Способ получения трихотецина
Иллюстрации
Показать всеРеферат
Оп ИСАНИЕ „,, ИЗОБРЕТЕН ИЯ
Союз Советских
Социалистических
Республик
Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 04.02.75 (21) 2102946/1 5 с присоединением заявки М (23) Приоритет (43) Опуоликовано 25.09.76Бюллетень М 35 (45) Дата опубликования описания 09.12.76 (51) М. Кл.
А 01 N 15/00
Государственный ноиитет
Совета Министров СССР оо денек изобретений н открытий (53) УДК 663:632.937.. 1 5(088.8) (72) Авторы В. Г. Вовкогон, М. Т. Петрухина, А. Г. Ткаченко, изобретения Э, К. Сугоняева, И. И. Водорацкая и Е. С. Сотник
Всесоюзный научно-исследовательский институт микробиологических средств зашиты растений и бактериальных препаратов (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТРИХОТЕЦИНА
Изобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовано для получения препаратов, использу— емых в борьбе с болезнями возделываемых растений и леса.
Известно производство препарата трихоцетина, использующее дефицитное и дорогостоящее пищевое сырье (1 .
Известен способ получения трихоцетина при котором посевной материал выращивают на предварительно отобранном и сваренном пшене. Для биосинтеза используют посевную среду, содержащую сахарозу, аммоний сернокислый, калий фосфорнокислый двухзам шенный, хлористый калий, кукурузный экстракт, молочную кислоту. ljJIsl ферментации в среду, кроме перечисленных компонентов, вводят глицерин (21.
Этот способ, однако, требует сложного приготовления посевного материала, использования в посевной и ферментационной средах дефицитного и дорогостоящего пищевого сырья, кроме того, процесс ферментации длителен. 25
11елью изобретения является упрощение приготовления посевного материала, удешевление сред и сокращение срока ферментации.
Поставленная цель достигается тем, что сухой посевной материал готовят на сухих хлопьях геркулеса, инокулят выращивают на среде из гидролизных дрожжей, а ферментацию ведут на среде, содержащей кукурузную муку, хлористый магний, мел, глицерин, азотнокислый аммоний и двухзамещенный фосфорнокислый калий.
Пример . Сухой посевной материал в виде конидий гриба Tplc110tll8c. авеum li. получают путем выращивания на хлопьях геркулеса. Для этого 10 — 15 г хло пьев геркулеса, просеянных через сито с ячейками 4. мм, помещакт в флаконы емкостью 250 мл и дважды сгерилизуют с интервалом в 24 час при 1 атм в течение
1 час. Затем флаконы с хлопьями геркулеса засевают 5 мл жидкой культуры гриба (вегетативный мицелий), предварительно выращенный на среде, содержащей,%: сахарозы 0,75-1,5; кукурузного экстракта 0,75528918
220 об/мин при 26-27 С в течение 72о
96 час.
Активность культурапьной жидкости определяют методом диффузии в агар с использованием в качестве тест-культуры гцьа um тпот (1огтпе.
При использовании штамма активность культуральной жидкости при выращивании на предлагаемых средах достигает 450-600 мкг/мл, в то время как при выращивании на средах, взятых за прототип, она составляет 250-360 мкг/мл
Способ получения трихотецина, включающий выращивание гриба TvIcbo
Источники информации, прнятые во внимание при экспертизе:
1. AiосЬитг, g, 1949, 44, 1-4 (прототип), 2. "Лабораторно — производственный регламент получения трихотецина." Московский государственный университет им, М. В.
Ломоносова, биологический факультет, 1969г. (аналог).
1ь5; КН2РО, -0,05-0,2 (NH д ) 60с —
0,02-0,15 в течение 30-36 час на качалке со скоростью вращения 1 60-220 об/мин
После засева флаконы тщательно встряхивают и помещают в термостат с темпео ратурой 26-27 С на пять-семь суток до получения ярко-оранжевых "пылящих" хлопьев сплошь покрытых конидиями гриба.
Затем флаконы с конидиями гриба сушат в вакуум-сушильном шкафу при 25-27 С о и остаточном давлении 8-10 мм рт.ст. в течение оцних-полутора суток.
Полученным сухим посевным материалом засевают колбы емкостью 750 мл, содержащих по 200 мл жидкой питательной среды, Формула изобретения
В каждую колбу вносят по одной бактериологиl6 ческой ложечке посевного материала. Жидкая питательная среда, используемая в колбах, содержит 0,5-1,2 4 гидролизных дрожжей в
1 л водопроводной воды, рН 5,2-5,4, стерилизована при 1 атм в течение 1 час. Выращивают гриб в колбах на указанной среде в течение 30-36 час на качалке с 160220 об/мин при 26-27 С.
Выращенным вегетативным мицелием (инокулятом) засевают ферментационные колбы емкостью 750 мл, содержащие 200 мл жидкой питательной среды, следующего состава, 4: кукурузной муки 0,7-2 глицерина, 0,752, KH POg 0,1 5-0,25, Ир 10 0,01-0,04, ЙНч NO 0,02-0,1, мела 0,015-0,4.
Йспопьзуемую в ферментационных колбах питательную среду готовят следующим образом: все перечисленные выше компоненты среды растворяют в водопроводной воде, устанавливают рН 5,7-5,9 и стерилизуют при
1 атм в течение 1 час.
Колбы засевают из расчета 5 4 вегетативного мицелия к объему ферментационной среды. Гриб выращивают на качалке с 160Составитель С. Кудрявцева
Редактор Д. Пинчук Техред М. Левицкая Корректор С. Бопдижар
Заказ 5299/1 27 Тираж 723 Подписное
ЫНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4