Штамм гриба ом-534-6-2 продуцент целлюлолитических ферментов

Штамм гриба ом-534-6-2 продуцент целлюлолитических ферментов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

О П И С А Н И Е, |взавао

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

Союз Советских

Социалистическин

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено23.06.75 (21)2147006/13 (51) М. Кл.L

С 12 К 1/00 с присоединением заявки №

Государственный комитет

Сооота Мнннотроа СССР по делам нзооретеннй н открытий (23) Приоритет (43) Опублнковано25.10.76,Бюллетень № 39 (53) УДК 663,11 (088.8 ) (45)Дата опубликования описания,22.02.77

А. Г. Лобанок MI Е, Бекер, P П. Зелтыня, Р. Я, Карклинь, И. М. Эджиньш, 8. В. Сметанин и Л. Т. Богомазова (72) Авторы изобретения (71} Заявитель

Отдел микробиологии АН Белорусской ССР (54) ШТАММ ГРИБА Ttiebodelma Ю УттОготп ON;534 6 2

ПРОДУБЕНТ БЕЛЛЮЛОЛИТИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ

Изобретение относится к области микро- . биолот ического производства и касается нового штамма.Т| 1с|тоде| ma Cigaorцтт| ОМ 534-6-2, продуцируюптего целлюлолитические ферменты на питательной среде с разбавленной молочной сывороткой.

Используемые в настоящее время для получения целлюлолитических ферментов в глубинных условиях шгаммы грибов активно продуцируют целлюлазу лишь на средах, . |л содержащих специфический индуктор биосин теза - целлюлозу или ее производные.

Известен штамм Т| 1сЪосе| а о| 6ig not мт 543, продуцирующий целлюлолитические ферменты как на среде с целлюлозой, так и на | 1а питательной среде с молочной сывороткой(1).

Однако этот штамм не нашел практичес кого использования вследствие недостаточно высокой активности синтеза целлюлаз и длительного срока культивирования (96 час).оо

Белью изобретения является получение штамма гриба с более высоким уровнем синтеза целлюлаэы на среде с растворимым, „источником углерода (лактоэой) и сокращен,ныц сроком ферментации. 26

Штамм гриба Тате)тоде| ma т,т rIorvw

ОМ 534-6-2 получен из штамма T,Ь ттот цтп

534 путем многократного рассева исходной кульгуры и последующего отброса активных вариантов, Морфологические признаки. На сусло-агвре мицелий септирован, недифференцирован, в клетках несколько ядер, размеры клеток мицелия 3-5 х 15-20 мК, конидиеносцы формируются на 32-34 час в виде боковых ответвлений гиф, ди- или трихотомически ра оветвленные, бесцветные, стеригмы бутыльчатые, утолщенные посередине, супротивные или мутовчатые, размеры 3 - S х 6 - 10мК, конидии окончательно формируются к 4246 час, округлые или эллипсовидные, раэмеры2,5-35 мКи2,5-2,9 х 3,7 мК соответственно; с одним ядром, в массе зеленого цвета.

Культуральные признаки. На сусло-агаре на 4 сутки при 29"С, диаметр коло ши67 см, воздушный мицелий, белый, равномерНо приподнят IIQ краю колонпи, конидии в центре, центр сплошной уплотнен, зеленого пакета.

532620 втянут, в агар не врастает, рост концентрический.

На среде Чапека с сахарозой колония на 4 сутки заполняет всю чашку, мицелий белый, стелюшийся, быстро растуший, конидии в виде отдельных плотных образований без хохолков, темно-зеленого цвета, расположены по концентрической окружности на некотором расстоянии от центра.

На сингетической среде Чапека с куку- Я рузчым экстрактом и целлюлазой рост активный, на 3-4 сутки колония заполняет всю чашку, воздушный мицелий войлочный, белый или сероватый, по краю колонии приподня г, конидиеобразование обильное, конидии в центре, центр колонии уплотнен, сплошной, темно-зеленого цвета, ограничен концентрически.

На картофельно-декстрозном агаре кодо- 20 ния на 4 сутки достигает 9-10 см в диаметре. Край ровный, воздушный мицелий пушистый, белый, конидии в центре объединены в густо расположенные подушечки, среда не пигьентирована.

