Способ приготовления препаратов в биологических макромолекул для электронной микроскопии

Способ приготовления препаратов в биологических макромолекул для электронной микроскопии

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

ОП ИСАН И Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (11) 5196IO

Со вв Советских

Социалистических

Реслублик (61) Дополнительное к авг. свид-ву (22) Заявлено 11.04.75 (21) 2122854/13 (51) М. Кл.- "G 01N 1/28 с присоединением заявки №

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изооретеннй н открытий (23) Приоритет

Опубликовано 30.06.76. Бюл. cievb № 24

Дата опубликования описания 04.08.76 (53) УДК 621.385,833.2 (088.8) (72) Авторы изобретения

Ю. Ю. Венгеров, В. И. Попенко и В. А. Кадыков

Институт молекулярной биологии АН СССР (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ

ПРЕПАРАТОВ БИОЛОГИЧЕСКИХ МАКРОМОЛЕКУЛ

ДЛЯ ЭЛЕКТРОННОЙ МИКРОСКОПИИ вым напылением сплавом Р1 — Pd. Просмотр производят на электронном микроскопе.

Использование предлагаемого способа приготовления препаратов биологических макромолекул для электронной микроскопии дает возможность избежать привнесения белка в растворы биологических макромолекул и связанных с присутствием белка артефактов, а также наносить биологические макромолекулы

1О в большом диапазоне рН (от 3 до 11), что позВоляет наносить биологические макромолекулы в денатурирующих условиях.

Способ приготовления препаратов биологических макромолекул для электронной микроскопии путем создания на поверхности гипофазы пленки с расправленными макромолеку20 лами, о тли ч а ющи и ся тем, что, с целью повышения качества исследования путем устранения артефактов, для создания пленки на поверхности гипофазы используют слабо диссоциирующий буферный раствор.

Источник информации, принятый во внимание пр:.t экспертизе:

Methods in Enzymology 1968, 12, стр. 36, Изобретение относится к электронно-микроскопическим исследованиям.

Известен способ приготовления препаратов биологических макромолекул путем использования пленки денатурированного оелка на поверхности раздела гипофаза — воздух (1).

Однако известный способ не ооеспечивает высокого качества исследования.

С целью повышения качества исследования для создания пленки на поверхности гипофазы используют слабо диссоциирующий буферный раствор.

Пример. Нанесение ДНК фага ). для электронной микроскопии.

В качестве слабо диссоциирующего буфера используют аммонийацетат. Каплю спредируемого раствора (3 у/мл ДНК А,, 1 Ы аммонийацетатный оуфер, рН 5,о) осторожно наносят на поверхность гипофазы (О,о М аммонийацетатный оуфер, рН 5,5), Растекание по поверхности контролиру.ют по меткам талька. Затем электронно-микроскопической сеточкой, покрытой угольной пленкой, касаются поверхности полученного пятна вблизи от его центра. Избыток жидкости отсасывают фильтровальной бумагой. Сеточку промывают в этаноле (96%) и контрастируют кругоФормула изобретения