфракрасной опектроскопии. При 5,94 р, появляется, сравнивая с ИК-спектром винбластина, сильно выраженная полоса абсорбции.
Хроматографические исследования в тонком слое проводились с адсорбентом окиси алюминия G. Мегс1(. В качестве жидкости — носителя служил хлороформ, который содержал
0,5 метанола, проявлялся с концентрированной фосфорной кислотой, содержащей 1 церийаммонийсульфата.
П р и и е р 2. Из 3,1 г полученной, как в примере 1, песочного цвета сме си аморфных димерных алкалоидных оснований выделяют винбластин и винкристин с помощью хроматографии. Смесь алкалоидных оснований растворяют в 15 мл бензола, и раствор хроматографируют на колонне, которая содержит
150 г смоченного бензолом алюминийоксида активности Ш. Сначала элюируют с 400 мл бензола, причем отбирают 50 мл фракции. С помощью оензола извлекается большая часть
4 сопутствующих алкалоидов. Затем далее элюируют с 450 мл смеси бензол-хлороформ в соотношении 2: 1, причем извлекаются оставшиеся мономерные алкалоиды и имеющийся
5 только в небольшом количестве винлеурозин.
Путем последующего элюирования с 450 мл смеси бензол-хлороформ в соотношении 2: 1 получают винбластин. Элюируют с 1500 мл смеси бензол-хлороформ в соотношении 1: 1, 10 причем извлекается связанный с адсорбентом винкристин. Разделенные на основании бум ажной или соответствующей тонкослойной хроматографии элюаты упаривают до сухого остатка. Получаются 2,6 г аморфного ос15 нования винбластина, из которото описанным в примере 1 путем получают сульфат. Получают 2,2 г .кристаллического винбластинсульфата.
При выпаривании элюата, содержащего
20 винкристин, получают 0,32 т аморфного основания винкристина, из которого получают сульфат.
Выход 0,27 сырого винкристинсульфата.
Выход после перекристаллизации из смеси
25 метанолэтанол в соотношении 1: 4 составил
0,21 r винкристинсульфата.
Формула изобретения
Способ выделения винкристина из алкало30 идсульфатной смеси, полученной из Vinea
rosea 1 путем растворения в смеси хлористого метилена-хлороформа (2: 1), хроматографирования, элюирования тем же растворителем, упаривания, отличающийся тем, что, 35 с целью повышения выхода винкристина, алкалоидсульфатную смесь предварительно обрабатывают смесью муравьиной кислоты и уксусного ангидрида с последующим подщелачиванием до рН 8,5 — 9,0.