Способ токсикологического исследования мяса животных, вынужденно забитых при фузариотоксикозе

Способ токсикологического исследования мяса животных, вынужденно забитых при фузариотоксикозе

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ (АВТОРСКОМУ СВЙДЕТЕДЬСТШ (ti) 506395

Союз (1оветских

Социалистических

Реснублик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 10.06.74 (21) 2037779/30-15 с присоединением заявки № (23) Приоритет

Опубликовано 15.03.76..Бюллетень № 10

Дата опубликования описания 29.06.76 (51) М. Кл.2 А 61В 10/00

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 615.771.7 (088.8) (72) Авторы изобретения

Э. М. Хасанова и 1О. И. Бойков (71) Заявитель Всесоюзный научно-исследовательский институт ветеринарной санитарии (54) СПОСОБ ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ МЯСА

ЖИВОТНЫХ, ВЫНУЖДЕННО ЗАБИТЫХ

ПPИ ФУЗАРИОТОКСИКОЗЕ

Изобретение относится к животноводству.

Известен способ токсикологического исследования мяса животных, вынужденно забитых при фузариотоксикозе, основанный на скармливании изучаемого мяса крысам, щенятам, котятам или мышам в течение 14 дней. Затем па основании выявления патологоморфологических изменений, возникших в паренхиматозных органах подопытных животных, которым скармливалось изучаемое мясо в течение

14 дней, делают заключение о токсичности мяса.

С целью сокращения времени исследования по предлагаемому способу испытуемое мясо экстрагируют гомогенизированием его в фосфатно-буферном растворе, очищают и полученный экстракт вносят в различных разведениях в монослой культуры клеток паренхиматозных тканей и о степени токсичности мяса судят по тому, в каком разведении экстракт разрушает ткани.

По предлагаемому способу определение токсичности мяса при фузариотоксикозе в однослойной культуре клеток основано на цито-токсическом действии токсина, то есть способности токсина или его метаболитов вызывать деструкцию клеток монослоя. Дегенеративные изменения клеток монослоя под воздействием токсина начинается через 20 — 24 час после внесения токсического экстракта в культуру и полностью заканчиваются через

36 — 48 час в зависимости от токсичности исследуемого материала.

Предлагаемый способ осуществляется сле5 дующим образом.

Исследуемый материал (мышцы или паренхиматозные органы) в количестве 5 гр растирают с 5 мл ФБР B стерильной фарфоровой ступке со стерильным кварцевым песком

10 или гомогенезируют в специальных аппаратах. Полученную суспензию выдерживают при

4 — 6 С в течение одного часа, а затем центрифугируют в течение 20 мин при 3000 об/мин.

Надосадочную жидкость фильтруют через

15 фильтры миллипора, сливают в стерильные флаконы и хранят до использования.

Для определения токсичности мышечной ткани используют пробирки с хорошим сплошным монослоем клеток почки эмбриона свиньи

20 (СПЭВ). Для этого производится просмотр

I()лътур под микроскопом.

Внесение экстракта в культуру. Предварительно из отобранных пробирок с культурой клеток сливают старую ростовую среду и вно25 сят по 1 мл испытуемого экстракта, разведенного в питательной среде 1: 5; 1: 20; 1: 40;

1: 8G; 1: 160; 1: 320; 1: 640; 1: 1280; 1: 1920;

1: 2560.

На вторые сутки производят учет результа30 тов реакции. Каждую пробирку просматрива506395

Составитель Э. Хазанова

Редактор Н. Аристова

Техред T. Дмитриева

Корректор О. Тюрина

Заказ 1153/13 Изд. № 1247 Тираж 629 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, K-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 ют под малым увеличением (7) 10) микроскопа и определяют ЦТД токсического экстракта (условно» ц -.крестах). Пробирки с явным поражением клеток. ронослоя складывают отдельно, остальные пробирки вновь помещают

-при температуре 37 С.

Окончательный учет результатов производится через 48 час после внесения в культуру экстракта. Одновременно просматривают и контрольные пробирки. Результаты определения токсичности исследуемого экстракта являются достоверными при сохранении монослоя в контроле.

Пример. Из мяса овец, вынужденно забитых при различных течениях экспериментального фузариотоксикоза, готовили различные разведения экстракта на питательной среде и вносили по 1 мл во флаконы с культурой ткани СПЭВ. Через 24 час производили учет реакции, отметив при этом, что при внесении мышечного экстракта, полученного при хроническом опыте, клетки СПЭВ разрушались в разведении 1: 2000, в то время как при подостром опыте — в разведении 1: 1200. При остром опыте и контроле клетки не разрушались.

Аналогичные по степени токсичности результаты были получены параллельно на крысах, которым скармливали мясо от тех же животных.

Крысы, поедавшие мясо животных, забитых при подостром токсикозе, заболе|вали на

14 день с начала скармливания, а при хроническом токсикозе на 8 — 10 день. При вскры5 тии крыс наблюдали патологоморфологические изменения в паренхиматозных органах.

Крысы, поедавшие мясо от контрольных животных и животных, забитых при остром токсикозе, оставались живыми, 10 Таким образом, установленная закономерность позволяет предложить способ определения токсичности мяса при фузариотоксикозе на культуре ткани СПЭВ и других клетках.

Формула изобретения

Способ токсикологического исследования мяса животных, вынужденно забитых при фузариотоксикозе, включающий выявление па20 тологоморфологических изменений в тканях паренхиматозных органов животных по дегенеративному изменению в них, отличаюшийся тем, что, с целью сокращения времени исследования, испытуемое мясо экстраги25 руют гомогенизированием его в фосфатно-буферном растворе, очищают и полученный экстракт вносят в различных разведениях в монослой культуры клеток паренхиматозных тканей и о степени токсичности мяса судят по

30 тому, в каком разведении экстракт разрушает ткани.