Способ культивирования бактерий
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Г (11) 511343
ОйИСАЙИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
Союз Советскии
Со@иелистицескит
Республик (61) Дополнительное к авт, свид-ву (22) Заявлено 19.06,74 (21) 2036379/13 с присоединением заявки № (23) Приоритет (43) Опубликовано 25.04.76.Бюллетень №15 (45) Дата опубликования описания (51) М. Кл. С 12К 3/00
2, Гкударстаеиный иемнтет
Сааата Министроа СССР па делам нзабретений н атирытий (53) УДК 576.8.095.12 (088.8) B. Ф. Кондратьева, В. A. Добрего, В. В. Рагозин и H. В. Данилова (72) Авторы изобретения (71) Заявитель е Ленинградский филиал Всесо1оэного научно-исследовательского института медицинского приборостроения (54) СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ БА :ТЕРИЙ
Изобретение относится к микробиологами и может быть использовано в медицине для диагностики таких заболеваний, как туберку-
:,пез, заболевания крови, дизентерия.
Известен способ культивирования бактерий, заключающийся в том, что чистую культуру или материал.от больного высевают на питательную среду и инкубируют при37оС до полного выращивания (для туберкулезной палочки срок инкубирования до 90 суток, гц для кишечной палочки — 14 16 час), С цепью ускорения роста и сокращения сроков исследования, посевы перед инкубиро- ванием подвергают воздействию механических колебаний частотой 90400 Гц, в тече- И ние 60240 ллнц.
Способ осуществляют следующим образом, Из выращенной в срок, необходимый дпя оптимального роста культуры приготавлива ют взвесь в физиологическом растворе, со ответствующем пятому оптическому стандарту мутности, Взвесь разводят в 10 раз и засевают (по 0,2 мл) в две пробирки с соответствующей для определенного вида бак— терий средой, Одна из пробирок служит конт Ж рольной, ее ставят в обычный термостат (при 37 С) беэ предварительной обработки интенс явными механичес кими колебаниями.
Вторую пробирку помешают в специальньгй штатив и подвергают воздействию интенсивных механических колебаний звукового диапазона различных частот и разного по длительно о сти времени обработки также при 37 С.
Наблюдают за ростом через определенные промежутки времени в зависимости от вида исследуемой культуры, Культуру кишечной палочки засевают в жидкий питательный бульон и сразу после обработки интенсивными механическими ко пебаниял1и из нее (так же как и из контрольной) делают высевы на чашки
Петри - плотной питательной средой, С целью определения количества высеянной культуры на другой день подсчитывают ко личество выросших копоний.
Медленно растущие микробактерни тубер кулеза засевагот на среду Левенштейна-Иеисена и после воздействия на них интенсив:ными механическил и колебаниями ннкубн» руют и наблюдают за ростом как контроп.
Составитель C Малютина
Т „ð,eä А Х с жоррвк 1i /4Лейзерман
Редактор А.Бер
56 Иад. 34gQ Тира к 5 . Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР ио делам изобретений и открытий
Москва, 113Î35, раушскаи наб., 4
Филиал ППП "Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4
:йх, так и обработанных посевов в течение . .О дней. Отмечают начало появления (ини ,иальный) и сплошной рост.
Также исследования проводят с 12 куль » урами при восьмикратном повторении, Исследования с материалами от больного:, мокрота, промывные воды бронхов) прово ят с целью выделения возбудителя заболе ания микробактерий туберкулеза следующим бразом. - 16
Материал, взятый от больного, заливают! .0;6ным раствором тринатрийфосфора, встри-, снвают,h.; отстаивают при 37 С до следуй: . . йо дня (16 18 ча<;), затем центрифугиру» тт (4000 об/мин, 10 мин), промывают, нова центрифугируют.
Осадок разводят в среде Школьникова и .о 1 мл взвеси засевают в 6 пробирок со редой Левенштейна Иенсена, Четыре про иоки помещают в термостат при 37 С 20 контроль Ц а две подвергают воздейст ию интенсивных механических колебаний рдределенной частоты и длительности воэ
;ействия, После етого пробирки ставят в термостат, 25 де выдерживают вместе с контрольными.
4 1
Через день (на протяжении 3 месяцев) про .,водят наблюдение эа ростом культур, отме чают инициальный и сплошной рост .
Установлено, что ускорение роста микро бактерий туберкулеза происходит на частоте 150 1 ц, + 5% в течение 240+15 мин, ки шечной палочки 200 Гц+ 7% в течение
210+ 5 мин, L форм» 100Гп+ 7% в ечение 180 + ЗО мин, микоплазмы 50 Гц + 5%. в течение 180 + ЗО мин.
Культивирование Оаитерий позйоляет уо ,корить сроки роста медленно растущих форм чистый культур и выделений из материала
:от больного в 26 раэ (и зависимости от
;вида бактерий) .
Формула изобретения
Способ культивирования бактерий, осно ванный на посеве исследуемого материала
I на питательную среду с последующим инкуби рованием, отличающийся тем
I что, с целью ускорения роста и сокращения сроков исследования, посевы перед инкуби рованием подвергают,воздействию механи ческих колебаний частотой 90 00. Fg в течение 60 240 мин.