Биохимические признаки. Изучение штамма T.11 йо цгп ОМ 534-6-2 показало, что он активно гидропизует крахмал, молоко свертывает на 4-5 сутки (рН 5,8-6,0), но пептонизирует его медленно к 20-25 суткам (рН 7,8-7,9) „Желатину не разжи жаег, Использует аммонийную, нитратную и белковую формы азота. Ассимилирует глюкозу, галактозу, мапьгозу, лакгозу, инозит, глицерин, сахарозу, арабинозу, маннит, З рамнозу, сорбиг.

Штамм интенсивнее продуцирует целлюлазу при росте на среде с разбавленной молочной сывороткой, нежели исходный штамм

Т L 1g so r u m 534. Характерной особенностью описываемого штамма является также меньший срок ферментации. Максимум накопления целлюлаз в купьтурапьной жидкости на

66-72 час в колбах на качалке. При куль- 4 тивировании штамма Т. Lignorum ОМ 5346-2 ферментерах емкостью 150 и культуральная жидкость на 60-64 час характеризуется следующими показателями: содержание белка — 1,1 мг/мл С ед/мл-3,1,®

С ед/мл - 3,5, С„ед/мл - 2,1, гидролизует ватманскую бумагу за 24 час - 50%.

Препараты целлюпазы, выделенные пу ген осаждения различными осадигепями, имеют 55 следующие показатели.

Препарат, полученный путем осаждения сульфатом аммония: 800 С eg/r, 1000

< ед/г и 1500 С, ед/г препарата, содержание белка в препарате 20%. 66

Препарат, полученный осаждением танином с жепатиной: 1000 С ед/г, 1200

С„ед/г и 2000 С ед/г препарата.

Формула изобретения

Штамм гриба Trichodetma В гмогом

ОМ 534-6-2 продуценг целлюполитических ферментов, хранится в музее лаборатории регуляции биосингеза ферментов отдела микробиологии АН БССР.

Морфологические признаки. На сусло-агапе мицелий септирован, недифференцирован, з клетках несколько ядер, размеры клеток мицелия 3-5 х 15-20 мК, конидиеносцы формируются на 32-34 час в виде боковых ответвлений гиф, ди-или грихотомически разветвленные, бесцветные, стеригмы бутыльчатые, утолшенные посредине, супротивные или мутовчатые, размеры 3-5 х 6-10 мК, конидии окончательно формируются к 4246 час, округлые или эллипсовидные размеры 2,5-3,5 мК и 2,5-2,9 х 3,7-3,9 мК соответственно, с одним ядром, в массе зеленого цвета.

Кульгуральные признаки. Сусло-агар. На о

4 сутки при температуре 29 С, диаметр колонии 6-7 см, воздушный мицелий, белый, равномерно приподнят по краю колонии, конидии в центре, центр сплошной, уплотнен, зеленого цвета, втянут, в агар не врастает, рост концентрический.

Среда Чапека с сахарозой. Колония на

4 сутки заполняет всю чашку, мицелий белый, стелюшийся, быстро растуший, конидии в виде отдельных плотных образований без хохолков, темно-зеленого цвета, располож ны по концентрической окружности на некотором расстоянии от центра.

Синтетическая среда с кукурузным экстрактом и целпюлазой. Рост активный, на

3-4 сутки колония заполняет всю чашку, воздушный мицелий войлочный, белый или сероватый, по краю колонии приподнят, конидиеобразование обильное, конидии в центре, центр колонии уплотнен, сплошной, ген но-зеленого цвета, ограничен концентрически.

Картофельно-декс грозный агар. Колония на 4 сутки достигает 9-10 см в диаметре.

Край ровный, воздушный мицелий пушистый, белый, конидии в центре объединены в густо расположенные подушечки, среда не пигменгирована, Биохимические признаки. Активно гидропизует крахмал, молоко свертывает на 45 сутки (рН 5,8-6,0), пептонизирует его медленно к 20-25 суткам (рН 7,8-7,9), желатину не разжижает, использует аммо532620

Составитель Т. Серебренникова

Редактор А. Бер Техред О. Луговая Корректор С. Шекмар

Заказ 5464/185 Тираж 575 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4 нийную, нитратную, белковую формы азота, ассимилирует глюкозу, маннит, рамнозу, сорбит, особенно активы< лактозу, сахарозу, арабинозу.

Штамм обладает высоким уровнем синге- за целлюлозы, активнб продуцирует фермент при росте на отходе молочной промышлен6 ности — разбавленной молочной сыворотке (лактозе), имеет сокрашенный период ферментапии — 60-64 часа, Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

1. Вестник АН Белорусской CCF"¹ 3, 1968, с. 108-110 (прототип).