Способ получения жгутиковых антигенов
Иллюстрации
Реферат
) t
1 о и и с А--Нй
ИЗОБРЕТЕНИЯ
Iii) 506622
Cows Сеоехскик
Социалистических
Реолублик
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 07.06.74 (21) 2032313/28-13 с присоединением заявки _#_ (23) Приоритет
Опубликовано 15.03.76. Бюллетень Ме 10
Дата опубликования описания 25.05.76 (51) М. Кл С 12К 1/00
А 61К 39/02
Государственный комитет
Совета Министров СССР по делам изобретений (53) УДК 615.372(088.8) и открытий (72) Автор изобретения (71) Заявитель
И. Я. Мошиашвили
Московский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЖГУТИКОВЫХ АНТИГЕНОВ
Изобретение относится к области медицины и касается получения жгутиковых антигенов.
Известен способ получения жгутиковых антигепов, по которому производят обработку бактерий в механическом дезинтеграторе с последующей химической очисткой и центрифугированием.
Однако известный способ из-за многократного переосаждения спиртом, приводящего к частичной коагуляции жгутиковых антигенов, имеет невысокий выход целевого продукта и невысокую степень чистоты за счет того, что в препарат могут попадать посторонние примеси, образовавшиеся в результате полного разрушения клеток.
По предлагаемому способу с целью предотвращения разрушения цельных клеток и повышения степени чистоты целевого продукта исходный материал подвергают обработке ультразвуком в режиме, не вызывающем кавитации, что приводит лишь к отрыву жгутиков, которые затем вновь разрушают ультраззуковой обработкой.
Одним из вариантов обработки исходного материала является следующий режим: частота 1 Мгц и интенсивность 5 вт/см при густоте суспензии 100 — 150 млрд клеток/мл.
Пример. Берут 100 — 200 мл бактериальной суспензии с концентрацией 100 — 150 млрд клеток/мл дегазированного путем стерилизации в автоклаве физраствора при рН 7,0 — 7,2, азливают в сосуд из нержавеющей стали с рубашкой для охлаждения водой или углекисбым газом, герметично закрывают и помещают в водяной излучатель. Процесс озвучивания проводят на установке И. Я. Мошиашвнли в камере из оргстекла, где до и после процесса воздух стерилизуют бактерицидными лампами. Управление процессом отрыва жгу10 тиков и их дезинтеграцию осуществляют дистанционно или непосредственно внутри кабины. Жгутики отрывают ультразвуковой обработкой при интенсивности звука 5 вт/см, частоте колебаний 1 МГц. Расстояние пьезоквар15 ца до дна сосуда 20 — 25 мм. Диаметр пьезокварца 50 мм. Контактной жидкостью служит дистиллированная вода. Озвучивание проводят при 8 — 10 С в течение 1,5 — 2 мин. Затем отделяют жгутики от целых клеток центрифу20 гированием при 3 — 4 тыс. об/мин при 5 — 10 С в течение 20 мин. Надосадочную жидкость, содержащую жгутики, вновь озвучивают
10 мин при тех же условиях и вновь центрифугируют при 5 — 6 тыс. об/мин при 5 — 10 С.
25 3 полученный ультразвуковой растворимый
Н-антиген добавляют мертиолат в разведении
1 . 5000 и проводят диализ против дистиллированной воды при 5 — 10 С в течение 72 час (вода меняют 2 раза). Отдиализованный пре30 парат лиофильно высушивают без подогрева и получают сухой аморфный жгутиковый ан506622
Составитель С. Малютина
Техред Г. Андреева
Редактор Л. Василькова
Корректор М. Лейзерман
Заказ 1124/7 Изд. № 1186 Тираж 593 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, %-35, Раушская наб., д. 4/5
Типография, пр. Сапунова, 2 тпген, хорошо растворимый в воде и физра творе. Такой препарат применим для получения антигенных эритроцитарных монорецспторных Н-диагностикумов и монорецепторных
Н-сывороток. Срок хранения антигенов 4,5 года (время наблюдения) при 4 — 8 С в герметичных условиях.
Формула изобретения
1. Способ получения жгутиковых антигенов путем дезинтеграции исходного материала с последующим отделением целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью предотвращения разрушения цельной клетки, исходный материал подвергают ультразвуковой обработке в режиме, не вызывающем кавитации.
2. Способ по п, 1, отличающийся тем, что обработке подвергают б актер иальную суспензию с густотой 100 †1 млрд клеток/мл при частоте 1 МГц и интенсивности
5 вт/см