Способ фильтрации растворов или суспензий микроорганизмов и/или белков

Способ фильтрации растворов или суспензий микроорганизмов и/или белков

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

Союз Соаетекия

Соцмалмстмческия

Республик (>1) 520778 (6l) Дополнительное к авт. свил-ву(22) Заявлено 01.07.75(21) 2145252/13 е присоединением ааявки № (23) Приоритет (43) Опубликовано 25.07.77,Бюллетень № 27 (45) Дата опубликования описания 13.09.77 (51) М. Кл, С 12 К 1/1О

Гввудвуствеиивй кемитет

Свввтв Министров СССР вв делам иэобретеиий и втиритий

Г. H. Флеров, В, С. Барашенков, С, 1l. Третьякова, С. Е. Бреслер, В. М. Коликов, В. М. Молодками, Б. В. Мчедлишвили, М. Б. Королев и Т. A. Аксенов (У2) Автори изобретения

Ленинградский ордена Ленина политехнический институт им. N. И. Калинина (71) Заявитель (54) СПОСОБ ФИЛЬТРАЦИИ РАСТВОРОВ ИЛИ СУСПЕНЗИЙ

МИКРООРГАНИЗМОВ И/ИЛИ БЕЛКОВ

Изобретение относится к медицинской промышленности, касается получения биологических препаратов и может быть использовано в технологических схемах очистки, "терилизации, концентрирования растворов, содержаших вирусы, бактерии и белки.

Известен способ фильтрации растворов или суспензий, например, микроорганизмов, заключающийся в том, что исходный материал пропускают через пористую мембрану, щ например, типа Миллнпор.

Од-.ако в процессе фильтрации теряется часть целевого продукта и ухудшается од» нородность препарата.

1б Целью изобретения является уменьшение . потерь ц чевого продукта и получение его в более однородпом виде.

Эта цель достигается тем, что фильтра цню осушествляют через материал, систе р ма пор KoTDpoi о образована бомбардиров кой ускоренш вш однородными тяжелыми ионами с поледующнм травлением их треков, Средний разброс пор Т!о размерам в таких фильтрах составляют 1-2" . М

Использование "àêîãî материала позв = ляет увеличить удельную скорость процесса фильтрации за счет воэможности подбора наиболее оптимального соотношения раэме ров пор мембран и размеров фильтруюшего объекта. Размер пор может составлять от четверти до четырех размеров фильтруемого объекта. Материалом для мембран могут служить синтетические и природные полимеры. В зависимости от материала мембраны фильтр может быть стерилиэован любым иэ известных методов.

Пример 1. Очистка и концентрирование вируса бешенства.

Вирус бешенства обычным образом вы ращивают в культуре ткани почек сирнМ ского хомчка и смывают 100 мл питатель= ного раствора Эрла, Исходный титр и со держание белка в суспензия, составляют соответственно 3,3 Lg LI3 50/0 03 и

5,8 (g ОЭ . Суспензию после осветлениа

Лало отстаиванием пропускают под давлением

0,6 атм через лаасановый фильтр с па ристостью 1,7, и средним размером пор

630 А 4 2 Ъ в течение 30 мьн. Фнлырат

520778

Лавсановый 100

3,3, 0,100

5,92

100 5,0 3,3 0,035 2 60 4 8

Миллипор

Составитель С. Малютина

Редактор Н. Вирко Техред О. Луговая Корректор А. Власенко

Заказ 2589/47 Тираж 541 Подписное

БНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Мо=ква, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППГ Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 отбрасывают, а с фильтра собирают 7 мл суспензии с титром 5,11 L 9 50/0,03 и концентрацией белка 5,926рОЗ в>.Конечный продукт имеет следующие характеристики по сравнению с препаратом, полу ченным известным образом с использова нием фильтров Миллипор (средний размер псо 150 А k 10%; пористость 88%) (см. таблицу).

Пример 2. Стерилизация белковых растворов.

Гомогенизированный встряхиванием

0,5%-ный лактальбумин на растворе Эрла (содержание белка 5 мг/мл) фильтруют через лавсановые фильтры (размер пор от

1000 А 1% до 25 000 А Р 3%; пориотость от 1 до 25%) под давлением 1,5 атм в течение 10-60 мин. Эти же препараты фильтруют через фильтры Миллипор в таких же условиях.

Собирают. 990 мл раствора при содержании белка 5 мг/мл, т. е. без потерь целевого продукта. Контроль стерильности препаратов проводят с помощью посевов с дальнейшим пересевом на бактериальные питательные среды.

Все препараты до и после фильтрации проходят микроскопный контроль.

Формула изобретения

Способ фильтрации растворов или суопензий микроорганизмов и/или белков путем прэпускайия через пористую - мем» браку, отличающийся тем; что, с целью умень пения потерь целевого

Препараты свободны от бактериальной микрофлоры, а также от вирусов (грнппа и бешенства), если средний размер лавсановых фильтров составляет 20008000 А. Удельная скорость фильтрации ю

30-100 мл/мин см; Ь P l атм. Прн

2 использовании известного способа с применением фильтров Миллипор эффект стерилизации достигают при размере пор р 2200 4500 A. Удельная скорость фильтре2 ции составляет 2-10 мл/мин-см; Ь Р

1 атм, Пример 3. Концентрирование вируса гриппа.

120 мл аллантоисной культуры вируса гриппа (штамм В/Гонконг) с титром

1-1024, предварительно очищенной путем адсорбции - элюции на эритроцитах, фильтруют через лавсановый фильтр (средний о

20 размер пор 1000 А + 2%; пористость 3%) под давлением в течение 60 мин. Фильтрат (титр вируса 1: 16) отбрасывают, а с фильтра собирают 10 мл суспензии с титром 1:8192. Удельная скорость фильтра2

25 ции составляет 0,05 млlмин см; Ь Р-1 e м..

В результате происходит концентрирование вируса гриппа и 6 раз при сохранении

100 / -ной вирусной активностг. продукта и получения его в более однородном виде, фильтрацию осуществляют через материал, система пор которого образована бомбардировкой ускоренными однородными тяжелыми ионами с последующим травлением их треков.