Способ получения пектолитических ферментных препаратов из растворов

Способ получения пектолитических ферментных препаратов из растворов

Иллюстрации

Показать все

Реферат

 

О П И С А Н И Е !! 535345

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Со!оз Советскик

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свпд-ву (22) Заявлено 18,07.75 (21) 2158115/13 с присоединением заявки № (23) Приоритет

Опубликовано 15.11,76. Бюллетень № 42

Дата опубликования описания 13.12.76 (51) М. Кл."" С 12D 13i10

Государственный комитет

Совета Министров СССР ло делам изобретений и открытий (53) УДК 577.15.07 (088.8) (72) Авторы изобретения

Б. А. Величко, К. А. Калунянц и 3. Г. Ашомко

Всесоюзный научно-исследовательский биотехнический институт (71) Заявитель

Йзооретениб относится к микроб!1ологической промышленности, в частности к ферментной, а именно для получения пектолитических ферментных препаратов из растворов.

Известен спосоо получения пек!олитических ферментных препаратов из растворов, предусматривающий подкисление раствора, смешивание его с органическим растворителем, разделение полученной суспензии на твердую и жидкую фазы (1). Полученную твердую фазу высушивают и .используют в промышленности.

Недостатком известного способа является не.возможность раздельного получения препаратов, преимущественно содержащих пектинэстеразу и полигалактуроназы.

С целью выделения препаратов с преимущественным содержанием пектинэстеразы и полигалактуро назы в предлагаемом способе:подкисление раствора осуществляют до рН 2,0—

3,0, а смешивание с органическим растворителем ведут до рН смеси 3,5 — 4,0 для преимущественного осаждения пектинэстеразы, при этом в жидкую фазу вводят стабилизатор и затем смешивают ее с органическим растворителем до достижения рН смеси 4,5 — 6,0, и полученный осадок, преимущественно содержащий полигала! туроназу, отделяют от жидкости.

Ферментный раствор, например концентрат культуральной жидкости, подкисляют до pll

2,0 — a,U, например, цитратфосфатным áóipåром, охлаждают до Π— 4 С, дооавляют пред5 варительно охлажденный органический растворитель, такой как ацетон, пропанол, эта H0JI, до достижения рН смеси д,5 — 4,0, смесь выдерживают в течение 2 — !О мин, полученную суспензию разделяют на твердую и жпд1р кую фазы. 1 вердую промывают органическим растворителем, cушат и !!За!ель1! а(0 Г, 1!0J1)"÷dÿ !ipi!

3T0ixI Ilpeiiap3T, преимущественно содержащий пектинэстеразу (60% от исходного количества

15 в растворе), другие же ферменты, входящие в раствор, такие, как полигалактуроназы, переходят в осадок до 20%.

В жидкую фазу добавляют водный раствор

20 стабилизатора, например содержащии ионы аммония, алюминия и титана в количестве 2—

7о о на 1 л, перемешивают в течение 3 — 10 мин, добавляют органический растворптель до достижения pl-l смеси 4,5 — 6,5. Полученный оса25 док отделяют, высушивают и измельчают.

Пример. Берут концентрированнную культуральную жидкость, полученную при выращивании 4spergillus foefidus, имеющую рl l

535345

Формула изобрстения

Составитель Ь. Величко

Техред М. Семенов

1(орректор Е. Хмелева

Редактор Г. Новожилова

Заказ 2489/15 Изд. Ко 1776 Тираж 575 Подписное

Ц1-!ИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типографии, пр. Сапунова, 2

4,0, добавляют цитратфосф атный буфер до рН 3,0, охлаждают до 0 С, перемешивают, добавляют охлажденный ацетон до рН смеси

3,5, выдерживают в течение 5 мин и полученный осадок отделяют центрифугированием, выслпивают и измельчают.

Полученный препарат содержит 80 /о пектинэстеразы и 20 остальных ферментов пектолитического комплекса (полигалактуроназ) от исходного содержания их в культуральной жидкости.

К фугату, полученному при центрпфугировании, добавляют стабилизатор, содержащий смесь сульфата аммония, сульфата аммония и фосфорнокислого титана, в количестве 3 /о, а затем ацетон до рН 4,7, смесь выдерживают в течение 5 мин, полученный осадок отделяют; промывают органическим растворителем и высушивают.

Получают ферментный препарат, содержащий 80 /о эндополигалактуроназы и 20 /о остальных ферментов пектолитического комплекса от исходного содержания ферментов в растворе.

Способ получения пектолитических фермен. тных препаратов из растворов, например куль

5 туральной жидкости, предусматривающий под кисление раствора, смешивание его с органи ческим растворителем, разделение полученной при этом суспензии на твердую и жидкую фа зы, отличающийся тем, что, с целью вы

10 деления препаратов,с преимущественным со держанием пектинэстеразы и полигалактуроназы, подкисление раствора осуществляют до рН 2,0 — 3,0, а смешивание с органическим рас творителем ведут до рН смеси 3,5 — 4,0 для

15 преимущественного осаждения пектинэстера зы, при этом вжидкуюфазувводятстабилиза тор и затем смешивают ее с органическим растворителем до достижения рН смеси 4,5 — 6,0 и полученный осадок, преимущественно содер20 жащий полигалактуроназу, отделяют от >кидкости.

Источник информации, принятый во внимание при экспертизе заявки: (1). Авторское свидетельство № 343991, 25 02.08.1972 r., класс С 12Р 13/10 (прототип).