Способ дезагрегации тканей для получения клеточных суспензий

Способ дезагрегации тканей для получения клеточных суспензий

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

О П И С А Н И Е нн 526661

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Союз Советских

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 04.03.74 (21) 2004746, 15 с присоединением заявки М (23) Приоритет

Опубликовано 30.08.76 Бюллетень !¹ 32

Дата опубликования описания 13.10.76 (51) М. Кл.з С 12К 9 00

Гасударственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (53) УЧК 577 15 07 (088.8) (72) Авторы изобретения

И. П. Терещенко и М. В. Голованов

Московский научно-исследовательский онкологический институт им. П. А. Герцена (71) Заявитель (54) СПОСОБ ДЕЗАГРЕГАЦИИ ТКАНЕЙ ДЛЯ

ПОЛУЧЕНИЯ КЛЕТОЧНЫХ СУСПЕНЗИЙ

Формула изобретения

2) Изобретение относится к биологии и может быть использовано для получения клеточных суспензий.

Известен способ получения клеточных суспензий дезагрегацией механическим путем с ферментативной обработкой ткани.

Однако этот способ трудоемок, требует предварительной обработки ткани ферментами и нарушает нативные свойства клеток.

С целью упрощения способа и сохранения нативных свойств клеток обработку ткани проводят при скорости вращения роторной мешалки от 100 до 600 об/мин и температуре от 20 до 40 С.

Сущность предлагаемого способа заключается в следующем.

Орган (печень, селезенку и др. или ткань опухоли и др.) извлекают из убитого животного и помещают в стакан с физиологическим раствором. От органа или ткани отделяют волокнистую капсулу (оболочку) и разрезают ее на образцы кубической формы объемом от

1 до 8 мм в количестве 5 — 150 кусочков.

Полученные кусочки ткани трижды промывают физиологическим раствором, наливая и сливая раствор. Промытые кусочки ткани помещают в рабочий термостатированный сосуд, наливают физиологический раствор в количестве от 1 до 50 мл и включают ультратермостат, который регулирует температуру в рабочем сосуде в пределах от 20 до 40 С. Затем включают мотор, вращающийся со скоростью в пределах от 100 до 600 об/мин, и ткань дезагрегируют от 1 до 60 мин. Далее

5 выключают мотор, а полученную суспензию из отдельных клеток сливают через фильтр в дне сосуда.

Пример. Из убитого животного извлекают селезенку. Готовят образцы ткани куби10 ческой формы объемом 8 мм ". 10 кусочков ткани помещают в рабочий термостатированный сосуд при 37 С. Наливают 10 мл физиологического раствора. Включают мотор на 10 мин. Мотор вращает роторную мешалку со

15 скоростью 200 об/мин. После выключения мотора жидкость с отделенными клетками сливают через фильтр.

Способ дезагрегации тканей для получения клеточных суспензий, включающий разрезание ткани и механическое разобщение ее на

2 клетки роторной мешалкой, о т л и ч а ю щ н йся тем, что, с целью упрощения способа и сохранения нативных свойств клеток, обработку ткани проводят при скорости вращения роторной мешалки от 100 до 600 об/мин н

8о температуре от 20 до 40 С.