Питательная среда для выращивания бруцелл вида овис
Патент 523932
Авторы
Классы МПК
Питательная среда для выращивания бруцелл вида овис
Иллюстрации
Реферат
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советских
Социалистических
Республик (и) 523932 (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) 3а я в лен о 24.04.74 (21) 2 0201 27/1 5 с присоединением заявки № (23) Приоритет (43) Опубликовано05,08.76.Бюллетень № 29 (45) Дата опубликования описания 02.11.76 (51) М. Кл.
С 12 К 1/06
С 12 В 3/00
Государственный комитет
Совета Мнннстрав СССР па делам изооретений и открытий (53) УДК 576.8.093 . . 1: 576,8 51.42 (088.8) (72) Авторы изобретения
3. М. Бедарева, В. И. Белобаб и Е. М. Ивершина
Казахский научно-исследовательский ветеринарный институт (71) Заявитель (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ БРУЦЕЛЛ
ВИДА ОВИС
Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности, к питательным средам для бруцелл вида овис, и может быть использовано для выделения возбудителя инфекционного эпидидимита баранов, вызываемого этим микроорганизмом, а также для получения бактериальной массы при изготовлении биопрепаратов из него.
Известны среды для культивирования бруцелл, содержащие мясо-пептонный бульон, 10 печеночный экстракт, глюкозу, глицерин, хлористый натрий и агар (МППГГА).
Для вырашивания на них бруцелл вида овис (возбудителя инфекционного эпидидимита баранов, впервые установленного в СССР 15 в 1967 г. Триленко П. А) эти среды требуют обогащения их сывороткой (в количестве 10%), аминопептидом (до 15%), а в процессе культивирования — повышенного содержания СО . Первичные генерации культур 20 бруцелл вйда свис на таких средах (МППГГА аминопептид +сыворотка ) длительно и плохо растут, Кроме того для получения обогашенных сывороточных сред необходимо содержать доноров, =терильно получать от них 25 сыворотку крови и вносить ее в среду при о определенной температуре (50 С) . Нередко это приводит к денатурации белков сыворотки крови или некачественному смешиванию ее. Среды часто прорастают из-за присутствия в сыворотке крови кокковой микрофлоры, Цель изобретения — ускорение роста микробов и повышение выхода бакмассы бруцелл.
Поставленная цель достигается тем, что в среду, содержащую агар-агар, глюкозу, глицерин, хлористый натрий и воду, дополнительно введены неполный панкреатический гидролизат казеина, содержащий 220-250 мг% аминного азота, неполный панкреатический гидролизат придатков с семенниками, содержащий 120-130 мг% аминного азота и аминокислота L -цистин, при этом компоненты взяты в следуюшем соотношении (вес,%): агар-агар- 2,2-2-6; глюкоза—
0,5-1,5, глицерин — 1,5-2,5; хлористый натрий — 0,3-0,7, неполный панкреатический гидролизат казеина 20-40, вода — 2040; L — цистин — 0,02-0 05, неполный панкреатический гидролизат придатков с семенниками — остальное.
523932
Таблица
Выход бакмассы бруцелла овис в зависимости от применяемой среды
Время смыва
Виды штаммов
МППГГА с сывороткой
Выход бакмассы на средах в миллиардах/мл. культур после посева, сутки
Предложенная среда без аминокислоты с аминокислотой
200
160
160
Бр.овис 873
280
400
300
400
480
480
Бр.овис 0342
160
120
300
160
180
120
160
Бр.овис 0495
Бр.овис 0495
240
240
200
300
240
360
240
240
140
Бр.овис 227
280
300
350
300
300
300
Среду готовят следующим образом. Берут 1 л неполного панкреатического гидролизата придатков с семенниками, содержащий 120-130 мг% аминного азота, 0,51 л неполного панкреатического гидролизата казеина, соедержащего 220-250 мг% аминного азота. вносят водопроводную воду (0,5-1 л) из расчета, чтобы аминный азот среды был равен 125-130 мг% и 0,5% хлористого натрия. Доводят PH среды до 10
8,1-8,15 и вносят 2-2,5% агар-агара Корсаковского, который растворяют автоклавированием при 0,5 атм в течение 30 мин. Содержимое фильтруют, определяют рН среды, 50
Из приведенных данных видно, что оптимальной средой для получения наибольшего роста бактериальной массы оказалась предложенная среда, приготовленная из гидролизата семенников баранов и казеина с до- 55 бавлением амнокислоты L -цистина. На этой среде уже на 2 и в некоторых случаях на 3 сут. роста получено в 1 5-3 раза больше бактериальной массы, чем на известной среде. 60 который должен быть равен 7,7-7,8 вносят
0,03-0,04 % — цистина, 1% глюкозы, 2% глицерина. При постоянном перемешивании содержимое разливают по пробиркам и автоклавируют при 0,5-0,6 атм 30 мин. Приготовленная среда имеет следующие показатели: содержание общего азота — 450-500, аминного азота — 120-130 мг%, пептона—
3,5-4,5%, триптофана — 55-80 мг%, рН-7,17,2.
В таблице показаны результаты сравнительного испытания предложенного состава среды для выращивания бруцелл вида овис и известной среды (МППГГЛ с сывороткой).
Помимо увеличения выхода бакмассы и сокрашения сроков выращивания данного микроорганизма на предложенной среде, использование ее для выращивания бруцелл вида овис также исключает необходимость добавления сыворотки крови в среду, что повышает стерильность ее и снижает затраты на ее приготовление. Себестоимость предлагаемой среды в 3,5 раза ниже в сравнении с широко используемой средой МППГГА+амино-пептид+сыворотка.
523932 компонентов (вес, 4).
2,2-2,6
0,5-1,5
1, 5-2,5
0,3-0,7
20 -40
20 -40
О, 02-0,05
Остальное.
Составитель Л. Мурая
Редактор В. Другова Техред О. Луговая Корректор A. Лакида
Заказ 5059/386 Тираж 575 Подписное
UHNNHN Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4
Формула изобретения
Питательная среда для выращивания бруцелл вида овис, содержащая агар-агар, глюкозу, глицерин, хлористый натрий и воду, отличающаяся тем, что, с целью ускорения роста и повышения выхода бакмассы бруцелл, в среду дополнительно введены неполный панкреатический гидролизат казеина, содержащий 220-250 мг% аминногоазота, неполный панкреатический гидролизат щ придатков с семенниками, содержащий 120130 мг% аминного азота, и аминокислоту — цистин при следующем соотношении
Агар-агар
Глюкоза
Глицерин
Хлористый натрий
Неполный панкреатический гидролизат казеина
Вода
-цистин
Неполный панкреатический гидролизат придатков с семенниками