Способ получения водонерастворимой глюкоамилазы

Способ получения водонерастворимой глюкоамилазы

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

(1i) 507636

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 10.03.72 (21) 1758893/28-1.3 с присоединением заявки №вЂ” (23) Приоритет— (43) Опубликовано25.03 76.Бюллетень № 11 (45) Дата опубликования описания 19,04.76 (51) М. Кл.

С 12 D 13/10

С 07 6 7/02

Гасударственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УДК 577.15.08 (088.8) (72) Авторы изобретения

Г. И. Ким, P. И, Салганик н В. К. Старостина

Специальное конструкторско-технологическое бюро биологически активных вешеств (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВОДОНЕРАСТВОРИМОЙ

ГЛЮКОАМИЛАЗЫ

Изобретение относится к микробиологии.

Известен способ получения водонерастворимой глюкоамилазы, путем ковалентного связывания ее с водонерас.творимым носителем. 5

По предлагаемому способу получают более стабильную глижоамилаэу, Это достигается тем, что в качестве нс сителя используют аминоэтнлцеллюлозу, а ковалентную связь осушествляют глютаровым альдегидом при рН 6,5-6,9 и комнатной температуре.

Пример„К 40 г АЕ-целлюлозы

{влажный вес) добавляют 4 мл 0,2 М фос- та фатного буфера; рН 6,8. Затем всыцают

300 мг ферментного препарата нзЛа ее.. е И Ма а )иомоаь . Смесь тщательноперемешивают шпателем до полного растворения фермента. Затем добавляют 4 мл 5%-но-20

ro глютарового альдегнда и смолу переме« шивают еше раэ для равномерного распределения по ней альдегида. Полученную смесь оставляют при комнатной температуре (18 20 С) на 10-16 час, И

Полученный нерастворимый препарат глю (коамилазы переносят на стеклянный фильтр М Я и отмывают от несвязавшегося белка и продуктов реакции 150 мл 1N Na-ацетатного буфера; рН 4,7. Каждую фракцию исследуют на поглощение цри 280 mfa. ua СФ-4 и на глюкоамилазную активность по

t модифицированной методике Зихерта-Блейера.

Так определяют количество несвязавшегося фермента. Затем нерастворимую т лю коамилазу промывают еще 200-150 мл

l1X NaCl до полного исчезновения оптической плотности в промывной воде.

Со смолой связалось 62-75% от исходного количества фермента. Активность полученного препарата нерастворимой глюко:амилазы 40-56% от активности исходного фермента.

Препарат полностью сохраняет активность в условиях гидролиза крахмала в течение

10 дней. Водонерастворимую глюкоамилаэу можно хранить при 4оС в течение трех месяцев без потери активности при комнатной температуре.

507636

Составитель Г. Субботина

Текред М. Левипкая Корректор Н. Зинзикова

Редактор А, Вер

Тираж 551

Подписное

UHHHHH Государственного комитета .Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

11ЗОЗЬ, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент, г. Ужгород, ул. Гагарина, 101

Формуле изобретения

Способ получения водонерастворимой глюкоамилазы путем ковалентного связывания ее с водонерастворимым носителем о т л и. ч а ю ш и и с я тем, что, с пелью получения более стабильной глюкоамилазы, в качестве носителя используют аминоэтилцеллюлозу, а ковалентную связь осуществляют б глютаровым альдегидом при рН 6„5-6,9 и

-комнатной температуре.