Способ получения хорионического гонадотропина
Иллюстрации
Показать всеРеферат
= 6 » МЬг„»
О П И С А Н И Е <»> взтввi
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
Союз Советских
Сочиалистииеских
Республик
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 16.05.75 (21) 2134002/13 с присоединением заявки №вЂ” (23) Приоритет (51) М. Кл.
А61 К37/38
Гасударственный комитет
Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий (43) Опубликовано05.12.76.Бюллетень №45 (53) УДК 577.17 (088.8) (45) Дата опуоликования описания 25.01.77
Ф. Ki, Рышка, Н. K. Ассэнэва, В. Ф. Аникеев, Л. С. Грабовская, E. И. Кандыба и П. Я. П1ейфер (72) Авторы изобретения
Всесоюзный научно-исследовательский институт технэлэгии кровезаменителей и гэрмэналLHbIx препаратов (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ХОРИОНИЧЕСКОГО
ГОНАДОТРОПИНА
Изобретение относится к фармацевтической промышленности и может быть использовано в медицине в качестве лечебного средства.
Известен способ получения хорионического гонадотропина, заключающийся в том, что подкисленную и осветленную мочу беременных женщин сорбируют на каолине при рН 4,2 — 4,5,адсорбент отмывают дистиллированной водой при рН !О
4,2 — 4,5, адсорбат элюируют аммиаком при рН 1 1,3 — 1 1,5 с последующим выделением целевого продукта осаждения ацетоном (1).
Однако известный способ не обеспечивает высокого выхода и активности препарата.
Пелью изобретения является повышение выхода и активности препарата.
Достигается это тем, что адсорбцию gp осуществляют на каолине с кизельгуром, взятых в соотношении 1:1, а элюируют при рН 8,0 — 9,0 водным раствором гидроокиси аммония и кислоты, например, соляной или уксусной, в присутствии полярного органического растворителя, а в качестве полярного растворителя используют ацетон или спирт в концентрации 20-40% по объему.
Способ осуществляют следующим образом.
Подкисленную и осветленную мочу беременных женщин при рН 4,2 — 4,5 пропускают на нутч-фильтре под вакуумом через сорбируюший слой, состоящий из равных весовых соотношений каолина и кизельгура (на
1ОО л мочи по 700 r). Адсорбция длится
2 — 3 часа, в зависимости от размера фильтрующей площади. По окончании адсорбции слой промывают подкисленной дистиллированной водой рН 4,2 — 4,5 объемом, который составляет 0,1 от объема обрабатываемой мочи. После отмывки адсорбента, подкисленного дистиллированной водой, пропускают элюент, содержащий 1 H водный раствор гидроокиси аммония и кислоты, например соляной, до рН 8,0 — 9,0 с добавкой органического растворителя. Элюирование заканчивают водно-органическим растворителем до полного удаления хорио537681
Составитель С. Малютина
Редактор Н. Петрова Техред М. Ликович Корректор Н.Золотовская
Заказ 5593/2 Тираж 622 Подписное
БНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 нического гонадотропина. В обьединенных элюатах доводят рН до 5,2 — 5,5 и осаждают гормон добавлением ацетона до концентрации 70-75%. Осадку дают сформироваться на холоде.
Пример 1. Мочу беременных женшин после осветления в количестве
300 л, подкисленную до рН 4,5, пропускают под вакуумом через слой, состояший из 2100 г каолина и 2100 г кизельгура. После прохождения мочи слой промывают дистиллированной водой с рН
4.,5, а после отмывки пропускают 30 л
1 М раствора хлористого аммония, содержашего 40% ацетона, доведенного до рН
8,5. Элюирование проводят до полного удаления хорионического гонадотропина
12 л водно-ацетонового раствора, содержашего 40% ацетона. Элюаты объединяют, доводят до рН 5,3 и осаждают добавлением ацетона до концентрации 70-75%.
Осадку дают сформироваться на холоде.
Осадок отделяют m. маточника, промывают ацетоном и сушат. Вес сырца 15 г, удельная активность 850 Ejl/ìã, выход с 1 л сырья 42500 EQ.
Пример 2. Сорбцию и отмывку адсорбата проводят аналогично примеру 1, но элюирование хорионического гонадотропина проводят 30 л 1N раствора ацетата аммония, доведенного до рН 8,6, содержашим 40% этилового спирта. Слой вторично промывают 12 л водно-спиртового раствора. В объединенных элюатах снижают рН до 5,3 соляной кислотой (1:1) и дово4 дят концентрацию спирта до 80%. Выпавший осадок отделяют центрифугированием, промывают абсолютным спиртом и сушат.
Выход сырца хорионического гонадотропина 12,0 r, активность 950 ЕД/мг,выход с 1 л сырья 38000 ЕД.
Формула изобретения
1. Способ получения хорионического гонадотропина из мочи беременных женщин путем абсорбции с последующей промывкой дистиллированной водой, элю1б ированием адсорбата и выделением целевого продукта осаждением ацетоном, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода и активности препарата, адсорбцию осушествляют на ка® олине с кизельгуром, взятых в соотношении 1:l, а элюируют при рН 8,0 — 9,0 водным раствором гидроокиси аммония и кислоты, например соляной или уксусной, в присутствии полярного органического растворителя.
2.Способпоп. 1, отличаю— ш и и с я тем, что в качестве полярного растворителя использу от ацетон или
30 спирт в концентрации 20-40% по объему.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:
1. Регламент Минского завода эндокринных препаратов "Производство хорионического гонадотропина", раздел У, стр. 27-31, 1972 (прототип).